辣椒(jiao)疫黴(mei)菌(jun)

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實(shi)驗內(nei)容(rong):

1.稱(cheng)量>溶(rong)化→調(tiao)pH >)過濾>分裝(zhuang)>加(jia)塞>包(bao)紮>滅菌(jun)>無(wu)菌(jun)檢(jian)查

2.幹熱滅菌(jun):裝(zhuang)入(ru)待滅菌(jun)物(wu)品升(sheng)溫(wen)>恒(heng)溫(wen)>降(jiang)溫(wen)>開(kai)箱(xiang)取物(wu)

3.高(gao)壓(ya)蒸汽滅菌(jun)加水(shui)>裝(zhuang)物(wu)品>加(jia)蓋>加(jia)熱>排(pai)冷空(kong)氣(qi)+加(jia)壓(ya)>恒(heng)壓(ya)>降(jiang)壓(ya)回零》排(pai)汽>取物(wu). >無(wu)菌(jun)檢(jian)查

4.過濾除菌(jun):組裝(zhuang)滅菌(jun)>連(lian)接→壓(ya)濾>無(wu)菌(jun)檢(jian)查>清(qing)洗滅菌(jun)

低(di)溫(wen)存法:

公(gong)司(si)產(chan)品僅用(yong)於科研

①簡(jian)單(dan)保(bao)存法,將(jiang)瓊脂(zhi)斜面(mian)孢(bao)子培(pei)養(yang)物(wu)、菌(jun)絲(si)懸(xuan)浮(fu)液(ye)以及由(you)麩(fu)皮(pi)、大(da)米、小(xiao)米等(deng)谷物(wu)原(yuan)料(liao)制成(cheng)的孢(bao)子培(pei)養(yang)物(wu)置於4℃冰(bing)箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存時(shi)間不超(chao)過1 ~2個(ge)月(yue)，若(ruo)將谷物(wu)原(yuan)料(liao)制備(bei)的孢(bao)子瓶(ping)抽真空並在(zai)棉塞上(shang)浸蠟(la),以隔(ge)絕(jue)外界空氣(qi)和(he)水(shui)汽,保(bao)持時(shi)間可達3~ 4個(ge)月(yue);②液(ye)氮超(chao)di溫(wen)保(bao)存法,將(jiang)生長(chang)穩(wen)定(ding)期(qi)懸(xuan)浮(fu)在(zai)10%甘油或(huo)其他低(di)冰點(dian)液體(ti)中,密封於安瓿管內，然後控(kong)制冷卻(que)速(su)度,使安瓿(bu)管(guan)溫(wen)度逐步(bu)下降(jiang)至(zhi)-35℃時(shi)， 即可置於-150 ~-196℃的液(ye)氮(dan)罐中保(bao)存。大(da)多(duo)數(shu)微生物(wu)如病毒、噬(shi)菌(jun)體、多(duo)種細菌(jun)、放線(xian)菌(jun)、酵母(mu)和(he)原(yuan)蟲、特別(bie)是壹些用(yong)冷凍幹燥(zao)法(fa)有(you)困難的微生物(wu),都(dou)可用(yong)此(ci)法(fa)長(chang)期保(bao)存。

微生物(wu)菌(jun)種的培(pei)養(yang):

辣椒(jiao)疫黴(mei)菌(jun)

1孢(bao)子制(zhi)備

(1)放線(xian)菌(jun)孢(bao)子的制(zhi)備(bei)

壹般(ban)采用(yong)瓊脂(zhi)斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji),培(pei)養(yang)基(ji)中含有(you)壹些適(shi)合(he)產(chan)孢(bao)子的營(ying)養(yang)成(cheng)分,如麩(fu)皮(pi)、豌(wan)豆浸汁、蛋(dan)白腖(dong)和(he)壹些無(wu)機鹽(yan)等(deng)。碳源(yuan)和(he)氮源(yuan)不要(yao)太(tai)豐富（碳源(yuan)約為1%,氮(dan)源(yuan)不超(chao)過0.5%),碳源(yuan)豐富容(rong)易造成(cheng)生理酸性的營(ying)養(yang)環(huan)境(jing),不(bu)利於放線(xian)菌(jun)孢(bao)子的形(xing)成(cheng)，氮(dan)源(yuan)豐富則(ze)有利(li)於菌(jun)絲(si)繁(fan)殖(zhi)而不(bu)利於孢(bao)子形(xing)成(cheng)。壹般情況(kuang)下， 幹燥(zao)和(he)限(xian)制營(ying)養(yang)可直接或間接誘導孢(bao)子形(xing)成(cheng)。放線(xian)菌(jun)斜面(mian)的培(pei)

養(yang)溫(wen)度大(da)多(duo)數(shu)為28℃,少(shao)數(shu)為37 ℃,培(pei)養(yang)時(shi)間為5~ 14天(tian)。

(2)黴(mei)菌(jun)孢(bao)子的制(zhi)備(bei)

黴(mei)菌(jun)的孢(bao)子培(pei)養(yang),壹般以大(da)米、 小(xiao)米、玉(yu)米、麩(fu)皮、麥(mai)粒(li)等(deng)天(tian)然農(nong)產(chan)品為培養(yang)基(ji)。這(zhe)是由(you)於這(zhe)些農產(chan)品中的營(ying)養(yang)成(cheng)分較(jiao)適(shi)合(he)黴(mei)菌(jun)的孢(bao)子繁(fan)殖，而(er)且這(zhe)類培(pei)養(yang)基(ji)的表(biao)面(mian)積(ji)較(jiao)大(da)，可(ke)獲得大(da)量的孢(bao)子。黴(mei)菌(jun)的培(pei)養(yang)-般(ban)為25~ 28 ℃,培(pei)養(yang)時(shi)間為4~ 14天(tian)。

2種(zhong)子制(zhi)備

(1)搖瓶(ping)種(zhong)子制(zhi)備

搖瓶(ping)種(zhong)子進罐,常(chang)采用(yong)母(mu)瓶(ping)、子瓶(ping)兩級培(pei)養(yang),有(you)時(shi)母(mu)瓶(ping)種(zhong)子也(ye)可以直接進罐。種子培(pei)養(yang)基(ji)要(yao)求比(bi)較(jiao)豐富,並(bing)易被(bei)菌(jun)體分解利(li)用(yong)，氮源(yuan)豐富有(you)利(li)於菌(jun)絲(si)生長(chang)。原(yuan)則(ze)上(shang)各(ge)種營(ying)養(yang)成(cheng)分不宜(yi)過濃(nong),子瓶(ping)培(pei)養(yang)基(ji)濃(nong)度比(bi)母(mu)瓶(ping)略(lve)高,更(geng)接近(jin)種(zhong)子罐的培(pei)養(yang)基(ji)配(pei)方。

(2)種(zhong)子罐種子制(zhi)備

種(zhong)子罐種子制(zhi)備的工(gong)藝過程(cheng),因菌(jun)種不(bu)同(tong)而異(yi)，壹般可(ke)分為壹級種(zhong)子、 二(er)級種(zhong)子和(he)三級種(zhong)子的制(zhi)備(bei)。孢(bao)子(或(huo)搖瓶(ping)菌(jun)絲(si))被(bei)接入到(dao)體積(ji)較(jiao)小(xiao)的種(zhong)子罐中,經(jing)培養(yang)後形成(cheng)大(da)量的菌(jun)絲(si)，這(zhe)樣的種(zhong)子稱(cheng)為壹級種(zhong)子， 把(ba)壹級種(zhong)子轉(zhuan)入發酵罐內發酵，稱為二級發酵。如果(guo)將壹級種(zhong)子接入體(ti)積(ji)較(jiao)大(da)的種(zhong)子罐內,經(jing)過培養(yang)形成(cheng)更(geng)多(duo)的菌(jun)絲(si),這(zhe)樣制(zhi)備(bei)的種(zhong)子稱(cheng)為二級種(zhong)子，將(jiang)二級種(zhong)子轉(zhuan)入發酵罐內發酵稱為三級發酵。同(tong)樣道(dao)理,使用(yong)三級種(zhong)子的發酵,稱(cheng)為四級發酵。

脫水(shui)存法:

①沙(sha)土(tu)保(bao)存法,能(neng)產(chan)孢(bao)子的細(xi)菌(jun)、放線(xian)菌(jun)及黴(mei)菌(jun)可采(cai)用(yong)此(ci)法(fa)保(bao)存，即將沙(sha)和(he)土(tu)以3:2比(bi)例(li)混(hun)合(he)經(jing)稀酸處理(li)洗(xi)凈(jing)過篩(shai),裝(zhuang)入(ru)小(xiao)試(shi)管內(nei)裝(zhuang)置高(gao)度為1cm滅菌(jun)2~ 3次,烘(hong)幹後即可將(jiang)在(zai)斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)生長(chang)良好的孢(bao)子,用(yong)無(wu)菌(jun)蒸餾(liu)水(shui)2~ 2.5m制(zhi)成(cheng)孢(bao)子懸(xuan)液(ye)，吸取少許(xu)加(jia)入沙土(tu)管中,經(jing)真空抽幹,外觀(guan)呈松(song)散狀態(tai),於4℃冰(bing)箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存期可(ke)達5 ~7年(nian)。

②冷(leng)凍幹燥(zao)法(fa),將(jiang)孢(bao)子懸(xuan)浮(fu)液(ye)與保(bao)護劑相混(hun)合(he), 放在(zai)安瓿(bu)管內於-20 -30℃的乙醇浴中速(su)凍。然(ran)後,在(zai)低(di)溫(wen)下用(yong)真空泵抽幹,用(yong)幹冰使水(shui)汽結凍,熔封(feng)安瓿管(guan),於低(di)溫(wen)下保(bao)存。保(bao)存期可(ke)達5~ 10年(nian)之久(jiu)。

③石(shi)蠟(la)油封(feng)存法,在(zai)斜面(mian)菌(jun)種培(pei)養(yang)物(wu)上(shang),倒(dao)上(shang)滅菌(jun)後的石(shi)蠟(la)油,高(gao)出斜(xie)面(mian)1cm,於4℃冰(bing)箱(xiang)或(huo)低(di)溫(wen)幹燥(zao)處(chu)保(bao)存，此(ci)法(fa)不(bu)適(shi)用(yong)於能(neng)利(li)用(yong)石蠟(la)油作碳源(yuan)的微生物(wu)，保(bao)存期為壹年(nian)以上(shang)。

菌(jun)種的具(ju)體保(bao)存方法(fa)

   微生物(wu)具(ju)有容(rong)易變(bian)異的特(te)性(xing)，因此(ci)，在(zai)保(bao)藏過程(cheng)中，必須(xu)使微生物(wu)的代(dai)謝處於不活躍或相對(dui)靜(jing)止的狀態(tai)，才(cai)能(neng)在(zai)壹定(ding)的時(shi)間內使其不發生變異(yi)而又(you)保(bao)持生活能(neng)力(li)。

低(di)溫(wen)、幹燥(zao)和(he)隔(ge)絕(jue)空氣(qi)是使微生物(wu)代謝能(neng)力(li)降(jiang)低(di)的重(zhong)要(yao)因素，所以，菌(jun)種保(bao)藏方法雖多，但都(dou)是根(gen)據(ju)這(zhe)三個(ge)因素而(er)設(she)計(ji)的。

菌(jun)種保(bao)藏方法大(da)致可分為以下幾(ji)種(zhong)：

1．傳代培(pei)養(yang)保(bao)藏法又(you)有(you)斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)、穿刺(ci)培養(yang)、皰肉培養(yang)基(ji)培養(yang)等（後者(zhe)作保(bao)藏厭氧細菌(jun)用(yong)），培養(yang)後於4—6℃冰(bing)箱(xiang)內(nei)保(bao)存。

2．覆蓋保(bao)藏法是傳代培(pei)養(yang)的變(bian)相方法(fa)，能(neng)夠(gou)適(shi)當延長(chang)保(bao)藏時(shi)間，它(ta)是在(zai)斜面(mian)培(pei)養(yang)物(wu)和(he)穿刺(ci)培養(yang)物(wu)上(shang)面(mian)覆蓋滅菌(jun)，壹方面(mian)可(ke)防(fang)止因培養(yang)基(ji)水(shui)分蒸發而引起(qi)菌(jun)種死(si)亡(wang)，另壹方面(mian)可(ke)阻(zu)止氧氣(qi)進入，以減(jian)弱(ruo)代謝作用(yong)。

   載體(ti)保(bao)藏法是將(jiang)微生物(wu)吸附(fu)在(zai)適(shi)當的載體(ti)，如土(tu)壤(rang)、沙子、矽膠(jiao)、濾紙(zhi)上(shang)，而後(hou)進行幹燥(zao)的保(bao)藏法，例(li)如沙(sha)土(tu)保(bao)藏法和(he)濾紙(zhi)保(bao)藏法應用(yong)相當廣(guang)泛。

   寄(ji)主(zhu)保(bao)藏法用(yong)於目前(qian)尚(shang)不能(neng)在(zai)人工(gong)培養(yang)基(ji)上(shang)生長(chang)的微生物(wu)，如病毒、立克(ke)次氏(shi)體、螺(luo)旋體(ti)等，它(ta)們(men)必須(xu)在(zai)生活的動(dong)物(wu)、昆蟲、雞胚內感染(ran)並傳代，此(ci)法(fa)相當於壹般微生物(wu)的傳代培(pei)養(yang)保(bao)藏法。病毒等微生物(wu)亦可(ke)用(yong)其他方(fang)法(fa)如液(ye)氮(dan)保(bao)藏法與冷凍幹燥(zao)保(bao)藏法進行保(bao)藏。

5．冷(leng)凍保(bao)藏法可分低(di)溫(wen)冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰酒精快速(su)凍結(jie)（約-70℃）和(he)液氮（-196℃）等(deng)保(bao)藏法。

冷(leng)凍幹燥(zao)保(bao)藏法先(xian)使微生物(wu)在(zai)極低(di)溫(wen)度（-70℃左(zuo)右）下快速(su)冷凍，然(ran)後在(zai)減(jian)壓(ya)下利用(yong)升(sheng)華現(xian)象除(chu)去水(shui)分（真空幹燥(zao)）。

我司(si)在(zai)重視產(chan)品質量的同(tong)時(shi)，也(ye)建立了(le)壹套集(ji)技術(shu)支(zhi)持、物(wu)流(liu)、售(shou)後(hou)服務等(deng)多個(ge)部門(men)的服(fu)務體(ti)系(xi)，努力(li)把(ba)我們(men)方(fang)便(bian)、快捷、周到(dao)的服(fu)務提(ti)供(gong)給(gei)每壹個(ge)客戶(hu)。