ELISA實(shi)驗出(chu)現異常的(de)原(yuan)因(yin)分析

ELISA實(shi)驗是(shi)我(wo)們大家(jia)最常見的(de)實(shi)驗,也是(shi)比(bi)較容易(yi)出(chu)問(wen)題(ti)的(de)實(shi)驗,可(ke)能妳壹不(bu)小(xiao)心(xin),妳的(de)整個(ge)實(shi)驗便是(shi)無(wu)功(gong)能(neng)重來(lai)那!所(suo)以(yi)小編(bian)給您(nin)講(jiang)解在使用ELISA試劑盒做實(shi)驗的(de)時(shi)候(hou)，有些(xie)細(xi)節若(ruo)是(shi)做(zuo)不好會(hui)出(chu)現實(shi)驗異常，或(huo)者效(xiao)果(guo)不佳(jia)，那麽妳有想過(guo)是(shi)什(shen)麽原因(yin)嗎(ma)？

壹、白板(ban)異常：顯色步驟(zhou)結束後(hou)，酶標(biao)板(ban)所(suo)有孔(kong)均(jun)無顏(yan)色。陽性(xing)對(dui)照不(bu)顯色。

1. 試劑已過效(xiao)期(qi)，或(huo)不同試劑盒組(zu)分混用（解決方式(shi)：檢查試劑的(de)組(zu)分及批(pi)號，確(que)認(ren)未過期以(yi)及所(suo)有組(zu)分均屬(shu)對(dui)應的(de)試劑盒。不同試劑盒或(huo)不同批(pi)號的(de)試劑不能混用）。

2. 錯(cuo)加、漏(lou)加試劑底(di)物、顯色劑 A或(huo)B（解決方式(shi)：嚴格按說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)步(bu)驟操作，加完試劑後(hou)可(ke)觀(guan)察(cha)壹下液面高(gao)度(du)是(shi)否壹致，以(yi)減少漏加現象(xiang)）。

3. 洗(xi)板(ban)及加(jia)樣(yang)過(guo)程(cheng)中，酶標(biao)受汙(wu)染(ran)失活失去(qu)催化(hua)顯色劑顯色的(de)能(neng)力（解決方式(shi)：確認盛(sheng)酶標(biao)的(de)容器不(bu)含酶抑制劑如(ru)疊氮鈉(na)等(deng)，確認配(pei)制洗(xi)液的(de)容器已(yi)洗(xi)幹凈）。

4. 終止液(ye)誤作洗(xi)滌液稀(xi)釋(shi)或(huo)當底(di)物緩沖液(ye)配制(zhi)（解(jie)決方式(shi)：每(mei)次(ci)配(pei)制(zhi)時(shi)都(dou)應(ying)看(kan)清(qing)標(biao)簽標(biao)明(ming)物(wu)質(zhi)）。5. 蒸(zheng)餾水(shui)有問(wen)題(ti)（解(jie)決方式(shi)：確認配(pei)制洗(xi)液的(de)純(chun)化(hua)水(shui)達到要求且(qie)未(wei)汙(wu)染，與好蒸(zheng)餾(liu)水(shui)比(bi)較）。·顯色弱(ruo)、靈(ling)敏度(du)低：實(shi)驗結束後(hou)，包括陽性(xing)對(dui)照、質(zhi)控在內(nei)的(de)所(suo)有板(ban)孔(kong)顏(yan)色均較淡。

二、陰(yin)陽(yang)性對(dui)照正(zheng)常，但質(zhi)控、參考品(pin)或(huo)個(ge)別(bie)弱(ruo)陽性(xing)標(biao)本未(wei)能(neng)檢出(chu)。

1. 未達(da)要求的(de)孵育(yu)溫(wen)度(du)及孵育(yu)時(shi)間(jian)可(ke)檢出(chu)強陽性(xing)標(biao)本，但(dan)質(zhi)控或(huo)弱(ruo)陽性(xing)標(biao)本受(shou) 溫(wen)度(du)變化(hua)影(ying)響較大而(er)被(bei)未檢出(chu)（解決方式(shi)：質(zhi)控品或(huo)標(biao)本避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)。標(biao)本在(zai)壹周(zhou)內(nei)使(shi)用的(de)，可(ke)存(cun)於 2-8℃，如(ru)需(xu)長(chang)期(qi)保存(cun)，應置(zhi)於-20℃以(yi)下保存(cun)。質(zhi)控品應小(xiao)量(liang)分裝(zhuang)，並置(zhi)於-20℃以(yi)下保存(cun)）。

2. 質(zhi)控品或(huo)標(biao)本高(gao)溫(wen)放(fang)置(zhi)過(guo)久，或(huo)被(bei)反(fan)復凍(dong)融(rong)致待(dai)測(ce)物滴(di)度下降，而(er)未能(neng)檢出(chu)（解決方式(shi)：重新(xin)設定(ding)酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)參(can)數，特別(bie)是(shi)檢查濾(lv)光片(pian)是(shi)否匹配）。

3. 儀(yi)器設(she)定(ding)不(bu)正確(que)，濾(lv)光片(pian)不(bu)匹配（解(jie)決方式(shi)：重新(xin)設定(ding)酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)參(can)數，特別(bie)是(shi)檢查濾(lv)光片(pian)是(shi)否匹配）。

三(san)、實(shi)驗結束後(hou)，陰(yin)陽(yang)性對(dui)照正(zheng)常，質(zhi)控正常，但臨(lin)床(chuang)標(biao)本感覺(jiao)顯色較弱(ruo)

1. 待(dai)測(ce)標(biao)本中可(ke)能不含強陽性(xing)標(biao)本，故(gu)結果可(ke)能是(shi)正(zheng)常的(de)（解(jie)決方式(shi)：如(ru)有懷(huai)疑(yi)，可(ke)復檢）。

2. 標(biao)本加(jia)入(ru)疊氮鈉(na)作為(wei)防(fang)腐(fu)劑（解決方式(shi)：酶免實(shi)驗中的(de)標(biao)本禁(jin)用疊氮鈉(na)作為(wei)防(fang)腐(fu)劑，可(ke)選用 proclin、硫柳(liu)汞等其(qi)他(ta)防(fang)腐(fu)劑）。