綠(lv)色(se)木(mu)黴菌

綠色(se)木(mu)黴菌

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實(shi)驗內容(rong):

1.稱量(liang)>溶化→調(tiao)pH >)過(guo)濾(lv)>分裝(zhuang)>加(jia)塞(sai)>包紮(zha)>滅菌>無(wu)菌檢(jian)查(zha)

2.幹熱(re)滅菌:裝入待滅菌物(wu)品升(sheng)溫(wen)>恒溫(wen)>降溫(wen)>開(kai)箱(xiang)取物(wu)

3.高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽滅菌加(jia)水(shui)>裝物(wu)品>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱(re)>排冷(leng)空(kong)氣(qi)+加(jia)壓(ya)>恒壓(ya)>降壓(ya)回(hui)零(ling)》排汽>取物(wu). >無(wu)菌檢(jian)查(zha)

4.過(guo)濾(lv)除菌:組(zu)裝滅菌>連接→壓(ya)濾(lv)>無(wu)菌檢(jian)查(zha)>清洗(xi)滅菌

低溫(wen)存(cun)法(fa):

公(gong)司產(chan)品僅用(yong)於科(ke)研(yan)

①簡(jian)單保(bao)存法(fa),將(jiang)瓊(qiong)脂(zhi)斜(xie)面(mian)孢(bao)子(zi)培(pei)養物(wu)、菌絲(si)懸(xuan)浮(fu)液以及由麩(fu)皮(pi)、大(da)米、小(xiao)米(mi)等谷物(wu)原(yuan)料(liao)制(zhi)成的(de)孢(bao)子(zi)培(pei)養物(wu)置於4℃冰箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存時(shi)間(jian)不(bu)超(chao)過(guo)1 ~2個月(yue)，若(ruo)將(jiang)谷物(wu)原(yuan)料(liao)制(zhi)備(bei)的(de)孢(bao)子(zi)瓶(ping)抽真(zhen)空(kong)並(bing)在棉(mian)塞(sai)上浸(jin)蠟(la),以隔絕(jue)外界(jie)空(kong)氣(qi)和(he)水(shui)汽,保(bao)持時(shi)間(jian)可(ke)達(da)3~ 4個月(yue);②液氮(dan)超(chao)di溫(wen)保(bao)存法(fa),將(jiang)生長穩定(ding)期(qi)懸(xuan)浮(fu)在10%甘油(you)或(huo)其(qi)他(ta)低冰點(dian)液(ye)體中(zhong),密封於安(an)瓿(bu)管(guan)內，然(ran)後控制(zhi)冷(leng)卻速度,使(shi)安(an)瓿(bu)管(guan)溫(wen)度逐步下降(jiang)至(zhi)-35℃時(shi)， 即可(ke)置(zhi)於-150 ~-196℃的(de)液氮(dan)罐(guan)中(zhong)保(bao)存。大(da)多(duo)數微(wei)生物(wu)如(ru)病(bing)毒(du)、噬(shi)菌體、多(duo)種細菌、放線(xian)菌、酵(jiao)母(mu)和原(yuan)蟲、特(te)別(bie)是(shi)壹些(xie)用(yong)冷(leng)凍幹燥(zao)法有困(kun)難(nan)的(de)微(wei)生物(wu),都可用(yong)此法(fa)長期(qi)保(bao)存。

微(wei)生物(wu)菌種的(de)培(pei)養:

綠色(se)木(mu)黴菌

1孢(bao)子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)放線(xian)菌孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

壹般采用(yong)瓊(qiong)脂(zhi)斜(xie)面(mian)培(pei)養基,培(pei)養基中(zhong)含(han)有壹些(xie)適合產(chan)孢(bao)子(zi)的(de)營養成分,如(ru)麩(fu)皮(pi)、豌豆浸(jin)汁(zhi)、蛋白腖和壹些(xie)無(wu)機鹽等。碳源和(he)氮源不(bu)要太豐富（碳源約(yue)為1%,氮源不(bu)超(chao)過(guo)0.5%),碳源豐(feng)富容易造成生理酸性的(de)營養環境,不(bu)利(li)於放線(xian)菌孢(bao)子(zi)的(de)形(xing)成，氮源豐(feng)富則有利(li)於菌絲(si)繁(fan)殖(zhi)而(er)不(bu)利(li)於孢(bao)子(zi)形(xing)成。壹般情況(kuang)下， 幹燥(zao)和限(xian)制(zhi)營(ying)養可直接或間(jian)接誘(you)導(dao)孢(bao)子(zi)形(xing)成。放線(xian)菌斜(xie)面(mian)的(de)培(pei)

養溫(wen)度大多(duo)數為28℃,少數為37 ℃,培(pei)養時(shi)間(jian)為(wei)5~ 14天(tian)。

(2)黴菌孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

黴菌的(de)孢(bao)子(zi)培(pei)養,壹般以大(da)米(mi)、 小(xiao)米(mi)、玉(yu)米(mi)、麩(fu)皮(pi)、麥(mai)粒(li)等天(tian)然農(nong)產(chan)品為培(pei)養基。這(zhe)是(shi)由於這些(xie)農(nong)產(chan)品中(zhong)的(de)營養成分較適合黴菌的(de)孢(bao)子(zi)繁(fan)殖(zhi)，而(er)且這(zhe)類(lei)培(pei)養基的(de)表(biao)面(mian)積(ji)較大(da)，可獲得大(da)量(liang)的(de)孢(bao)子(zi)。黴菌的(de)培(pei)養-般為25~ 28 ℃,培(pei)養時(shi)間(jian)為(wei)4~ 14天(tian)。

2種子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)搖瓶(ping)種子(zi)制(zhi)備(bei)

搖瓶(ping)種子(zi)進罐(guan),常采用(yong)母(mu)瓶(ping)、子(zi)瓶(ping)兩級(ji)培(pei)養,有時(shi)母(mu)瓶(ping)種子(zi)也(ye)可(ke)以直接進罐(guan)。種子(zi)培(pei)養基要求比較豐(feng)富,並(bing)易被菌體分解(jie)利(li)用(yong)，氮(dan)源豐(feng)富有利(li)於菌絲(si)生長。原(yuan)則上各種營養成分不(bu)宜(yi)過(guo)濃,子(zi)瓶(ping)培(pei)養基濃度比母(mu)瓶(ping)略高(gao),更接近種子(zi)罐(guan)的(de)培(pei)養基配(pei)方(fang)。

(2)種子(zi)罐(guan)種子(zi)制(zhi)備(bei)

種子(zi)罐(guan)種子(zi)制(zhi)備(bei)的(de)工(gong)藝(yi)過(guo)程(cheng),因菌種不(bu)同而異(yi)，壹般可分(fen)為(wei)壹級(ji)種子(zi)、 二級(ji)種子(zi)和(he)三級(ji)種子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)。孢(bao)子(zi)(或搖(yao)瓶(ping)菌絲(si))被接入到體積(ji)較小(xiao)的(de)種子(zi)罐(guan)中(zhong),經培(pei)養後形(xing)成大量(liang)的(de)菌絲(si)，這樣的(de)種子(zi)稱(cheng)為壹級(ji)種子(zi)， 把(ba)壹級(ji)種子(zi)轉(zhuan)入發(fa)酵(jiao)罐(guan)內發(fa)酵(jiao)，稱為(wei)二級(ji)發(fa)酵(jiao)。如(ru)果(guo)將(jiang)壹級(ji)種子(zi)接入體積(ji)較大(da)的(de)種子(zi)罐(guan)內,經過(guo)培(pei)養形(xing)成更多(duo)的(de)菌絲(si),這樣制(zhi)備(bei)的(de)種子(zi)稱(cheng)為二(er)級(ji)種子(zi)，將(jiang)二級(ji)種子(zi)轉(zhuan)入發(fa)酵(jiao)罐(guan)內發(fa)酵(jiao)稱為(wei)三級(ji)發(fa)酵(jiao)。同樣道(dao)理,使(shi)用(yong)三(san)級(ji)種子(zi)的(de)發(fa)酵(jiao),稱為(wei)四級(ji)發(fa)酵(jiao)。

脫(tuo)水(shui)存法(fa):

①沙土(tu)保(bao)存法(fa),能產(chan)孢(bao)子(zi)的(de)細菌、放線(xian)菌及黴菌可(ke)采用(yong)此法(fa)保(bao)存，即將(jiang)沙和土(tu)以3:2比例(li)混(hun)合經(jing)稀酸處(chu)理洗凈(jing)過(guo)篩(shai),裝入小(xiao)試(shi)管(guan)內裝(zhuang)置(zhi)高(gao)度為1cm滅菌2~ 3次,烘幹後即可(ke)將(jiang)在斜面(mian)培(pei)養基上生長良(liang)好的(de)孢(bao)子(zi),用(yong)無(wu)菌蒸(zheng)餾水(shui)2~ 2.5m制(zhi)成孢(bao)子(zi)懸(xuan)液(ye)，吸(xi)取少(shao)許加(jia)入沙(sha)土(tu)管(guan)中(zhong),經真(zhen)空(kong)抽幹,外觀(guan)呈(cheng)松散狀態(tai),於4℃冰箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存期(qi)可達(da)5 ~7年。

②冷(leng)凍幹燥(zao)法,將(jiang)孢(bao)子(zi)懸(xuan)浮(fu)液與(yu)保(bao)護(hu)劑(ji)相(xiang)混(hun)合, 放在安(an)瓿(bu)管(guan)內於-20 -30℃的(de)乙醇浴(yu)中(zhong)速(su)凍。然後,在低(di)溫(wen)下(xia)用(yong)真(zhen)空(kong)泵抽幹,用(yong)幹冰使(shi)水(shui)汽結(jie)凍,熔(rong)封安(an)瓿(bu)管(guan),於低溫(wen)下(xia)保(bao)存。保(bao)存期(qi)可達(da)5~ 10年之(zhi)久。

③石蠟(la)油封存(cun)法(fa),在斜(xie)面(mian)菌種培(pei)養物(wu)上,倒上滅菌後的(de)石蠟(la)油,高(gao)出(chu)斜(xie)面(mian)1cm,於4℃冰箱(xiang)或低溫(wen)幹燥(zao)處(chu)保(bao)存，此法(fa)不(bu)適用(yong)於能利(li)用(yong)石蠟(la)油作碳(tan)源的(de)微(wei)生物(wu)，保(bao)存期(qi)為壹年以上。

菌種的(de)具體保(bao)存方(fang)法(fa)

   微(wei)生物(wu)具有容易變(bian)異的(de)特(te)性，因此，在(zai)保(bao)藏過(guo)程(cheng)中(zhong)，必(bi)須使(shi)微(wei)生物(wu)的(de)代(dai)謝(xie)處(chu)於不(bu)活躍或(huo)相(xiang)對靜(jing)止(zhi)的(de)狀態(tai)，才(cai)能在(zai)壹定(ding)的(de)時(shi)間(jian)內使(shi)其(qi)不(bu)發(fa)生變(bian)異而(er)又(you)保(bao)持生活能力(li)。

低溫(wen)、幹燥(zao)和隔絕(jue)空(kong)氣(qi)是(shi)使(shi)微(wei)生物(wu)代(dai)謝(xie)能力(li)降低的(de)重要因素，所以，菌種保(bao)藏方(fang)法(fa)雖(sui)多(duo)，但都是(shi)根據這(zhe)三個(ge)因(yin)素(su)而(er)設計(ji)的(de)。

菌種保(bao)藏方(fang)法(fa)大(da)致可分(fen)為以下(xia)幾(ji)種：

1．傳代(dai)培(pei)養保(bao)藏法(fa)又(you)有斜面(mian)培(pei)養、穿刺培(pei)養、皰肉(rou)培(pei)養基培(pei)養等（後者作保(bao)藏厭(yan)氧細菌用(yong)），培(pei)養後於4—6℃冰箱(xiang)內保(bao)存。

2．覆蓋(gai)保(bao)藏法(fa)是(shi)傳代(dai)培(pei)養的(de)變(bian)相(xiang)方(fang)法(fa)，能(neng)夠適當(dang)延長保(bao)藏時(shi)間(jian)，它(ta)是(shi)在(zai)斜(xie)面(mian)培(pei)養物(wu)和穿(chuan)刺培(pei)養物(wu)上面(mian)覆(fu)蓋(gai)滅菌，壹方(fang)面(mian)可(ke)防(fang)止(zhi)因(yin)培(pei)養基水(shui)分蒸(zheng)發(fa)而引起菌種死(si)亡(wang)，另(ling)壹方(fang)面(mian)可(ke)阻(zu)止(zhi)氧氣(qi)進入，以減(jian)弱(ruo)代(dai)謝(xie)作用(yong)。

   載體保(bao)藏法(fa)是(shi)將(jiang)微(wei)生物(wu)吸(xi)附在(zai)適當(dang)的(de)載體，如(ru)土(tu)壤、沙子(zi)、矽膠、濾(lv)紙上，而(er)後進行(xing)幹燥(zao)的(de)保(bao)藏法(fa)，例(li)如(ru)沙(sha)土(tu)保(bao)藏法(fa)和(he)濾(lv)紙保(bao)藏法(fa)應(ying)用(yong)相(xiang)當(dang)廣(guang)泛(fan)。

   寄主(zhu)保(bao)藏法(fa)用(yong)於目前尚不(bu)能在人(ren)工(gong)培(pei)養基上生長的(de)微(wei)生物(wu)，如(ru)病(bing)毒(du)、立克(ke)次氏體、螺(luo)旋體等，它(ta)們必(bi)須在(zai)生活的(de)動物(wu)、昆蟲(chong)、雞(ji)胚內感染(ran)並(bing)傳代(dai)，此法(fa)相(xiang)當(dang)於壹般微(wei)生物(wu)的(de)傳代(dai)培(pei)養保(bao)藏法(fa)。病(bing)毒(du)等微(wei)生物(wu)亦可(ke)用(yong)其(qi)他(ta)方法如(ru)液(ye)氮(dan)保(bao)藏法(fa)與(yu)冷(leng)凍幹燥(zao)保(bao)藏法(fa)進行(xing)保(bao)藏。

5．冷(leng)凍保(bao)藏法(fa)可(ke)分(fen)低溫(wen)冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰酒(jiu)精(jing)快(kuai)速(su)凍結(jie)（約-70℃）和液(ye)氮（-196℃）等保(bao)藏法(fa)。

冷(leng)凍幹燥(zao)保(bao)藏法(fa)先(xian)使(shi)微(wei)生物(wu)在極(ji)低(di)溫(wen)度（-70℃左右(you)）下(xia)快(kuai)速(su)冷(leng)凍，然後在減(jian)壓(ya)下(xia)利(li)用(yong)升(sheng)華現象(xiang)除去水(shui)分（真(zhen)空(kong)幹燥(zao)）。

我司在重視(shi)產品質量(liang)的(de)同時(shi)，也(ye)建(jian)立了壹套(tao)集技(ji)術(shu)支持、物(wu)流(liu)、售(shou)後服(fu)務(wu)等(deng)多(duo)個(ge)部(bu)門(men)的(de)服(fu)務(wu)體系，努(nu)力把(ba)我們方便、快(kuai)捷(jie)、周(zhou)到的(de)服(fu)務(wu)提(ti)供給每壹個(ge)客戶(hu)。