糞(fen)生黑(hei)蛋(dan)巢菌

糞(fen)生黑(hei)蛋(dan)巢菌

我(wo)司產(chan)品齊(qi)全(quan)，因上(shang)架(jia)數(shu)量(liang)有限(xian)，未(wei)能全部上(shang)架(jia)，如需(xu)訂購或者(zhe)產(chan)品詳(xiang)情請(qing)直接(jie)聯(lian)系我(wo)司銷售！

實驗(yan)內(nei)容(rong):

1.稱量(liang)>溶(rong)化(hua)→調(tiao)pH >)過濾(lv)>分裝(zhuang)>加塞(sai)>包紮>滅(mie)菌>無菌檢(jian)查(zha)

2.幹熱(re)滅(mie)菌:裝(zhuang)入(ru)待滅(mie)菌物(wu)品(pin)升(sheng)溫(wen)>恒(heng)溫(wen)>降溫(wen)>開(kai)箱取物(wu)

3.高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌加(jia)水>裝(zhuang)物(wu)品(pin)>加蓋(gai)>加熱(re)>排冷空(kong)氣+加壓(ya)>恒(heng)壓(ya)>降壓(ya)回零(ling)》排汽>取物(wu). >無菌檢(jian)查(zha)

4.過濾(lv)除(chu)菌:組裝(zhuang)滅(mie)菌>連(lian)接→壓濾(lv)>無菌檢(jian)查(zha)>清洗(xi)滅(mie)菌

低(di)溫(wen)存(cun)法:

公(gong)司產(chan)品僅(jin)用於科(ke)研(yan)

①簡單(dan)保(bao)存(cun)法,將瓊脂(zhi)斜面(mian)孢子培養物(wu)、菌絲(si)懸(xuan)浮(fu)液(ye)以(yi)及(ji)由(you)麩皮(pi)、大米(mi)、小米(mi)等(deng)谷(gu)物(wu)原料(liao)制(zhi)成(cheng)的孢子培養物(wu)置於(yu)4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun),保(bao)存(cun)時間不(bu)超過1 ~2個(ge)月，若(ruo)將(jiang)谷(gu)物(wu)原料(liao)制(zhi)備的孢子瓶抽(chou)真(zhen)空(kong)並在(zai)棉塞(sai)上(shang)浸(jin)蠟,以(yi)隔(ge)絕外(wai)界(jie)空(kong)氣和(he)水汽,保(bao)持(chi)時間可達(da)3~ 4個(ge)月;②液(ye)氮超di溫(wen)保(bao)存(cun)法,將生長(chang)穩定期(qi)懸(xuan)浮(fu)在(zai)10%甘(gan)油或其他低(di)冰(bing)點(dian)液(ye)體(ti)中,密封(feng)於(yu)安(an)瓿(bu)管內(nei)，然後(hou)控制(zhi)冷(leng)卻(que)速度,使(shi)安(an)瓿(bu)管溫(wen)度逐步下(xia)降至(zhi)-35℃時， 即(ji)可置於(yu)-150 ~-196℃的液(ye)氮罐(guan)中保(bao)存(cun)。大(da)多數(shu)微生物(wu)如(ru)病(bing)毒(du)、噬(shi)菌體(ti)、多種(zhong)細菌、放(fang)線(xian)菌、酵母(mu)和(he)原蟲、特別是(shi)壹些(xie)用冷凍幹燥法有(you)困(kun)難的微生物(wu),都可用此法長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。

微生物(wu)菌種(zhong)的培養:

糞(fen)生黑(hei)蛋(dan)巢菌

1孢子制(zhi)備

(1)放(fang)線(xian)菌孢子的制(zhi)備

壹般采(cai)用瓊脂(zhi)斜面(mian)培養基,培養基中含(han)有(you)壹些(xie)適合產(chan)孢子的營養成分,如麩(fu)皮、豌(wan)豆浸汁、蛋(dan)白(bai)腖和(he)壹些(xie)無機鹽等(deng)。碳(tan)源(yuan)和氮(dan)源(yuan)不要太(tai)豐(feng)富（碳源(yuan)約為1%,氮源(yuan)不超過0.5%),碳源(yuan)豐(feng)富容(rong)易(yi)造成生理(li)酸(suan)性(xing)的營養環境(jing),不利於放(fang)線(xian)菌孢子的形成(cheng)，氮源(yuan)豐(feng)富則(ze)有(you)利於菌絲(si)繁殖(zhi)而不(bu)利於孢子形成(cheng)。壹般(ban)情況下(xia)， 幹(gan)燥和(he)限制(zhi)營養可直接(jie)或(huo)間接(jie)誘導孢子形成(cheng)。放(fang)線(xian)菌斜(xie)面(mian)的培

養溫(wen)度大(da)多數(shu)為(wei)28℃,少(shao)數(shu)為(wei)37 ℃,培養時間為(wei)5~ 14天。

(2)黴菌孢子的制(zhi)備

黴菌的孢子培養,壹般(ban)以(yi)大(da)米、 小米(mi)、玉(yu)米(mi)、麩(fu)皮、麥粒(li)等(deng)天(tian)然農(nong)產(chan)品為(wei)培養基。這是(shi)由(you)於這些(xie)農(nong)產(chan)品中的營養成分較(jiao)適(shi)合黴(mei)菌的孢子繁殖(zhi)，而且這類(lei)培(pei)養基的表面(mian)積(ji)較大(da)，可獲得大量(liang)的孢子。黴菌的培養-般為(wei)25~ 28 ℃,培養時間為(wei)4~ 14天。

2種子制(zhi)備

(1)搖瓶(ping)種子制(zhi)備

搖瓶(ping)種子進罐(guan),常(chang)采(cai)用母瓶、子瓶兩(liang)級培養,有時母瓶(ping)種(zhong)子也可以(yi)直接(jie)進(jin)罐。種(zhong)子培養基要求(qiu)比(bi)較豐(feng)富,並易(yi)被菌體(ti)分解(jie)利用，氮源(yuan)豐(feng)富有利於菌絲(si)生長(chang)。原則(ze)上(shang)各(ge)種營養成分不(bu)宜(yi)過濃(nong),子瓶培(pei)養基濃度比(bi)母瓶(ping)略高,更接(jie)近種子罐的培養基配(pei)方。

(2)種子罐種(zhong)子制(zhi)備

種子罐種(zhong)子制(zhi)備的工藝(yi)過程(cheng),因菌種(zhong)不同(tong)而異(yi)，壹般(ban)可分為(wei)壹級種子、 二(er)級種子和三級種子的制(zhi)備。孢子(或搖(yao)瓶菌絲(si))被接(jie)入(ru)到體(ti)積(ji)較小的種子罐中,經培(pei)養後(hou)形(xing)成大量的菌絲(si)，這樣的種子稱為(wei)壹級種子， 把壹級種子轉入(ru)發酵罐(guan)內(nei)發酵，稱(cheng)為(wei)二(er)級發酵。如(ru)果(guo)將壹級種子接入(ru)體(ti)積(ji)較大(da)的種子罐內(nei),經過培(pei)養形成更多(duo)的菌絲(si),這樣制(zhi)備的種子稱為(wei)二(er)級種子，將二(er)級種子轉入(ru)發酵罐(guan)內(nei)發酵稱(cheng)為(wei)三級發酵。同(tong)樣道(dao)理,使(shi)用三級種子的發酵,稱為(wei)四級發酵。

脫水存(cun)法:

①沙土(tu)保(bao)存(cun)法,能產(chan)孢子的細菌、放(fang)線(xian)菌及(ji)黴(mei)菌可采(cai)用此法保(bao)存(cun)，即(ji)將(jiang)沙和土(tu)以(yi)3:2比(bi)例(li)混(hun)合(he)經稀酸(suan)處理(li)洗凈(jing)過篩(shai),裝(zhuang)入(ru)小試(shi)管內(nei)裝(zhuang)置高(gao)度(du)為(wei)1cm滅(mie)菌2~ 3次(ci),烘幹(gan)後(hou)即(ji)可將在(zai)斜(xie)面(mian)培養基上(shang)生長(chang)良(liang)好(hao)的孢子,用無菌蒸(zheng)餾水2~ 2.5m制(zhi)成(cheng)孢子懸(xuan)液(ye)，吸(xi)取少(shao)許(xu)加(jia)入(ru)沙土(tu)管中,經真(zhen)空(kong)抽幹(gan),外(wai)觀呈(cheng)松散(san)狀(zhuang)態,於4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun),保(bao)存(cun)期(qi)可達(da)5 ~7年。

②冷凍(dong)幹燥法,將孢子懸(xuan)浮(fu)液(ye)與保(bao)護劑相(xiang)混(hun)合(he), 放(fang)在(zai)安(an)瓿(bu)管內(nei)於(yu)-20 -30℃的乙醇(chun)浴中速凍。然後(hou),在低(di)溫(wen)下用真空(kong)泵(beng)抽幹(gan),用幹冰(bing)使(shi)水(shui)汽結凍,熔封(feng)安(an)瓿(bu)管,於低(di)溫(wen)下保(bao)存(cun)。保(bao)存(cun)期(qi)可達(da)5~ 10年之久。

③石蠟油封(feng)存(cun)法,在斜(xie)面(mian)菌種(zhong)培養物(wu)上(shang),倒上(shang)滅(mie)菌後(hou)的石蠟油,高出(chu)斜面(mian)1cm,於4℃冰箱(xiang)或低(di)溫(wen)幹燥處保(bao)存(cun)，此法不(bu)適(shi)用於能利用石蠟油作碳源(yuan)的微生物(wu)，保(bao)存(cun)期(qi)為(wei)壹年以(yi)上(shang)。

菌種(zhong)的具體(ti)保(bao)存(cun)方法

   微生物(wu)具(ju)有(you)容(rong)易(yi)變異(yi)的特性(xing)，因此，在保(bao)藏(zang)過程(cheng)中，必(bi)須(xu)使(shi)微生物(wu)的代謝處於(yu)不活(huo)躍或相對(dui)靜止(zhi)的狀(zhuang)態，才能在壹定的時間內(nei)使(shi)其不發生變(bian)異(yi)而又(you)保(bao)持(chi)生活(huo)能力。

低(di)溫(wen)、幹燥和(he)隔絕空(kong)氣是(shi)使(shi)微生物(wu)代謝能力降低(di)的重要因素(su)，所(suo)以(yi)，菌種(zhong)保(bao)藏(zang)方法雖多，但(dan)都是(shi)根據(ju)這三個(ge)因素(su)而設計(ji)的。

菌種(zhong)保(bao)藏(zang)方法大(da)致(zhi)可分為(wei)以(yi)下(xia)幾種：

1．傳代培養保(bao)藏(zang)法又(you)有(you)斜面(mian)培養、穿(chuan)刺培養、皰肉培養基培養等(deng)（後(hou)者(zhe)作保(bao)藏(zang)厭(yan)氧(yang)細(xi)菌用），培養後(hou)於(yu)4—6℃冰箱(xiang)內保(bao)存(cun)。

2．覆蓋(gai)保(bao)藏(zang)法是(shi)傳代培養的變相(xiang)方法，能夠(gou)適(shi)當(dang)延長(chang)保(bao)藏(zang)時間，它(ta)是(shi)在斜(xie)面(mian)培養物(wu)和(he)穿(chuan)刺培養物(wu)上(shang)面(mian)覆蓋(gai)滅(mie)菌，壹方面(mian)可防止(zhi)因培(pei)養基水分蒸(zheng)發而引起菌種(zhong)死亡(wang)，另壹方面(mian)可阻止(zhi)氧(yang)氣(qi)進(jin)入(ru)，以(yi)減(jian)弱(ruo)代謝作用。

   載體(ti)保(bao)藏(zang)法是(shi)將微生物(wu)吸(xi)附(fu)在適(shi)當(dang)的載體(ti)，如土(tu)壤(rang)、沙子、矽膠、濾(lv)紙上(shang)，而後(hou)進(jin)行幹燥的保(bao)藏(zang)法，例(li)如(ru)沙土(tu)保(bao)藏(zang)法和(he)濾(lv)紙保(bao)藏(zang)法應(ying)用相當廣泛。

   寄(ji)主(zhu)保(bao)藏(zang)法用於目(mu)前(qian)尚(shang)不(bu)能在人(ren)工(gong)培(pei)養基上(shang)生長(chang)的微生物(wu)，如(ru)病(bing)毒(du)、立克(ke)次(ci)氏體(ti)、螺(luo)旋(xuan)體(ti)等(deng)，它(ta)們(men)必(bi)須(xu)在生活(huo)的動(dong)物(wu)、昆蟲、雞(ji)胚內(nei)感染並(bing)傳代，此法相(xiang)當(dang)於壹般(ban)微生物(wu)的傳代培養保(bao)藏(zang)法。病(bing)毒(du)等(deng)微生物(wu)亦可用其他方法如(ru)液(ye)氮保(bao)藏(zang)法與冷凍(dong)幹(gan)燥保(bao)藏(zang)法進(jin)行(xing)保(bao)藏(zang)。

5．冷凍(dong)保(bao)藏(zang)法可分低(di)溫(wen)冰箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰(bing)酒精(jing)快速凍結（約-70℃）和液(ye)氮（-196℃）等(deng)保(bao)藏(zang)法。

冷凍(dong)幹燥保(bao)藏(zang)法先使(shi)微生物(wu)在(zai)極(ji)低(di)溫(wen)度（-70℃左(zuo)右(you)）下快速冷凍(dong)，然後(hou)在(zai)減壓下利用升(sheng)華現象除去(qu)水(shui)分（真(zhen)空(kong)幹燥）。

我(wo)司在(zai)重(zhong)視(shi)產(chan)品質量的同(tong)時，也建立了(le)壹套集(ji)技術(shu)支(zhi)持(chi)、物(wu)流、售後(hou)服務等(deng)多(duo)個(ge)部門的服務體(ti)系，努力(li)把(ba)我(wo)們(men)方便、快捷、周到(dao)的服務提供給(gei)每壹個(ge)客戶(hu)。