彎(wan)曲乳(ru)桿(gan)菌

彎(wan)曲乳(ru)桿(gan)菌

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實(shi)驗內容(rong):

1.稱(cheng)量>溶化→調pH >)過(guo)濾>分(fen)裝>加(jia)塞>包紮>滅(mie)菌>無(wu)菌檢查(zha)

2.幹熱(re)滅(mie)菌:裝(zhuang)入待滅(mie)菌物品(pin)升溫(wen)>恒(heng)溫(wen)>降(jiang)溫(wen)>開(kai)箱取物

3.高(gao)壓蒸汽滅(mie)菌加水(shui)>裝(zhuang)物品(pin)>加(jia)蓋>加(jia)熱>排(pai)冷(leng)空(kong)氣(qi)+加(jia)壓>恒(heng)壓(ya)>降(jiang)壓(ya)回(hui)零(ling)》排(pai)汽>取物. >無(wu)菌檢查(zha)

4.過(guo)濾除菌:組裝滅(mie)菌>連(lian)接(jie)→壓(ya)濾>無(wu)菌檢查(zha)>清(qing)洗(xi)滅(mie)菌

低(di)溫(wen)存法:

公(gong)司產品(pin)僅(jin)用於科研(yan)

①簡(jian)單保(bao)存(cun)法,將瓊脂(zhi)斜(xie)面(mian)孢(bao)子(zi)培養(yang)物、菌絲懸浮液以及由麩(fu)皮(pi)、大米、小米等谷物原(yuan)料(liao)制成(cheng)的孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang)物置(zhi)於4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun),保(bao)存(cun)時(shi)間不(bu)超過(guo)1 ~2個(ge)月(yue)，若(ruo)將谷物原(yuan)料(liao)制備(bei)的(de)孢(bao)子(zi)瓶抽(chou)真(zhen)空(kong)並在棉(mian)塞上浸蠟(la),以(yi)隔絕外界(jie)空(kong)氣(qi)和(he)水(shui)汽(qi),保(bao)持(chi)時間可達3~ 4個(ge)月(yue);②液氮(dan)超di溫(wen)保(bao)存(cun)法,將生(sheng)長(chang)穩定(ding)期(qi)懸浮在10%甘(gan)油(you)或(huo)其(qi)他低(di)冰點(dian)液體中(zhong),密(mi)封於安瓿管內(nei)，然後控制冷(leng)卻速度(du),使(shi)安瓿管溫(wen)度逐(zhu)步下(xia)降(jiang)至-35℃時(shi)， 即可置於-150 ~-196℃的(de)液氮(dan)罐(guan)中(zhong)保(bao)存(cun)。大多數微生(sheng)物如(ru)病(bing)毒、噬(shi)菌體、多(duo)種細菌、放線(xian)菌、酵母(mu)和(he)原(yuan)蟲、特(te)別是(shi)壹些用冷(leng)凍(dong)幹燥法有困(kun)難的微生(sheng)物,都可用此(ci)法長(chang)期保(bao)存(cun)。

微生(sheng)物菌種的培養(yang):

彎(wan)曲乳(ru)桿(gan)菌

1孢(bao)子制備(bei)

(1)放(fang)線菌孢子(zi)的(de)制備(bei)

壹(yi)般采(cai)用瓊脂(zhi)斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)基,培(pei)養(yang)基中(zhong)含有壹些(xie)適(shi)合產孢(bao)子(zi)的(de)營養(yang)成(cheng)分,如(ru)麩(fu)皮(pi)、豌(wan)豆(dou)浸汁、蛋(dan)白腖(dong)和(he)壹(yi)些無(wu)機鹽(yan)等。碳源和(he)氮(dan)源(yuan)不要太(tai)豐富(fu)（碳(tan)源約(yue)為(wei)1%,氮(dan)源(yuan)不超過(guo)0.5%),碳(tan)源豐富(fu)容易造(zao)成(cheng)生(sheng)理(li)酸(suan)性(xing)的(de)營養(yang)環境,不(bu)利於放線(xian)菌孢子(zi)的(de)形成(cheng)，氮(dan)源(yuan)豐富(fu)則(ze)有利於菌絲繁(fan)殖(zhi)而不利於孢子(zi)形成(cheng)。壹般情(qing)況(kuang)下(xia)， 幹燥和(he)限(xian)制營養(yang)可直接(jie)或(huo)間接(jie)誘導(dao)孢(bao)子形成(cheng)。放線(xian)菌斜(xie)面(mian)的(de)培(pei)

養(yang)溫(wen)度大多數為(wei)28℃,少(shao)數為(wei)37 ℃,培(pei)養(yang)時間為(wei)5~ 14天(tian)。

(2)黴(mei)菌孢子(zi)的(de)制備(bei)

黴(mei)菌的孢(bao)子(zi)培養(yang),壹(yi)般以(yi)大米、 小米、玉米、麩(fu)皮(pi)、麥粒等天(tian)然(ran)農(nong)產(chan)品(pin)為(wei)培養(yang)基。這(zhe)是由於這些(xie)農產(chan)品(pin)中(zhong)的(de)營養(yang)成(cheng)分較(jiao)適(shi)合黴菌的孢(bao)子(zi)繁殖，而(er)且這類(lei)培(pei)養(yang)基的(de)表面(mian)積較(jiao)大，可獲(huo)得大量的孢子。黴菌的培(pei)養(yang)-般為(wei)25~ 28 ℃,培(pei)養(yang)時間為(wei)4~ 14天(tian)。

2種子制備(bei)

(1)搖(yao)瓶種子制備(bei)

搖(yao)瓶種子進罐(guan),常(chang)采用母(mu)瓶、子瓶兩級培養(yang),有時母(mu)瓶種子也(ye)可以直(zhi)接(jie)進(jin)罐(guan)。種子培養(yang)基要求比較豐富(fu),並易被(bei)菌體分(fen)解利用，氮(dan)源(yuan)豐富(fu)有利於菌絲生(sheng)長(chang)。原(yuan)則(ze)上各種營養(yang)成(cheng)分不(bu)宜過(guo)濃,子(zi)瓶培養(yang)基濃度(du)比(bi)母(mu)瓶略高,更接(jie)近(jin)種子罐(guan)的(de)培養(yang)基配方(fang)。

(2)種子罐(guan)種子制備(bei)

種子罐(guan)種子制備(bei)的(de)工藝過(guo)程,因(yin)菌種不同而異(yi)，壹(yi)般可分為(wei)壹(yi)級種子、 二(er)級種子和三級種子的制備(bei)。孢(bao)子(zi)(或(huo)搖瓶菌絲)被(bei)接(jie)入到體積較(jiao)小的(de)種子罐(guan)中(zhong),經培養(yang)後形成(cheng)大量的菌絲，這(zhe)樣(yang)的種子稱為(wei)壹級種子， 把壹(yi)級種子轉入發(fa)酵(jiao)罐(guan)內(nei)發(fa)酵(jiao)，稱(cheng)為(wei)二級發(fa)酵(jiao)。如(ru)果將壹級種子接(jie)入體積較(jiao)大的種子罐(guan)內(nei),經過(guo)培(pei)養(yang)形成(cheng)更多(duo)的(de)菌絲,這(zhe)樣(yang)制備(bei)的(de)種子稱為(wei)二級種子，將二級種子轉入發(fa)酵(jiao)罐(guan)內(nei)發(fa)酵(jiao)稱(cheng)為(wei)三級發(fa)酵(jiao)。同樣(yang)道理(li),使(shi)用三級種子的發(fa)酵(jiao),稱(cheng)為(wei)四級發(fa)酵(jiao)。

脫(tuo)水存法:

①沙(sha)土(tu)保(bao)存(cun)法,能(neng)產孢子的細菌、放線(xian)菌及黴(mei)菌可采用此(ci)法保(bao)存(cun)，即將沙和土(tu)以(yi)3:2比(bi)例(li)混合經稀(xi)酸(suan)處理(li)洗(xi)凈過(guo)篩(shai),裝(zhuang)入小試(shi)管內(nei)裝置(zhi)高(gao)度(du)為(wei)1cm滅(mie)菌2~ 3次(ci),烘(hong)幹後即可將在斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)基上生(sheng)長(chang)良好的(de)孢(bao)子,用無(wu)菌蒸餾(liu)水(shui)2~ 2.5m制成(cheng)孢子(zi)懸液，吸取少許(xu)加(jia)入沙土(tu)管中(zhong),經真空(kong)抽(chou)幹,外(wai)觀呈松散狀(zhuang)態,於4℃冰箱(xiang)保(bao)存(cun),保(bao)存(cun)期(qi)可達5 ~7年(nian)。

②冷(leng)凍(dong)幹燥法,將孢子懸浮液與保(bao)護(hu)劑(ji)相(xiang)混合, 放(fang)在安瓿管內(nei)於-20 -30℃的(de)乙(yi)醇(chun)浴中(zhong)速(su)凍(dong)。然後,在低溫(wen)下(xia)用真(zhen)空(kong)泵(beng)抽(chou)幹,用幹冰使(shi)水(shui)汽(qi)結凍(dong),熔(rong)封安瓿管,於低溫(wen)下(xia)保(bao)存(cun)。保(bao)存(cun)期(qi)可達5~ 10年(nian)之(zhi)久。

③石(shi)蠟(la)油(you)封存法,在斜(xie)面(mian)菌種培養(yang)物上,倒(dao)上滅(mie)菌後的石(shi)蠟(la)油(you),高(gao)出斜(xie)面(mian)1cm,於4℃冰箱(xiang)或(huo)低溫(wen)幹燥處(chu)保(bao)存(cun)，此(ci)法不適(shi)用於能利用石(shi)蠟(la)油(you)作碳源(yuan)的(de)微生(sheng)物，保(bao)存(cun)期(qi)為(wei)壹(yi)年(nian)以上。

菌種的具體保(bao)存(cun)方(fang)法

   微生(sheng)物具(ju)有容易(yi)變(bian)異(yi)的(de)特(te)性(xing)，因(yin)此(ci)，在保(bao)藏(zang)過(guo)程中(zhong)，必(bi)須(xu)使(shi)微生(sheng)物的(de)代(dai)謝處於不活(huo)躍(yue)或(huo)相(xiang)對(dui)靜(jing)止(zhi)的狀(zhuang)態(tai)，才能(neng)在壹定(ding)的(de)時間內(nei)使(shi)其(qi)不發(fa)生(sheng)變(bian)異(yi)而(er)又(you)保(bao)持(chi)生(sheng)活(huo)能力(li)。

低(di)溫(wen)、幹燥和(he)隔(ge)絕空(kong)氣(qi)是(shi)使(shi)微生(sheng)物代(dai)謝能力(li)降(jiang)低(di)的(de)重(zhong)要因(yin)素(su)，所以(yi)，菌種保(bao)藏(zang)方(fang)法雖多，但都是根(gen)據(ju)這(zhe)三個(ge)因(yin)素(su)而(er)設計(ji)的。

菌種保(bao)藏(zang)方(fang)法大致可分為(wei)以下(xia)幾(ji)種：

1．傳(chuan)代(dai)培養(yang)保(bao)藏(zang)法又(you)有斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)、穿刺(ci)培(pei)養(yang)、皰肉培養(yang)基培(pei)養(yang)等（後者(zhe)作保(bao)藏(zang)厭(yan)氧(yang)細菌用），培(pei)養(yang)後於4—6℃冰箱(xiang)內(nei)保(bao)存(cun)。

2．覆(fu)蓋保(bao)藏(zang)法是傳代(dai)培養(yang)的變(bian)相(xiang)方(fang)法，能夠(gou)適(shi)當延長(chang)保(bao)藏(zang)時(shi)間，它是在斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)物和(he)穿刺(ci)培(pei)養(yang)物上面(mian)覆(fu)蓋滅(mie)菌，壹方(fang)面(mian)可防止(zhi)因(yin)培(pei)養(yang)基水(shui)分蒸(zheng)發(fa)而(er)引起菌種死亡(wang)，另(ling)壹方(fang)面(mian)可阻(zu)止(zhi)氧(yang)氣(qi)進(jin)入，以減弱(ruo)代(dai)謝作用。

   載體保(bao)藏(zang)法是將微生(sheng)物吸附(fu)在適(shi)當的(de)載體，如(ru)土(tu)壤(rang)、沙子(zi)、矽(gui)膠(jiao)、濾紙上，而後進行(xing)幹燥的(de)保(bao)藏(zang)法，例(li)如沙(sha)土(tu)保(bao)藏(zang)法和濾紙保(bao)藏(zang)法應(ying)用相(xiang)當(dang)廣(guang)泛。

   寄(ji)主保(bao)藏(zang)法用於目前(qian)尚不能(neng)在人工培養(yang)基上生(sheng)長(chang)的微生(sheng)物，如(ru)病(bing)毒、立(li)克次(ci)氏(shi)體、螺(luo)旋體等，它們必須在生(sheng)活(huo)的動(dong)物、昆蟲(chong)、雞(ji)胚內感(gan)染並傳代(dai)，此(ci)法相(xiang)當(dang)於壹般微生(sheng)物的(de)傳(chuan)代(dai)培養(yang)保(bao)藏(zang)法。病(bing)毒等微生(sheng)物亦(yi)可用其(qi)他方(fang)法如液氮(dan)保(bao)藏(zang)法與冷(leng)凍(dong)幹燥保(bao)藏(zang)法進行(xing)保(bao)藏(zang)。

5．冷(leng)凍(dong)保(bao)藏(zang)法可分低(di)溫(wen)冰箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰酒(jiu)精快(kuai)速凍(dong)結（約(yue)-70℃）和(he)液氮(dan)（-196℃）等保(bao)藏(zang)法。

冷(leng)凍(dong)幹燥保(bao)藏(zang)法先(xian)使(shi)微生(sheng)物在極低溫(wen)度（-70℃左(zuo)右）下(xia)快(kuai)速冷(leng)凍(dong)，然後在減壓(ya)下(xia)利用升華(hua)現象除去水(shui)分（真空幹燥）。

我(wo)司在重(zhong)視(shi)產(chan)品(pin)質(zhi)量的(de)同時，也(ye)建(jian)立(li)了壹套(tao)集(ji)技(ji)術支(zhi)持(chi)、物流、售後服(fu)務等多個(ge)部(bu)門(men)的服(fu)務體系，努(nu)力(li)把(ba)我(wo)們方(fang)便(bian)、快(kuai)捷、周到的(de)服(fu)務提供(gong)給每(mei)壹個(ge)客戶。