幹(gan)酪乳桿(gan)菌(jun)

幹(gan)酪乳桿(gan)菌(jun)

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實驗內容(rong):

1.稱量(liang)>溶(rong)化(hua)→調(tiao)pH >)過(guo)濾(lv)>分裝>加(jia)塞>包(bao)紮>滅(mie)菌(jun)>無菌(jun)檢(jian)查(zha)

2.幹熱(re)滅(mie)菌(jun):裝入待滅(mie)菌(jun)物(wu)品(pin)升(sheng)溫>恒溫(wen)>降溫(wen)>開(kai)箱(xiang)取物(wu)

3.高壓蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)加(jia)水>裝物(wu)品(pin)>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱>排冷空(kong)氣(qi)+加(jia)壓>恒壓>降壓回(hui)零(ling)》排汽>取物(wu). >無菌(jun)檢(jian)查(zha)

4.過(guo)濾(lv)除(chu)菌(jun):組(zu)裝滅(mie)菌(jun)>連接→壓濾(lv)>無菌(jun)檢(jian)查(zha)>清(qing)洗(xi)滅(mie)菌(jun)

低溫(wen)存(cun)法:

公司產(chan)品(pin)僅用於(yu)科研(yan)

①簡單保(bao)存(cun)法,將瓊脂斜面孢(bao)子(zi)培養物(wu)、菌(jun)絲(si)懸(xuan)浮液以(yi)及(ji)由(you)麩皮(pi)、大(da)米(mi)、小米(mi)等谷(gu)物(wu)原料制(zhi)成的(de)孢(bao)子(zi)培養物(wu)置於(yu)4℃冰箱(xiang)保存(cun),保存(cun)時間(jian)不(bu)超(chao)過(guo)1 ~2個月，若(ruo)將(jiang)谷(gu)物(wu)原料制(zhi)備的(de)孢(bao)子(zi)瓶抽(chou)真(zhen)空並在棉(mian)塞上浸(jin)蠟(la),以隔(ge)絕外界空氣和(he)水汽(qi),保持時間(jian)可(ke)達3~ 4個月;②液氮(dan)超(chao)di溫保(bao)存(cun)法,將生長穩定期懸(xuan)浮在10%甘油(you)或(huo)其(qi)他(ta)低冰(bing)點液體中,密封(feng)於(yu)安(an)瓿管內，然(ran)後控(kong)制(zhi)冷卻(que)速(su)度,使安(an)瓿管溫度逐步(bu)下降至-35℃時， 即(ji)可(ke)置於(yu)-150 ~-196℃的(de)液(ye)氮(dan)罐中(zhong)保(bao)存(cun)。大多(duo)數(shu)微生物(wu)如(ru)病(bing)毒(du)、噬菌(jun)體、多(duo)種(zhong)細菌(jun)、放(fang)線菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)原蟲、特(te)別是(shi)壹些(xie)用冷凍幹燥(zao)法有困難的(de)微(wei)生物(wu),都可(ke)用此(ci)法長期保存(cun)。

微生物(wu)菌(jun)種(zhong)的(de)培(pei)養:

幹酪乳桿(gan)菌(jun)

1孢(bao)子(zi)制(zhi)備

(1)放(fang)線菌(jun)孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備

壹般(ban)采用瓊脂斜面培養基(ji),培養基(ji)中(zhong)含(han)有壹(yi)些適(shi)合(he)產(chan)孢(bao)子(zi)的(de)營養成分,如(ru)麩皮(pi)、豌(wan)豆浸(jin)汁(zhi)、蛋白(bai)腖和(he)壹些(xie)無機鹽(yan)等。碳源和(he)氮源不(bu)要太豐(feng)富（碳源約為1%,氮源不(bu)超(chao)過(guo)0.5%),碳源豐(feng)富容(rong)易(yi)造(zao)成生理酸(suan)性(xing)的(de)營養環(huan)境,不利於(yu)放(fang)線菌(jun)孢(bao)子(zi)的(de)形(xing)成，氮源豐(feng)富則有利於(yu)菌(jun)絲(si)繁(fan)殖(zhi)而(er)不(bu)利於(yu)孢(bao)子(zi)形成。壹般(ban)情(qing)況(kuang)下， 幹燥(zao)和(he)限制(zhi)營養可(ke)直(zhi)接(jie)或(huo)間(jian)接(jie)誘(you)導孢(bao)子(zi)形成。放(fang)線菌(jun)斜(xie)面的(de)培(pei)

養溫(wen)度大多(duo)數(shu)為28℃,少(shao)數為37 ℃,培養時(shi)間(jian)為5~ 14天。

(2)黴菌(jun)孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備

黴菌(jun)的(de)孢(bao)子(zi)培養,壹般(ban)以大(da)米(mi)、 小米(mi)、玉米(mi)、麩皮(pi)、麥(mai)粒等(deng)天然(ran)農產(chan)品為培養基(ji)。這(zhe)是(shi)由於(yu)這些(xie)農(nong)產(chan)品中的(de)營養成分較適(shi)合(he)黴菌(jun)的(de)孢(bao)子(zi)繁(fan)殖(zhi)，而(er)且這類培(pei)養基(ji)的(de)表(biao)面積較大，可(ke)獲得大量的(de)孢(bao)子(zi)。黴菌(jun)的(de)培(pei)養-般(ban)為25~ 28 ℃,培養時(shi)間(jian)為4~ 14天。

2種子(zi)制(zhi)備

(1)搖瓶(ping)種(zhong)子(zi)制(zhi)備

搖瓶(ping)種(zhong)子(zi)進罐,常采用母(mu)瓶(ping)、子(zi)瓶兩(liang)級培(pei)養,有時(shi)母(mu)瓶(ping)種(zhong)子(zi)也可(ke)以直(zhi)接(jie)進(jin)罐。種(zhong)子(zi)培養基(ji)要求(qiu)比較豐(feng)富,並易被(bei)菌(jun)體分解(jie)利用(yong)，氮源豐(feng)富有利於(yu)菌(jun)絲(si)生長。原則(ze)上(shang)各種營養成分不(bu)宜(yi)過(guo)濃,子(zi)瓶培(pei)養基(ji)濃度比(bi)母(mu)瓶(ping)略高,更接(jie)近(jin)種(zhong)子(zi)罐的(de)培(pei)養基(ji)配方。

(2)種子(zi)罐種(zhong)子(zi)制(zhi)備

種子(zi)罐種(zhong)子(zi)制(zhi)備的(de)工(gong)藝過(guo)程(cheng),因菌(jun)種(zhong)不同而(er)異(yi)，壹般(ban)可(ke)分為壹級種(zhong)子(zi)、 二級(ji)種子(zi)和(he)三級(ji)種子(zi)的(de)制(zhi)備。孢(bao)子(zi)(或搖(yao)瓶(ping)菌(jun)絲(si))被接(jie)入到(dao)體積較小的(de)種(zhong)子(zi)罐中(zhong),經(jing)培養後(hou)形成大量的(de)菌(jun)絲(si)，這(zhe)樣(yang)的(de)種(zhong)子(zi)稱為壹級種(zhong)子(zi)， 把壹(yi)級種(zhong)子(zi)轉入發(fa)酵(jiao)罐內發(fa)酵(jiao)，稱為二級(ji)發(fa)酵(jiao)。如(ru)果(guo)將壹(yi)級(ji)種子(zi)接入體積較大的(de)種(zhong)子(zi)罐內,經(jing)過(guo)培(pei)養形(xing)成更多(duo)的(de)菌(jun)絲(si),這樣(yang)制(zhi)備的(de)種(zhong)子(zi)稱為二級(ji)種子(zi)，將二級(ji)種子(zi)轉入發(fa)酵(jiao)罐內發(fa)酵(jiao)稱為三級發(fa)酵(jiao)。同樣(yang)道理,使用(yong)三(san)級種子(zi)的(de)發(fa)酵(jiao),稱為四(si)級(ji)發(fa)酵(jiao)。

脫水存(cun)法:

①沙(sha)土保(bao)存(cun)法,能(neng)產孢(bao)子(zi)的(de)細(xi)菌(jun)、放(fang)線菌(jun)及(ji)黴菌(jun)可(ke)采用此(ci)法保存(cun)，即(ji)將沙(sha)和(he)土以(yi)3:2比例混(hun)合(he)經(jing)稀酸(suan)處理洗(xi)凈(jing)過(guo)篩(shai),裝入小試(shi)管內裝置高度(du)為1cm滅(mie)菌(jun)2~ 3次,烘幹(gan)後(hou)即(ji)可(ke)將在斜(xie)面培養基(ji)上(shang)生長良好的(de)孢(bao)子(zi),用無(wu)菌(jun)蒸(zheng)餾(liu)水2~ 2.5m制(zhi)成孢(bao)子(zi)懸(xuan)液(ye)，吸(xi)取(qu)少(shao)許加(jia)入沙(sha)土管中,經(jing)真(zhen)空抽(chou)幹(gan),外觀(guan)呈(cheng)松散狀(zhuang)態,於(yu)4℃冰箱(xiang)保存(cun),保存(cun)期可(ke)達5 ~7年。

②冷凍(dong)幹(gan)燥(zao)法,將孢(bao)子(zi)懸(xuan)浮液與保護(hu)劑相混(hun)合(he), 放(fang)在安(an)瓿管內於(yu)-20 -30℃的(de)乙醇浴中(zhong)速(su)凍。然(ran)後,在低溫(wen)下用真(zhen)空泵(beng)抽(chou)幹(gan),用幹冰(bing)使水汽(qi)結凍(dong),熔(rong)封(feng)安(an)瓿管,於(yu)低溫(wen)下保存(cun)。保存(cun)期可(ke)達5~ 10年之久(jiu)。

③石(shi)蠟油(you)封(feng)存(cun)法,在斜(xie)面菌(jun)種(zhong)培養物(wu)上(shang),倒上滅(mie)菌(jun)後(hou)的(de)石(shi)蠟油(you),高出(chu)斜(xie)面1cm,於(yu)4℃冰箱(xiang)或低溫(wen)幹(gan)燥(zao)處保(bao)存(cun)，此(ci)法不適(shi)用(yong)於(yu)能(neng)利用(yong)石(shi)蠟油(you)作(zuo)碳(tan)源的(de)微(wei)生物(wu)，保(bao)存(cun)期為壹年以(yi)上(shang)。

菌(jun)種(zhong)的(de)具體保存(cun)方法

   微生物(wu)具有(you)容(rong)易(yi)變異(yi)的(de)特(te)性，因(yin)此(ci)，在保(bao)藏過(guo)程(cheng)中，必(bi)須(xu)使微(wei)生物(wu)的(de)代謝處於(yu)不活(huo)躍(yue)或(huo)相對(dui)靜(jing)止(zhi)的(de)狀(zhuang)態，才(cai)能(neng)在壹(yi)定的(de)時(shi)間(jian)內使其(qi)不(bu)發(fa)生變異(yi)而(er)又(you)保持生活(huo)能(neng)力。

低溫(wen)、幹(gan)燥(zao)和(he)隔(ge)絕空氣(qi)是(shi)使微(wei)生物(wu)代謝能(neng)力降(jiang)低的(de)重(zhong)要因素，所以(yi)，菌(jun)種(zhong)保藏方法雖多(duo)，但(dan)都是(shi)根據(ju)這三個因素(su)而(er)設計(ji)的(de)。

菌(jun)種(zhong)保藏方法大致(zhi)可(ke)分為以下幾種：

1．傳代培養保(bao)藏法又(you)有斜(xie)面培養、穿刺培養、皰(pao)肉培養基(ji)培(pei)養等(deng)（後者(zhe)作(zuo)保(bao)藏厭氧細(xi)菌(jun)用(yong)），培養後(hou)於(yu)4—6℃冰箱(xiang)內保存(cun)。

2．覆(fu)蓋(gai)保藏法是(shi)傳代培養的(de)變相方法，能(neng)夠適(shi)當(dang)延長保藏時(shi)間(jian)，它是(shi)在斜(xie)面培養物(wu)和(he)穿刺培養物(wu)上(shang)面覆(fu)蓋(gai)滅(mie)菌(jun)，壹(yi)方面可(ke)防止(zhi)因(yin)培(pei)養基(ji)水分蒸(zheng)發(fa)而(er)引(yin)起菌(jun)種(zhong)死亡，另壹(yi)方面可(ke)阻止(zhi)氧(yang)氣(qi)進(jin)入，以減(jian)弱代謝作(zuo)用(yong)。

   載體保藏法是(shi)將微(wei)生物(wu)吸(xi)附(fu)在適(shi)當(dang)的(de)載體，如(ru)土壤(rang)、沙(sha)子(zi)、矽(gui)膠、濾(lv)紙上，而(er)後(hou)進(jin)行(xing)幹燥(zao)的(de)保(bao)藏法，例如(ru)沙(sha)土保(bao)藏法和(he)濾(lv)紙保藏法應用(yong)相當廣(guang)泛(fan)。

   寄主(zhu)保(bao)藏法用於(yu)目前(qian)尚(shang)不能(neng)在人(ren)工培(pei)養基(ji)上(shang)生長的(de)微(wei)生物(wu)，如(ru)病(bing)毒(du)、立克(ke)次氏(shi)體、螺(luo)旋(xuan)體等，它們必(bi)須(xu)在生活(huo)的(de)動物(wu)、昆(kun)蟲、雞(ji)胚內感(gan)染(ran)並傳代，此(ci)法相當於(yu)壹般(ban)微生物(wu)的(de)傳(chuan)代培養保(bao)藏法。病毒(du)等(deng)微生物(wu)亦(yi)可(ke)用其(qi)他(ta)方法如(ru)液(ye)氮(dan)保藏法與冷凍(dong)幹燥(zao)保(bao)藏法進行(xing)保(bao)藏。

5．冷凍(dong)保(bao)藏法可(ke)分低溫(wen)冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰(bing)酒(jiu)精快速(su)凍結（約-70℃）和(he)液氮(dan)（-196℃）等保(bao)藏法。

冷凍(dong)幹(gan)燥(zao)保(bao)藏法先(xian)使微(wei)生物(wu)在極(ji)低溫(wen)度(du)（-70℃左(zuo)右）下快速(su)冷凍(dong)，然(ran)後在減(jian)壓下利用(yong)升(sheng)華(hua)現(xian)象(xiang)除(chu)去水分（真(zhen)空幹(gan)燥(zao)）。

我司在重(zhong)視(shi)產(chan)品(pin)質(zhi)量的(de)同(tong)時(shi)，也建(jian)立了(le)壹(yi)套(tao)集(ji)技(ji)術(shu)支持、物(wu)流、售(shou)後(hou)服(fu)務(wu)等(deng)多(duo)個部門(men)的(de)服(fu)務(wu)體系，努(nu)力(li)把我們方便、快捷、周到(dao)的(de)服(fu)務(wu)提(ti)供給(gei)每(mei)壹(yi)個客戶(hu)。