木(mu)賊(zei)鐮刀菌

木(mu)賊(zei)鐮刀菌

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實驗內容:

1.稱(cheng)量(liang)>溶(rong)化(hua)→調pH >)過濾>分(fen)裝(zhuang)>加(jia)塞(sai)>包(bao)紮(zha)>滅(mie)菌>無(wu)菌檢查

2.幹(gan)熱(re)滅(mie)菌:裝(zhuang)入待(dai)滅(mie)菌物品(pin)升(sheng)溫>恒(heng)溫>降(jiang)溫>開(kai)箱(xiang)取物(wu)

3.高(gao)壓蒸(zheng)汽滅(mie)菌加水>裝(zhuang)物品(pin)>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱(re)>排冷(leng)空(kong)氣(qi)+加(jia)壓>恒(heng)壓>降(jiang)壓回(hui)零(ling)》排汽>取物(wu). >無(wu)菌檢查

4.過濾除(chu)菌:組(zu)裝(zhuang)滅菌>連(lian)接(jie)→壓濾>無(wu)菌檢查>清(qing)洗(xi)滅菌

低(di)溫存(cun)法(fa):

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)用於(yu)科(ke)研(yan)

①簡(jian)單保存(cun)法(fa),將瓊(qiong)脂斜面孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang)物(wu)、菌絲(si)懸(xuan)浮(fu)液以及由(you)麩(fu)皮、大(da)米、小(xiao)米等(deng)谷(gu)物(wu)原(yuan)料制(zhi)成(cheng)的孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang)物(wu)置(zhi)於(yu)4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保(bao)存(cun)時間(jian)不(bu)超過1 ~2個(ge)月，若(ruo)將谷(gu)物(wu)原(yuan)料制(zhi)備的孢(bao)子(zi)瓶抽(chou)真(zhen)空(kong)並在(zai)棉(mian)塞(sai)上浸蠟,以隔絕(jue)外(wai)界(jie)空(kong)氣(qi)和(he)水汽,保(bao)持(chi)時間(jian)可達(da)3~ 4個(ge)月;②液氮超di溫(wen)保(bao)存(cun)法(fa),將生(sheng)長穩定期(qi)懸(xuan)浮(fu)在(zai)10%甘(gan)油或其他(ta)低(di)冰點液體中(zhong),密(mi)封(feng)於(yu)安(an)瓿管內，然(ran)後(hou)控(kong)制(zhi)冷(leng)卻(que)速度,使安(an)瓿管溫度逐(zhu)步(bu)下降(jiang)至(zhi)-35℃時， 即(ji)可置於(yu)-150 ~-196℃的液氮罐中(zhong)保(bao)存(cun)。大(da)多數(shu)微(wei)生(sheng)物如病(bing)毒、噬菌體、多(duo)種(zhong)細(xi)菌、放線(xian)菌、酵母和(he)原(yuan)蟲、特(te)別(bie)是壹些(xie)用冷凍(dong)幹(gan)燥(zao)法(fa)有(you)困難的微(wei)生(sheng)物,都(dou)可用此(ci)法(fa)長期保存(cun)。

微(wei)生(sheng)物菌種(zhong)的培(pei)養(yang):

木(mu)賊(zei)鐮刀菌

1孢(bao)子(zi)制(zhi)備

(1)放線(xian)菌孢(bao)子(zi)的制(zhi)備

壹(yi)般(ban)采用瓊脂(zhi)斜面培養(yang)基,培(pei)養(yang)基中(zhong)含(han)有(you)壹些(xie)適(shi)合產孢(bao)子(zi)的營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen),如麩(fu)皮、豌豆浸汁、蛋白腖和(he)壹(yi)些(xie)無機鹽等(deng)。碳源(yuan)和(he)氮(dan)源(yuan)不(bu)要(yao)太(tai)豐(feng)富（碳(tan)源(yuan)約(yue)為(wei)1%,氮(dan)源(yuan)不(bu)超過0.5%),碳(tan)源(yuan)豐(feng)富容易(yi)造成(cheng)生(sheng)理(li)酸性(xing)的營(ying)養(yang)環(huan)境(jing),不(bu)利(li)於(yu)放線(xian)菌孢(bao)子(zi)的形(xing)成(cheng)，氮源豐(feng)富則有(you)利(li)於(yu)菌絲(si)繁(fan)殖(zhi)而不利(li)於(yu)孢(bao)子(zi)形(xing)成。壹般(ban)情(qing)況(kuang)下， 幹(gan)燥(zao)和(he)限(xian)制(zhi)營(ying)養(yang)可直接或間(jian)接(jie)誘(you)導孢(bao)子(zi)形(xing)成。放線(xian)菌斜面的培(pei)

養(yang)溫(wen)度大(da)多數(shu)為(wei)28℃,少(shao)數為(wei)37 ℃,培(pei)養(yang)時間(jian)為(wei)5~ 14天(tian)。

(2)黴(mei)菌孢(bao)子(zi)的制(zhi)備

黴(mei)菌的孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang),壹(yi)般(ban)以大(da)米、 小(xiao)米、玉(yu)米、麩(fu)皮(pi)、麥粒等(deng)天然(ran)農(nong)產品(pin)為(wei)培養(yang)基。這(zhe)是由於(yu)這(zhe)些(xie)農產品(pin)中(zhong)的營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen)較(jiao)適(shi)合黴(mei)菌的孢(bao)子(zi)繁(fan)殖(zhi)，而且這(zhe)類(lei)培(pei)養(yang)基的表(biao)面積(ji)較(jiao)大(da)，可獲得(de)大(da)量的孢(bao)子(zi)。黴(mei)菌的培(pei)養(yang)-般(ban)為(wei)25~ 28 ℃,培(pei)養(yang)時間(jian)為(wei)4~ 14天(tian)。

2種(zhong)子(zi)制(zhi)備

(1)搖(yao)瓶種(zhong)子(zi)制(zhi)備

搖(yao)瓶種(zhong)子(zi)進罐(guan),常(chang)采用母瓶、子瓶兩級培(pei)養(yang),有(you)時母瓶種(zhong)子(zi)也(ye)可以直接進罐(guan)。種(zhong)子(zi)培(pei)養(yang)基要(yao)求(qiu)比(bi)較(jiao)豐(feng)富,並易(yi)被(bei)菌體分(fen)解利用，氮源(yuan)豐(feng)富有(you)利於(yu)菌絲(si)生(sheng)長。原則上各(ge)種(zhong)營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen)不宜(yi)過濃(nong),子(zi)瓶培養(yang)基濃(nong)度比(bi)母瓶略(lve)高(gao),更(geng)接近種(zhong)子(zi)罐(guan)的培(pei)養(yang)基配(pei)方(fang)。

(2)種(zhong)子(zi)罐(guan)種(zhong)子(zi)制(zhi)備

種(zhong)子(zi)罐(guan)種(zhong)子(zi)制(zhi)備的工(gong)藝過程,因菌種(zhong)不(bu)同而異，壹(yi)般可分(fen)為壹(yi)級種(zhong)子(zi)、 二(er)級種(zhong)子(zi)和(he)三(san)級種(zhong)子(zi)的制(zhi)備。孢(bao)子(zi)(或搖(yao)瓶菌絲(si))被(bei)接(jie)入(ru)到體積(ji)較(jiao)小(xiao)的種(zhong)子(zi)罐(guan)中(zhong),經(jing)培(pei)養(yang)後(hou)形(xing)成大(da)量的菌絲(si)，這(zhe)樣(yang)的種(zhong)子(zi)稱(cheng)為(wei)壹(yi)級種(zhong)子(zi)， 把(ba)壹級種(zhong)子(zi)轉入發酵罐內發酵，稱為二(er)級發酵。如果(guo)將壹(yi)級種(zhong)子(zi)接(jie)入(ru)體(ti)積(ji)較(jiao)大(da)的種(zhong)子(zi)罐(guan)內(nei),經(jing)過培養(yang)形(xing)成(cheng)更(geng)多的菌絲(si),這(zhe)樣(yang)制(zhi)備的種(zhong)子(zi)稱(cheng)為(wei)二(er)級種(zhong)子(zi)，將二(er)級種(zhong)子(zi)轉入發酵罐內發酵稱為三(san)級發酵。同樣(yang)道(dao)理(li),使用三級種(zhong)子(zi)的發酵,稱(cheng)為(wei)四(si)級發酵。

脫(tuo)水存(cun)法(fa):

①沙(sha)土(tu)保存(cun)法(fa),能(neng)產孢(bao)子(zi)的細(xi)菌、放線(xian)菌及黴(mei)菌可采用此(ci)法(fa)保存(cun)，即(ji)將沙(sha)和(he)土(tu)以3:2比(bi)例混(hun)合(he)經(jing)稀(xi)酸(suan)處理(li)洗(xi)凈過篩(shai),裝(zhuang)入小試管內裝(zhuang)置高度為(wei)1cm滅(mie)菌2~ 3次,烘(hong)幹(gan)後(hou)即(ji)可將在(zai)斜(xie)面培養(yang)基上生(sheng)長良(liang)好(hao)的孢(bao)子(zi),用無菌蒸餾(liu)水2~ 2.5m制(zhi)成(cheng)孢(bao)子(zi)懸(xuan)液，吸取少(shao)許加(jia)入沙(sha)土(tu)管中(zhong),經(jing)真(zhen)空(kong)抽(chou)幹(gan),外(wai)觀(guan)呈松散(san)狀(zhuang)態,於(yu)4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保(bao)存(cun)期(qi)可達(da)5 ~7年(nian)。

②冷(leng)凍(dong)幹(gan)燥(zao)法(fa),將孢(bao)子(zi)懸(xuan)浮(fu)液與保護劑相混(hun)合(he), 放在(zai)安(an)瓿管內於(yu)-20 -30℃的乙醇浴中(zhong)速(su)凍(dong)。然(ran)後(hou),在(zai)低(di)溫下用真(zhen)空(kong)泵(beng)抽(chou)幹(gan),用幹(gan)冰(bing)使水汽結凍,熔(rong)封(feng)安(an)瓿管,於(yu)低(di)溫下保存(cun)。保(bao)存(cun)期(qi)可達(da)5~ 10年(nian)之(zhi)久(jiu)。

③石(shi)蠟油封(feng)存(cun)法(fa),在(zai)斜(xie)面菌種(zhong)培(pei)養(yang)物(wu)上,倒上滅(mie)菌後(hou)的石(shi)蠟油,高(gao)出(chu)斜面1cm,於(yu)4℃冰(bing)箱(xiang)或低(di)溫幹(gan)燥(zao)處(chu)保(bao)存(cun)，此(ci)法(fa)不適(shi)用於(yu)能(neng)利用石蠟油作碳源的微(wei)生(sheng)物，保存(cun)期(qi)為(wei)壹(yi)年(nian)以上。

菌種(zhong)的具(ju)體(ti)保存(cun)方(fang)法(fa)

   微(wei)生(sheng)物具有(you)容易(yi)變異(yi)的特(te)性(xing)，因此(ci)，在(zai)保(bao)藏(zang)過程中(zhong)，必須使微(wei)生(sheng)物的代(dai)謝(xie)處於(yu)不(bu)活躍(yue)或相對靜止的狀(zhuang)態，才(cai)能在(zai)壹(yi)定的時間(jian)內(nei)使其不(bu)發生(sheng)變異而又保(bao)持(chi)生(sheng)活能(neng)力(li)。

低(di)溫、幹(gan)燥(zao)和(he)隔(ge)絕(jue)空(kong)氣(qi)是使微(wei)生(sheng)物代謝(xie)能力(li)降(jiang)低(di)的重要(yao)因素，所(suo)以，菌種(zhong)保(bao)藏(zang)方法(fa)雖多，但(dan)都是根據(ju)這(zhe)三(san)個(ge)因素而設(she)計(ji)的。

菌種(zhong)保(bao)藏(zang)方法(fa)大(da)致可分(fen)為以下幾(ji)種(zhong)：

1．傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)保(bao)藏(zang)法又有(you)斜(xie)面培養(yang)、穿(chuan)刺培(pei)養(yang)、皰(pao)肉培(pei)養(yang)基培(pei)養(yang)等(deng)（後(hou)者作保藏(zang)厭氧細(xi)菌用），培養(yang)後(hou)於(yu)4—6℃冰(bing)箱(xiang)內保(bao)存(cun)。

2．覆蓋(gai)保藏(zang)法是傳代培養(yang)的變(bian)相方(fang)法(fa)，能夠適(shi)當延(yan)長保藏(zang)時間(jian)，它(ta)是在(zai)斜(xie)面培養(yang)物(wu)和(he)穿(chuan)刺培(pei)養(yang)物(wu)上面覆蓋(gai)滅菌，壹方(fang)面可防止因培養(yang)基水分(fen)蒸發而引起(qi)菌種(zhong)死(si)亡，另壹(yi)方面可阻止氧氣(qi)進入(ru)，以減弱代謝(xie)作(zuo)用。

   載(zai)體(ti)保(bao)藏(zang)法是將微(wei)生(sheng)物吸附(fu)在(zai)適(shi)當的載(zai)體(ti)，如土(tu)壤、沙(sha)子、矽(gui)膠(jiao)、濾紙上，而後(hou)進行(xing)幹(gan)燥(zao)的保(bao)藏(zang)法，例如沙(sha)土(tu)保藏(zang)法和(he)濾紙保藏(zang)法應用相當(dang)廣泛。

   寄(ji)主(zhu)保(bao)藏(zang)法用於(yu)目前尚(shang)不(bu)能在(zai)人(ren)工培養(yang)基上生(sheng)長的微(wei)生(sheng)物，如病(bing)毒、立克(ke)次氏(shi)體(ti)、螺旋體(ti)等(deng)，它們(men)必須在(zai)生(sheng)活的動(dong)物(wu)、昆蟲、雞(ji)胚(pei)內(nei)感(gan)染(ran)並傳(chuan)代(dai)，此(ci)法(fa)相當(dang)於(yu)壹(yi)般微(wei)生(sheng)物的傳(chuan)代(dai)培養(yang)保(bao)藏(zang)法。病(bing)毒(du)等(deng)微(wei)生(sheng)物亦(yi)可用其他(ta)方法如液氮保藏(zang)法與冷凍(dong)幹(gan)燥(zao)保(bao)藏(zang)法進行(xing)保藏(zang)。

5．冷(leng)凍(dong)保(bao)藏(zang)法可分(fen)低(di)溫冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹(gan)冰(bing)酒(jiu)精(jing)快(kuai)速(su)凍結（約-70℃）和(he)液氮（-196℃）等(deng)保藏(zang)法。

冷(leng)凍(dong)幹(gan)燥(zao)保(bao)藏(zang)法先使微(wei)生(sheng)物在(zai)極低(di)溫度（-70℃左(zuo)右(you)）下快速(su)冷凍，然(ran)後(hou)在(zai)減(jian)壓下利用升華現象(xiang)除(chu)去(qu)水分(fen)（真(zhen)空(kong)幹(gan)燥(zao)）。

我(wo)司(si)在(zai)重視(shi)產品(pin)質量(liang)的同時，也建(jian)立了(le)壹套集技(ji)術支(zhi)持(chi)、物流、售後(hou)服務(wu)等(deng)多個(ge)部門(men)的服務(wu)體系，努(nu)力(li)把(ba)我們(men)方便、快捷(jie)、周到的服務(wu)提供(gong)給每(mei)壹(yi)個(ge)客戶(hu)。