花(hua)生根(gen)瘤(liu)菌

花生根(gen)瘤(liu)菌

我(wo)司(si)產品(pin)齊(qi)全(quan)，因上(shang)架(jia)數(shu)量有限(xian)，未能(neng)全(quan)部(bu)上(shang)架(jia)，如(ru)需(xu)訂購(gou)或者(zhe)產(chan)品(pin)詳情請(qing)直(zhi)接聯系(xi)我(wo)司(si)銷(xiao)售(shou)！

實驗(yan)內容:

1.稱(cheng)量>溶化(hua)→調(tiao)pH >)過(guo)濾(lv)>分(fen)裝>加(jia)塞>包紮(zha)>滅菌>無菌檢(jian)查

2.幹(gan)熱(re)滅菌:裝入待滅菌物(wu)品(pin)升溫(wen)>恒(heng)溫(wen)>降(jiang)溫(wen)>開箱取物

3.高壓(ya)蒸汽(qi)滅菌加(jia)水>裝物(wu)品(pin)>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱(re)>排(pai)冷(leng)空(kong)氣+加(jia)壓(ya)>恒(heng)壓(ya)>降(jiang)壓(ya)回零》排(pai)汽(qi)>取物. >無(wu)菌(jun)檢(jian)查

4.過(guo)濾(lv)除菌(jun):組裝(zhuang)滅菌>連接→壓(ya)濾(lv)>無菌(jun)檢(jian)查>清洗滅菌

低(di)溫(wen)存(cun)法(fa):

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅用於科研

①簡單保(bao)存(cun)法(fa),將瓊脂(zhi)斜面(mian)孢子培(pei)養(yang)物(wu)、菌(jun)絲懸(xuan)浮液(ye)以(yi)及(ji)由麩皮、大(da)米(mi)、小米等(deng)谷(gu)物原料制(zhi)成(cheng)的孢(bao)子培(pei)養(yang)物(wu)置於4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保存(cun)時間(jian)不超(chao)過(guo)1 ~2個(ge)月，若(ruo)將(jiang)谷(gu)物原料制(zhi)備的(de)孢(bao)子瓶抽(chou)真空(kong)並在(zai)棉塞上(shang)浸蠟(la),以(yi)隔(ge)絕(jue)外界空(kong)氣和(he)水汽(qi),保(bao)持(chi)時(shi)間(jian)可(ke)達(da)3~ 4個月(yue);②液氮超(chao)di溫(wen)保存(cun)法(fa),將生長(chang)穩(wen)定(ding)期(qi)懸(xuan)浮在(zai)10%甘油或其(qi)他(ta)低(di)冰(bing)點(dian)液體中,密(mi)封於(yu)安瓿管(guan)內，然後(hou)控制(zhi)冷(leng)卻速(su)度,使(shi)安瓿管(guan)溫(wen)度逐(zhu)步下降(jiang)至(zhi)-35℃時(shi)， 即可(ke)置於-150 ~-196℃的(de)液氮罐中(zhong)保(bao)存(cun)。大(da)多數(shu)微生物(wu)如(ru)病毒(du)、噬菌(jun)體、多種細菌、放(fang)線(xian)菌、酵(jiao)母和(he)原蟲(chong)、特(te)別(bie)是(shi)壹些用冷(leng)凍幹燥(zao)法(fa)有(you)困難的微生物(wu),都(dou)可(ke)用此法(fa)長(chang)期保存(cun)。

微生物(wu)菌(jun)種的(de)培(pei)養(yang):

花生根(gen)瘤(liu)菌

1孢子(zi)制備

(1)放線(xian)菌孢(bao)子的制(zhi)備

壹般(ban)采(cai)用瓊脂(zhi)斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji),培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)含(han)有壹些適合(he)產(chan)孢子(zi)的營養成(cheng)分(fen),如(ru)麩(fu)皮、豌豆(dou)浸(jin)汁(zhi)、蛋(dan)白腖(dong)和(he)壹些無(wu)機(ji)鹽等(deng)。碳(tan)源(yuan)和(he)氮(dan)源(yuan)不要太(tai)豐(feng)富(fu)（碳(tan)源(yuan)約(yue)為1%,氮源(yuan)不超(chao)過(guo)0.5%),碳(tan)源(yuan)豐富(fu)容易造成(cheng)生理酸(suan)性的營養(yang)環(huan)境(jing),不利於放(fang)線(xian)菌孢(bao)子的形(xing)成(cheng)，氮源(yuan)豐富(fu)則有利於菌(jun)絲繁(fan)殖而不利於孢(bao)子形(xing)成(cheng)。壹般(ban)情況下， 幹(gan)燥(zao)和(he)限(xian)制營(ying)養(yang)可(ke)直(zhi)接(jie)或間(jian)接(jie)誘導孢(bao)子形成(cheng)。放線(xian)菌斜(xie)面(mian)的培(pei)

養溫(wen)度大(da)多數(shu)為28℃,少數(shu)為37 ℃,培(pei)養(yang)時(shi)間(jian)為5~ 14天。

(2)黴(mei)菌(jun)孢子的制(zhi)備

黴菌的(de)孢子培(pei)養(yang),壹般(ban)以(yi)大(da)米(mi)、 小米、玉米(mi)、麩皮、麥粒(li)等(deng)天然農(nong)產(chan)品(pin)為培(pei)養(yang)基(ji)。這(zhe)是(shi)由於(yu)這(zhe)些農(nong)產品(pin)中的(de)營養成(cheng)分(fen)較(jiao)適合(he)黴(mei)菌的(de)孢子繁殖，而且這(zhe)類培(pei)養(yang)基(ji)的(de)表(biao)面(mian)積較(jiao)大(da)，可(ke)獲得(de)大(da)量(liang)的孢子。黴(mei)菌的(de)培(pei)養(yang)-般(ban)為25~ 28 ℃,培(pei)養(yang)時(shi)間(jian)為4~ 14天。

2種(zhong)子(zi)制備

(1)搖瓶種(zhong)子(zi)制(zhi)備

搖瓶種(zhong)子(zi)進(jin)罐,常采(cai)用母瓶、子(zi)瓶兩(liang)級培(pei)養(yang),有(you)時母瓶種(zhong)子(zi)也(ye)可(ke)以(yi)直(zhi)接進罐。種(zhong)子(zi)培(pei)養(yang)基(ji)要求(qiu)比較(jiao)豐富,並易(yi)被菌體(ti)分(fen)解(jie)利用，氮源(yuan)豐富(fu)有利於菌(jun)絲生長(chang)。原則上(shang)各種(zhong)營養成(cheng)分(fen)不宜(yi)過(guo)濃(nong),子瓶培(pei)養(yang)基(ji)濃(nong)度比母瓶略(lve)高(gao),更(geng)接近種(zhong)子(zi)罐(guan)的培(pei)養(yang)基(ji)配(pei)方(fang)。

(2)種子罐種(zhong)子(zi)制備

種子罐(guan)種子制(zhi)備的(de)工藝(yi)過(guo)程(cheng),因菌種不同而異(yi)，壹般(ban)可(ke)分(fen)為壹級種(zhong)子、 二級(ji)種(zhong)子和(he)三(san)級(ji)種(zhong)子(zi)的制(zhi)備。孢(bao)子(zi)(或搖(yao)瓶菌(jun)絲)被接入(ru)到(dao)體積(ji)較(jiao)小的種(zhong)子罐中(zhong),經(jing)培(pei)養(yang)後(hou)形成(cheng)大(da)量(liang)的菌絲，這(zhe)樣的(de)種子稱(cheng)為壹級種(zhong)子(zi)， 把壹級種(zhong)子(zi)轉入發酵(jiao)罐(guan)內發酵(jiao)，稱(cheng)為二級(ji)發(fa)酵(jiao)。如(ru)果將壹級種(zhong)子(zi)接入體(ti)積較(jiao)大(da)的(de)種子罐內,經過(guo)培(pei)養(yang)形(xing)成(cheng)更(geng)多的菌絲,這(zhe)樣制(zhi)備的(de)種(zhong)子稱(cheng)為二級(ji)種(zhong)子，將(jiang)二級(ji)種(zhong)子轉入發酵(jiao)罐(guan)內發酵(jiao)稱(cheng)為三(san)級(ji)發(fa)酵(jiao)。同樣道理,使(shi)用三(san)級(ji)種(zhong)子(zi)的發(fa)酵(jiao),稱(cheng)為四(si)級發酵(jiao)。

脫(tuo)水存(cun)法(fa):

①沙(sha)土(tu)保(bao)存(cun)法(fa),能(neng)產(chan)孢(bao)子的細菌、放線(xian)菌及(ji)黴菌可(ke)采(cai)用此法(fa)保(bao)存(cun)，即將(jiang)沙和(he)土(tu)以(yi)3:2比例(li)混合(he)經(jing)稀(xi)酸(suan)處理洗(xi)凈過(guo)篩,裝(zhuang)入小試管(guan)內裝置高度(du)為1cm滅菌2~ 3次(ci),烘(hong)幹後(hou)即可(ke)將(jiang)在(zai)斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)生長(chang)良好(hao)的孢子(zi),用無菌(jun)蒸餾水2~ 2.5m制(zhi)成(cheng)孢子(zi)懸(xuan)液，吸取(qu)少許加(jia)入(ru)沙(sha)土(tu)管(guan)中,經真空(kong)抽幹,外觀(guan)呈(cheng)松(song)散狀態,於(yu)4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保存(cun)期可(ke)達(da)5 ~7年。

②冷(leng)凍幹燥(zao)法(fa),將孢子(zi)懸(xuan)浮液(ye)與(yu)保護(hu)劑(ji)相混合(he), 放(fang)在安(an)瓿管(guan)內於-20 -30℃的乙醇浴中速(su)凍。然後(hou),在(zai)低(di)溫(wen)下用真空(kong)泵抽幹(gan),用幹冰(bing)使(shi)水汽(qi)結(jie)凍,熔封安(an)瓿管(guan),於低(di)溫(wen)下保(bao)存(cun)。保存(cun)期可(ke)達(da)5~ 10年之久。

③石(shi)蠟(la)油封存(cun)法(fa),在斜面(mian)菌種培(pei)養(yang)物(wu)上(shang),倒上(shang)滅菌後(hou)的石(shi)蠟(la)油,高(gao)出斜(xie)面(mian)1cm,於4℃冰(bing)箱(xiang)或低(di)溫(wen)幹燥(zao)處保存(cun)，此法(fa)不適用於能(neng)利用石(shi)蠟(la)油作碳(tan)源(yuan)的微生物(wu)，保(bao)存(cun)期為壹年以(yi)上(shang)。

菌種的具(ju)體保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)

   微生物(wu)具(ju)有容(rong)易變(bian)異(yi)的(de)特(te)性，因此，在保(bao)藏(zang)過(guo)程(cheng)中(zhong)，必(bi)須使(shi)微生物(wu)的(de)代謝(xie)處(chu)於不活(huo)躍或相(xiang)對(dui)靜(jing)止的(de)狀態，才能(neng)在(zai)壹定的(de)時(shi)間(jian)內使(shi)其(qi)不發(fa)生變(bian)異(yi)而(er)又保持(chi)生活(huo)能(neng)力(li)。

低(di)溫(wen)、幹燥(zao)和(he)隔(ge)絕(jue)空(kong)氣是(shi)使(shi)微生物(wu)代謝(xie)能(neng)力(li)降(jiang)低(di)的重(zhong)要因素，所以(yi)，菌(jun)種保藏(zang)方(fang)法(fa)雖多，但(dan)都(dou)是(shi)根據(ju)這(zhe)三(san)個(ge)因素而設(she)計的。

菌(jun)種保藏(zang)方(fang)法(fa)大(da)致(zhi)可(ke)分(fen)為以(yi)下(xia)幾種：

1．傳(chuan)代培(pei)養(yang)保(bao)藏(zang)法(fa)又(you)有斜面(mian)培(pei)養(yang)、穿(chuan)刺(ci)培(pei)養(yang)、皰(pao)肉(rou)培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)等(deng)（後(hou)者(zhe)作保藏(zang)厭氧細菌用），培(pei)養(yang)後(hou)於4—6℃冰(bing)箱(xiang)內保存(cun)。

2．覆蓋(gai)保(bao)藏(zang)法(fa)是(shi)傳(chuan)代培(pei)養(yang)的(de)變(bian)相(xiang)方(fang)法(fa)，能(neng)夠適當延長(chang)保藏(zang)時間(jian)，它(ta)是(shi)在斜(xie)面(mian)培(pei)養(yang)物(wu)和(he)穿(chuan)刺(ci)培(pei)養(yang)物(wu)上(shang)面(mian)覆蓋滅菌，壹方(fang)面(mian)可(ke)防止因培(pei)養(yang)基(ji)水分(fen)蒸發(fa)而引起菌種死(si)亡，另(ling)壹方(fang)面(mian)可(ke)阻(zu)止(zhi)氧氣進入(ru)，以(yi)減(jian)弱(ruo)代謝(xie)作用。

   載體(ti)保藏(zang)法(fa)是(shi)將微生物(wu)吸(xi)附(fu)在適當的載(zai)體，如土(tu)壤(rang)、沙(sha)子、矽(gui)膠、濾(lv)紙上(shang)，而後(hou)進行(xing)幹(gan)燥(zao)的保(bao)藏(zang)法(fa)，例(li)如沙土保(bao)藏(zang)法(fa)和(he)濾(lv)紙保(bao)藏(zang)法(fa)應(ying)用相當廣(guang)泛(fan)。

   寄(ji)主(zhu)保藏(zang)法(fa)用於目(mu)前(qian)尚不能(neng)在(zai)人(ren)工培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)生長(chang)的微生物(wu)，如(ru)病毒(du)、立克次氏體(ti)、螺旋體等(deng)，它們必(bi)須在生活(huo)的(de)動物(wu)、昆蟲(chong)、雞胚(pei)內感染並傳(chuan)代，此(ci)法(fa)相(xiang)當於壹般(ban)微生物(wu)的(de)傳(chuan)代培(pei)養(yang)保(bao)藏(zang)法(fa)。病(bing)毒等(deng)微生物(wu)亦(yi)可(ke)用其(qi)他(ta)方(fang)法(fa)如(ru)液氮保藏(zang)法(fa)與(yu)冷(leng)凍幹燥(zao)保藏(zang)法(fa)進(jin)行(xing)保(bao)藏(zang)。

5．冷(leng)凍保藏(zang)法(fa)可(ke)分(fen)低(di)溫(wen)冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹冰(bing)酒(jiu)精快速凍結（約(yue)-70℃）和(he)液(ye)氮（-196℃）等(deng)保藏(zang)法(fa)。

冷(leng)凍幹燥(zao)保藏(zang)法(fa)先使(shi)微生物(wu)在(zai)極低(di)溫(wen)度（-70℃左(zuo)右(you)）下快速冷(leng)凍，然後(hou)在減(jian)壓(ya)下(xia)利用升華(hua)現(xian)象除去(qu)水分(fen)（真空(kong)幹燥）。

我(wo)司(si)在重(zhong)視產品(pin)質量的同時，也(ye)建立(li)了壹套集技(ji)術(shu)支(zhi)持(chi)、物(wu)流(liu)、售(shou)後(hou)服(fu)務等(deng)多個部(bu)門的(de)服(fu)務體(ti)系(xi)，努(nu)力(li)把我(wo)們方(fang)便、快捷(jie)、周到的服(fu)務提(ti)供(gong)給(gei)每壹個客(ke)戶(hu)。