繡球菌

繡球菌

我(wo)司產(chan)品(pin)齊(qi)全(quan)，因(yin)上(shang)架(jia)數量(liang)有限(xian)，未(wei)能(neng)全(quan)部(bu)上(shang)架，如(ru)需(xu)訂購(gou)或者產(chan)品(pin)詳(xiang)情(qing)請(qing)直接聯(lian)系我司(si)銷(xiao)售(shou)！

實驗內容:

1.稱(cheng)量(liang)>溶(rong)化→調(tiao)pH >)過(guo)濾>分(fen)裝>加(jia)塞>包(bao)紮(zha)>滅(mie)菌>無(wu)菌檢查

2.幹(gan)熱滅(mie)菌:裝(zhuang)入待滅菌物品(pin)升溫>恒(heng)溫>降(jiang)溫>開(kai)箱取物

3.高(gao)壓蒸汽滅菌加水(shui)>裝(zhuang)物品(pin)>加(jia)蓋>加(jia)熱>排(pai)冷空氣(qi)+加(jia)壓>恒(heng)壓>降(jiang)壓回(hui)零(ling)》排(pai)汽>取物. >無(wu)菌檢查

4.過(guo)濾除菌:組(zu)裝(zhuang)滅(mie)菌>連接(jie)→壓濾>無(wu)菌檢查>清(qing)洗(xi)滅(mie)菌

低溫存法(fa):

公(gong)司產(chan)品(pin)僅用於(yu)科(ke)研

①簡單(dan)保存法(fa),將(jiang)瓊(qiong)脂斜面(mian)孢(bao)子培養物、菌絲懸(xuan)浮(fu)液以(yi)及由麩皮、大米(mi)、小(xiao)米(mi)等(deng)谷(gu)物原(yuan)料(liao)制(zhi)成的(de)孢子(zi)培養物置(zhi)於(yu)4℃冰(bing)箱保存,保存時(shi)間(jian)不超過(guo)1 ~2個月(yue)，若(ruo)將(jiang)谷(gu)物原(yuan)料(liao)制(zhi)備的(de)孢子(zi)瓶抽真空並(bing)在(zai)棉(mian)塞上浸蠟(la),以(yi)隔絕外(wai)界空氣(qi)和水(shui)汽,保持(chi)時(shi)間(jian)可(ke)達3~ 4個月(yue);②液(ye)氮超(chao)di溫(wen)保存法(fa),將(jiang)生(sheng)長穩(wen)定(ding)期(qi)懸(xuan)浮(fu)在(zai)10%甘油(you)或其他低冰點液體(ti)中(zhong),密(mi)封於(yu)安瓿管(guan)內，然後控制冷卻(que)速度,使(shi)安瓿管(guan)溫(wen)度逐步下(xia)降(jiang)至-35℃時(shi)， 即可(ke)置(zhi)於(yu)-150 ~-196℃的(de)液氮罐中(zhong)保存。大(da)多數微(wei)生(sheng)物如(ru)病毒、噬(shi)菌體(ti)、多種(zhong)細菌、放線(xian)菌、酵母(mu)和原(yuan)蟲、特(te)別是壹些用(yong)冷凍幹(gan)燥(zao)法有困(kun)難的(de)微生(sheng)物,都可(ke)用此(ci)法(fa)長(chang)期保存。

微(wei)生物菌種(zhong)的培養:

繡球菌

1孢(bao)子制(zhi)備(bei)

(1)放線(xian)菌孢子(zi)的(de)制備

壹(yi)般(ban)采(cai)用瓊脂斜面(mian)培養基(ji),培養基(ji)中(zhong)含(han)有壹些適(shi)合(he)產(chan)孢子的營養成(cheng)分(fen),如(ru)麩皮、豌(wan)豆(dou)浸汁、蛋白腖(dong)和(he)壹(yi)些無(wu)機鹽等(deng)。碳源和(he)氮源不要(yao)太豐(feng)富（碳源約為1%,氮源不超過(guo)0.5%),碳源豐(feng)富容易造成生(sheng)理(li)酸性(xing)的營養環(huan)境(jing),不利於(yu)放線(xian)菌孢子(zi)的(de)形成，氮源豐(feng)富則(ze)有利於(yu)菌絲繁殖(zhi)而不利於(yu)孢子形成(cheng)。壹(yi)般(ban)情(qing)況下， 幹(gan)燥(zao)和限(xian)制(zhi)營養可(ke)直接或間(jian)接(jie)誘導孢子(zi)形(xing)成。放線(xian)菌斜面(mian)的(de)培

養溫(wen)度(du)大多數為28℃,少數為37 ℃,培養時(shi)間(jian)為5~ 14天(tian)。

(2)黴(mei)菌孢子(zi)的(de)制備

黴(mei)菌的孢(bao)子(zi)培養,壹(yi)般(ban)以(yi)大米、 小(xiao)米(mi)、玉(yu)米(mi)、麩皮、麥粒(li)等(deng)天(tian)然(ran)農(nong)產品為培養基(ji)。這是由於(yu)這些農(nong)產(chan)品(pin)中(zhong)的營養成(cheng)分(fen)較適(shi)合黴菌的孢(bao)子(zi)繁殖(zhi)，而且(qie)這類培養基(ji)的(de)表(biao)面(mian)積(ji)較大(da)，可(ke)獲得(de)大量(liang)的孢(bao)子。黴菌的培養-般(ban)為25~ 28 ℃,培養時(shi)間(jian)為4~ 14天(tian)。

2種(zhong)子制備

(1)搖(yao)瓶種(zhong)子制備

搖(yao)瓶種(zhong)子進(jin)罐(guan),常采用母(mu)瓶、子(zi)瓶兩(liang)級(ji)培養,有時母(mu)瓶種(zhong)子也可(ke)以(yi)直接進(jin)罐(guan)。種(zhong)子培養基(ji)要(yao)求比較豐(feng)富,並(bing)易被(bei)菌體(ti)分(fen)解利用，氮源豐(feng)富有利於(yu)菌絲生(sheng)長(chang)。原(yuan)則(ze)上(shang)各(ge)種(zhong)營養成(cheng)分(fen)不宜(yi)過濃,子(zi)瓶培養基(ji)濃度比母(mu)瓶略高(gao),更(geng)接近(jin)種(zhong)子罐的培養基(ji)配(pei)方(fang)。

(2)種(zhong)子罐種(zhong)子制備

種(zhong)子罐種(zhong)子制備的(de)工(gong)藝過(guo)程(cheng),因(yin)菌種(zhong)不同而異，壹(yi)般(ban)可(ke)分為壹(yi)級(ji)種(zhong)子、 二(er)級種(zhong)子和三級(ji)種(zhong)子的制備(bei)。孢(bao)子(或搖(yao)瓶菌絲)被(bei)接入到體(ti)積(ji)較小(xiao)的(de)種(zhong)子罐中(zhong),經(jing)培養後形成大量(liang)的菌絲，這樣的種(zhong)子稱(cheng)為壹級(ji)種(zhong)子， 把(ba)壹級種(zhong)子轉入發酵罐(guan)內發酵，稱(cheng)為二級(ji)發酵。如(ru)果(guo)將(jiang)壹(yi)級種(zhong)子接入體(ti)積(ji)較大(da)的種(zhong)子罐內,經(jing)過(guo)培養形(xing)成(cheng)更多的菌絲,這樣制備的(de)種(zhong)子稱(cheng)為二級(ji)種(zhong)子，將(jiang)二(er)級種(zhong)子轉入發酵罐(guan)內發酵稱(cheng)為三級(ji)發酵。同(tong)樣(yang)道理(li),使(shi)用三級(ji)種(zhong)子的發酵,稱(cheng)為四級(ji)發酵。

脫(tuo)水存法(fa):

①沙土(tu)保存法(fa),能(neng)產(chan)孢(bao)子(zi)的細菌、放線(xian)菌及黴(mei)菌可(ke)采用(yong)此(ci)法(fa)保存，即將(jiang)沙和土(tu)以(yi)3:2比例混合經(jing)稀(xi)酸處理(li)洗(xi)凈過篩,裝(zhuang)入小(xiao)試(shi)管(guan)內裝置(zhi)高度(du)為1cm滅(mie)菌2~ 3次(ci),烘(hong)幹(gan)後即可(ke)將(jiang)在(zai)斜面(mian)培養基(ji)上(shang)生長良好(hao)的(de)孢(bao)子(zi),用(yong)無(wu)菌蒸餾水(shui)2~ 2.5m制(zhi)成孢(bao)子(zi)懸(xuan)液(ye)，吸(xi)取少許加入沙土(tu)管(guan)中(zhong),經(jing)真空抽幹(gan),外(wai)觀(guan)呈(cheng)松散狀態,於(yu)4℃冰(bing)箱保存,保存期(qi)可(ke)達5 ~7年(nian)。

②冷凍幹(gan)燥(zao)法,將(jiang)孢(bao)子懸(xuan)浮(fu)液與(yu)保護(hu)劑相混合, 放在(zai)安(an)瓿管(guan)內於(yu)-20 -30℃的(de)乙醇(chun)浴(yu)中(zhong)速凍。然後,在(zai)低溫下用真空泵(beng)抽幹(gan),用(yong)幹(gan)冰(bing)使(shi)水汽結凍,熔封(feng)安(an)瓿管(guan),於(yu)低溫下保存。保存期(qi)可(ke)達5~ 10年(nian)之久。

③石(shi)蠟油(you)封(feng)存法(fa),在(zai)斜面(mian)菌種(zhong)培養物上(shang),倒(dao)上(shang)滅(mie)菌後的石蠟油,高(gao)出(chu)斜面(mian)1cm,於(yu)4℃冰(bing)箱或低溫幹(gan)燥(zao)處保存，此(ci)法(fa)不適用(yong)於(yu)能(neng)利用石(shi)蠟(la)油作碳源的(de)微(wei)生物，保存期(qi)為壹(yi)年(nian)以(yi)上。

菌種(zhong)的具體(ti)保存方(fang)法(fa)

   微(wei)生物具(ju)有容易變(bian)異的(de)特(te)性(xing)，因(yin)此(ci)，在(zai)保藏過(guo)程(cheng)中(zhong)，必須(xu)使(shi)微生物的(de)代謝處於(yu)不活躍(yue)或相對(dui)靜止(zhi)的狀態，才能(neng)在(zai)壹(yi)定的時間(jian)內使(shi)其不發生(sheng)變(bian)異而又保持(chi)生(sheng)活能(neng)力。

低溫、幹(gan)燥(zao)和隔(ge)絕空氣(qi)是使(shi)微生物代謝能(neng)力降(jiang)低的重要(yao)因(yin)素(su)，所(suo)以(yi)，菌種(zhong)保藏方(fang)法(fa)雖(sui)多，但都是根(gen)據這三個因(yin)素(su)而設計的(de)。

菌種(zhong)保藏方(fang)法(fa)大(da)致(zhi)可(ke)分為以(yi)下幾種(zhong)：

1．傳(chuan)代培養保藏法(fa)又有斜面(mian)培養、穿(chuan)刺(ci)培養、皰(pao)肉培養基(ji)培養等(deng)（後者作(zuo)保藏厭(yan)氧(yang)細(xi)菌用），培養後於(yu)4—6℃冰(bing)箱內保存。

2．覆(fu)蓋(gai)保藏法(fa)是(shi)傳(chuan)代培養的(de)變(bian)相方(fang)法(fa)，能(neng)夠適當延長保藏時(shi)間(jian)，它是在(zai)斜面(mian)培養物和(he)穿(chuan)刺(ci)培養物上(shang)面(mian)覆(fu)蓋(gai)滅菌，壹方(fang)面(mian)可(ke)防止(zhi)因(yin)培養基(ji)水(shui)分蒸發而引(yin)起(qi)菌種(zhong)死(si)亡，另壹(yi)方(fang)面(mian)可(ke)阻止(zhi)氧(yang)氣(qi)進(jin)入，以(yi)減弱(ruo)代謝作(zuo)用。

   載(zai)體(ti)保藏法(fa)是(shi)將(jiang)微(wei)生物吸(xi)附在(zai)適(shi)當的載體(ti)，如(ru)土(tu)壤、沙子、矽(gui)膠、濾紙(zhi)上，而後進(jin)行(xing)幹(gan)燥(zao)的保藏法(fa)，例(li)如(ru)沙土(tu)保藏法(fa)和(he)濾(lv)紙(zhi)保藏法(fa)應用(yong)相(xiang)當廣(guang)泛。

   寄(ji)主(zhu)保藏法(fa)用(yong)於(yu)目前尚不能(neng)在(zai)人(ren)工培養基(ji)上(shang)生長的微生物，如(ru)病毒、立(li)克(ke)次(ci)氏(shi)體(ti)、螺(luo)旋體(ti)等(deng)，它們必須(xu)在(zai)生(sheng)活的(de)動物、昆(kun)蟲、雞胚(pei)內感染(ran)並(bing)傳(chuan)代，此(ci)法相當於(yu)壹般(ban)微(wei)生物的(de)傳(chuan)代培養保藏法(fa)。病毒等(deng)微(wei)生(sheng)物亦(yi)可(ke)用其他方(fang)法(fa)如(ru)液(ye)氮保藏法(fa)與(yu)冷凍幹(gan)燥(zao)保藏法(fa)進(jin)行(xing)保藏。

5．冷凍保藏法(fa)可(ke)分低溫冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹(gan)冰(bing)酒(jiu)精快速(su)凍結（約-70℃）和(he)液氮（-196℃）等(deng)保藏法(fa)。

冷凍幹(gan)燥(zao)保藏法(fa)先(xian)使(shi)微生物在(zai)極(ji)低溫度（-70℃左(zuo)右）下快速冷凍，然後在(zai)減(jian)壓下利用升華(hua)現象除去(qu)水(shui)分（真空幹(gan)燥(zao)）。

我(wo)司在(zai)重視產(chan)品(pin)質量(liang)的同(tong)時，也建立了(le)壹(yi)套集(ji)技(ji)術支持(chi)、物流(liu)、售(shou)後服務等(deng)多個部門(men)的(de)服務體(ti)系(xi)，努(nu)力把(ba)我們方(fang)便(bian)、快(kuai)捷、周到(dao)的(de)服務提(ti)供(gong)給(gei)每(mei)壹個客戶。