腺病(bing)毒型PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

腺病(bing)毒型PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒 

特(te)點:

高(gao)特(te)異性(xing):與其他病(bing)毒無交叉(cha)反(fan)應,無非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增;

高靈(ling)敏度(du):檢(jian)測靈(ling)敏度(du)可達10^100;

操作(zuo)簡(jian)便:該系(xi)列所(suo)有試(shi)劑(ji)均采用(yong)相(xiang)同的體系(xi)和條(tiao)件,可(ke)同時進(jin)行多個(ge)檢(jian)測:

高(gao)通(tong)量(liang):多種(zhong)雙(shuang)重(zhong)PCR檢(jian)測以(yi)及(ji)三(san)重PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒。

組成(cheng)及(ji)配(pei)制(zhi)

1、酶標(biao)板:-塊(96孔)

2、標(biao)準品(pin) (凍(dong)幹(gan)品): 2瓶(ping),請臨(lin)用(yong)前15分鐘內配制(zhi)。每(mei)瓶(ping)以(yi)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋至(zhi)0.5m1,蓋(gai)好(hao)後(hou)室(shi)溫(wen)靜(jing)置大(da)約10分(fen)鐘,同時

反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助溶(rong)解(jie)，其(qi)濃度(du)為200 U/L, 然(ran)後(hou)做(zuo)系(xi)列倍(bei)比稀(xi)釋(註(zhu):不要直接(jie)在板中(zhong)進(jin)行倍(bei)比稀(xi)釋),分(fen)別(bie)配(pei)制(zhi)成(cheng)200 U/

L, 100 U/L,50 U/L,25 U/L, 12.5 U/L,6.25 U/L,3. 12 U/L,樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)直接(jie)作(zuo)為(wei)空(kong)白孔0 U/L。如(ru)配(pei)制(zhi)100 U/L標(biao)準品(pin):取(qu)0.3ml (不 要少(shao)於(yu)0.3m1 )200 U/L的(de) 上(shang)述標(biao)準品(pin)加入(ru)含(han)有(you)0. 3m1樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)的(de)Eppendorf管(guan)中(zhong)，混(hun)勻即(ji)可(ke)，其(qi)余濃(nong)度(du)以(yi)此(ci)類推(tui)。

特點優(you)勢:

1.所(suo)有(you)產(chan)品(pin)使(shi)用(yong)的(de)引(yin)物均經過詳盡(jin)的生物信(xin)息(xi)學分(fen)析(xi)，經自(zi)建底大(da)效(xiao)據(ju)庫的(de)比對(dui)，確(que)保所(suo)用(yong)的(de)每(mei)壹條引(yin)物均為種(zhong)屬(shu)或血清型特異的基因(yin)序(xu)列(lie)區段(duan)可實(shi)現對(dui)細(xi)菌(jun)種(zhong)屬(shu)及(ji)血清型的特異檢(jian)制(zhi)，特(te)異性(xing)均達到(dao)100%。

2.重(zhong)現性(xing):該(gai)系(xi)列所(suo)有產(chan)品(pin)均經過大(da)量(liang)實(shi)驗菌(jun)株的驗證，重現性(xing)為(wei)100%。

3.靈敏性(xing):讀(du)系(xi)列產(chan)品(pin)可(ke)實(shi)現對(dui)檢(jian)測菌(jun)的高靈(ling)敏檢(jian)測，當(dang)樣(yang)品中(zhong)細(xi)菌(jun)的濃(nong)度(du)達到(dao)103cfu/ml時,可實(shi)現對(dui)其(qi)的直接(jie)檢(jian)測,無需(xu)繁瑣的(de)增菌(jun)過程(cheng)。

4.檢(jian)測範圍(wei)廣，涵蓋(gai)了(le)對(dui)人體危害較為嚴(yan)重的17種(zhong)及(ji)腸道(dao)致病(bing)菌(jun)，可實(shi)現對(dui)臨(lin)床(chuang)樣(yang)品及(ji)其(qi)他環(huan)境取(qu)樣(yang)的快速檢(jian)測,整(zheng)個(ge)檢(jian)測過程(cheng)為3-4個(ge)小時。

5.序(xu)列(lie)資(zi)源豐(feng)富，除公布(bu)的(de)序(xu)列(lie)外(wai)，公司(si)還(hai)進(jin)行了大(da)量(liang)菌(jun)株的序(xu)列(lie)破(po)譯，從(cong)理(li)論(lun)上(shang)保證(zheng)所(suo)選引(yin)物具有良好(hao)的(de)保守性(xing)和(he)特(te)異(yi)性(xing)。

該系(xi)列試(shi)制(zhi)盒均經過大(da)量(liang)的保守性(xing)及(ji)特(te)異性(xing)實(shi)驗證(zheng),憑借公同擁有的豐(feng)富的菌(jun)種(zhong)資(zi)源，每(mei)壹種(zhong)檢(jian)測試(shi)制(zhi)盒均經過了20余種(zhong)標(biao)準菌(jun)株和臨床(chuang)菌(jun)樣(yang)的保守性(xing)驗(yan)征(zheng)及(ji)40余種(zhong)近(jin)緣(yuan)準菌(jun)株和臨床(chuang)菌(jun)株的特異性(xing)驗(yan)證(zheng)確(que)保在使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)不會出現任(ren)何(he)的假陽性(xing)及(ji)假(jia)陰性(xing)報(bao)告(gao)結果(guo)。

技術原理(li):

DNA的(de)半保留(liu)復(fu)制(zhi)是(shi)生物進(jin)化和(he)傳(chuan)代(dai)的(de)重要途徑。雙(shuang)鏈DNA在多種(zhong)酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)可(ke)以(yi)變(bian)性(xing)解(jie)鏈成(cheng)單(dan)鏈，在DNA聚合(he)酵(jiao)與(yu)啟動(dong)子(zi)的(de)參(can)與下(xia)，根(gen)據(ju)堿(jian)基互補配對(dui)原則復(fu)制(zhi)成(cheng)同樣(yang)的兩分(fen)子(zi)挎(kua)貝(bei)。

在聚合(he)酶(mei)錯式反應實(shi)驗中(zhong)發現。DNA在高溫(wen)時也可(ke)以(yi)發生變性(xing)解(jie)鏈，當(dang)溫(wen)度(du)降低後(hou)又(you)可以(yi)復(fu)性(xing)成(cheng)為(wei)雙(shuang)鏈。因(yin)此(ci)，通(tong)過溫(wen)度(du)變化(hua)控制(zhi)DNA的變性(xing)和(he)復(fu)性(xing),並設計(ji)引(yin)物做啟動(dong)子(zi),加入(ru)DNA聚合(he)酶(mei)、dNTP就(jiu)可以(yi)完成(cheng)特(te)定(ding)基因(yin)的(de)體外(wai)復(fu)制(zhi)。( DNA高溫(wen)變(bian)性(xing)低溫(wen)復(fu)性(xing))發現耐(nai)熱(re)DNA聚合(he)同酶--Taq酶對(dui)於(yu)PCR的應用(yong)有(you)裏程(cheng)碑(bei)的(de)意(yi)義(yi)，該酶(mei)可以(yi)耐(nai)受90℃以(yi)上(shang)的高溫(wen)而(er)不失活(huo)，不需(xu)要每(mei)個(ge)循環(huan)加酶(mei)，使(shi)PCR技術變(bian)得(de)非常簡(jian)捷(jie)、同時也大(da)大(da)降低了成本, PCR技術得(de)以(yi)大(da)量(liang)應用(yong),並(bing)逐步(bu)應(ying)用(yong)於(yu)臨床(chuang)。

2

特(te)點優(you)勢:

1.  特異(yi)性(xing):所(suo)有(you)產(chan)品(pin)使(shi)用(yong)的(de)引(yin)物均經過詳盡(jin)的生物信(xin)息(xi)學分(fen)析(xi),經過GenBank及(ji)自(zi)建龐大(da)數(shu)據(ju)庫的(de)比對(dui),確(que)保所(suo)用(yong)的(de)每(mei)壹條引(yin)物均為種(zhong)屬(shu)或血清型特異的基因(yin)序(xu)列(lie)區段(duan),可實(shi)現對(dui)種(zhong)屬(shu)及(ji)血清型的特異檢(jian)測,特(te)異(yi)性(xing)均達到(dao)100%。

2. 重現性(xing):該(gai)系(xi)列所(suo)有產(chan)品(pin)均經過大(da)量(liang)實(shi)驗菌(jun)株的驗證,重現性(xing)為(wei)100%。

3. 靈敏性(xing):該(gai)系(xi)列產(chan)品(pin)可(ke)實(shi)現對(dui)檢(jian)測菌(jun)的高靈(ling)敏檢(jian)測,當(dang)樣(yang)品中(zhong)的(de)濃(nong)度(du)達到(dao)103cfu/ml時,可實(shi)現對(dui)其(qi)的直接(jie)檢(jian)測,無需(xu)繁瑣的(de)增菌(jun)過程(cheng)。

4. 實(shi)用(yong)性(xing):檢(jian)測範圍(wei)廣,涵蓋(gai)了(le)對(dui)人體危害較為嚴(yan)重的17種(zhong)及(ji)腸道(dao)致病(bing)菌(jun),可實(shi)現對(dui)臨(lin)床(chuang)樣(yang)品及(ji)其(qi)他環(huan)境取(qu)樣(yang)的快速檢(jian)測,整(zheng)個(ge)檢(jian)測過程(cheng)為3-4個(ge)小時。

5. 優(you)勢1:序(xu)列(lie)資(zi)源豐(feng)富,除GenBank公布(bu)的(de)序(xu)列(lie)外(wai),公司(si)還(hai)進(jin)行了大(da)量(liang)菌(jun)株的序(xu)列(lie)破(po)譯,從(cong)理(li)論(lun)上(shang)保證(zheng)所(suo)選引(yin)物具有良好(hao)的(de)保守性(xing)和(he)特(te)異(yi)性(xing)。

6. 優(you)勢2:該系(xi)列試(shi)劑(ji)盒均經過大(da)量(liang)的保守性(xing)及(ji)特(te)異性(xing)實(shi)驗驗(yan)證(zheng),憑借公司擁(yong)有的(de)豐富的菌(jun)種(zhong)資(zi)源,每(mei)壹種(zhong)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒均經過了20余種(zhong)標(biao)準菌(jun)株和臨床(chuang)菌(jun)株的保守性(xing)驗(yan)證(zheng)及(ji)40余種(zhong)近(jin)緣(yuan)標(biao)準菌(jun)株和臨床(chuang)菌(jun)株的特異性(xing)驗(yan)證(zheng),確(que)保在使(shi)用(yong)過程(cheng)中(zhong)不會出現任(ren)何(he)的假陽性(xing)及(ji)假(jia)陰性(xing)報(bao)告(gao)結果(guo)。

腺病(bing)毒型PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒 

樣(yang)本采(cai)集、存放(fang)及(ji)運(yun)輸:

1、樣(yang)本采(cai)集:各(ge)類型樣(yang)本按(an)照常規(gui)方(fang)法采(cai)集(ji)。

2、存放(fang):樣(yang)本在2~8℃條件(jian)下(xia)保存應不超過72h,-70℃以(yi)下(xia)可(ke)長(chang)期(qi)保存,但(dan)應避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(zui多(duo)凍(dong)融3次(ci))。

3、運(yun)輸:采(cai)用(yong)泡沫箱(xiang)加冰(bing)密封進(jin)行運(yun)輸。

使(shi)用(yong)方(fang)法:

註:所(suo)有試劑(ji)使(shi)用(yong)前需(xu)解(jie)凍(dong),混合(he)均勻,6,000rpm離(li)心(xin)數(shu)秒後(hou)使(shi)用(yong)。

1. 樣(yang)本處(chu)理(li)(樣(yang)本處(chu)理(li)區)

待檢(jian)樣(yang)本的(de)核酸(suan)提取(qu)可(ke)采(cai)用(yong)病(bing)毒RNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒或自(zi)動(dong)化核(he)酸(suan)提取(qu)儀(yi)等,具體提取(qu)方(fang)法請(qing)參(can)照相關說明書(shu)。陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)及(ji)陰(yin)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)無需(xu)提取(qu),可(ke)直接(jie)使(shi)用(yong)。

2. 擴(kuo)增試劑(ji)準備(bei)(PCR前準備(bei)區)

取(qu)N個(ge)(N=陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)+待檢(jian)樣(yang)本+陽(yang)性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin))PCR反(fan)應管(guan),每(mei)管(guan)分(fen)別加入(ru)FMD RT-PCR反(fan)應(ying)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也(ye)可根據(ju)每(mei)頭(tou)份用(yong)量(liang)計(ji)算(suan)N+1份(fen)FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶(mei)所(suo)需(xu)總量(liang),兩者(zhe)混(hun)勻離(li)心(xin)後(hou)分(fen)裝(zhuang)20 μl至單(dan)個(ge)PCR反應管(guan))。

組(zu)分每(mei)頭(tou)份用(yong)量(liang)FMD  RT-PCR反應液(ye)19 μlRT-PCR酶(mei)。

1 .將所(suo)有(you)PCR反應(ying)管(guan)於(yu)6,000rpm離(li)心(xin)30s,轉(zhuan)移至樣(yang)本處(chu)理(li)區。

2.加樣(yang)(樣(yang)本處(chu)理(li)區)

3.在上(shang)述的PCR反(fan)應(ying)管(guan)中(zhong)分(fen)別(bie)加入(ru)待檢(jian)樣(yang)本RNA提取(qu)物、陰性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)和(he)陽性(xing)質(zhi)控(kong)品(pin)各(ge)5 μl,蓋(gai)緊(jin)管(guan)蓋(gai),於(yu)6,000rpm離(li)心(xin)10s,轉(zhuan)移至擴增區。

組成(cheng)及(ji)試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi):

1、 酶(mei)標(biao)板:壹塊(96孔)

2、 標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品): 2瓶(ping),請臨(lin)用(yong)前15分鐘內配制(zhi)。每(mei)瓶(ping)以(yi)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋至(zhi)0.5ml,蓋(gai)好(hao)後(hou)室(shi)溫(wen)靜(jing)置大(da)約10分(fen)鐘,同時反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助溶(rong)解(jie),其(qi)濃度(du)為200 U/L,然(ran)後(hou)做(zuo)系(xi)列倍(bei)比稀(xi)釋(註(zhu):不要直接(jie)在板中(zhong)進(jin)行倍(bei)比稀(xi)釋),分(fen)別(bie)配(pei)制(zhi)成(cheng)200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)直接(jie)作(zuo)為(wei)空(kong)白孔 0 U/L。如(ru)配(pei)制(zhi)100 U/L標(biao)準品(pin):取(qu)0.3ml (不要少(shao)於(yu)0.3ml )200 U/L的(de)上(shang)述標(biao)準品(pin)加入(ru)含(han)有(you)0.3ml樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)的(de)Eppendorf管(guan)中(zhong),（加產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)）混(hun)勻即(ji)可(ke),其余濃(nong)度(du)以(yi)此(ci)類推(tui)。

3、 樣(yang)品稀(xi)釋液(ye):1×20ml。

4、 檢(jian)測稀(xi)釋液(ye)A:1×10ml。

5、 檢(jian)測稀(xi)釋液(ye)B:1×10ml。

PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒特點:

1.即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶(hu)只需(xu)要提供病(bing)毒樣(yang)品。

2.根據(ju)高腦(nao)脊(ji)譴(譴)炎病(bing)毒RT-保守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物, 與相(xiang)關病(bing)毒無交叉(cha)反(fan)應。

3.靈(ling)敏度(du)可以(yi)達到(dao)幾百拷貝/反(fan)應(ying)。

4.-管(guan) 式(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR檢(jian)測,避(bi)免(mian)後(hou)續汙染。

5.本試劑(ji)盒足夠(gou)50次(ci)20μL反應體系(xi)的熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR。

本產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan),不能用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

運(yun)輸及(ji)保存:

低溫(wen)運(yun)輸.-20°C保存,保存期(qi)限壹年。

註(zhu)意事(shi)項(xiang):

1. 建議使(shi)用(yong)新(xin)鮮采取(qu)的(de)動(dong)物組織(zhi)，若為冷凍(dong)組織(zhi)，應(ying)盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融，否(fou)則(ze)會導致(zhi)模板的降(jiang)解(jie)，影(ying)響(xiang)PCR效(xiao)率。

2. 試劑(ji)Buffer AL若低溫(wen)保存，易產(chan)生沈澱(dian)。在使(shi)用(yong)前務必將(jiang)其(qi)在室(shi)溫(wen)中(zhong)放(fang)置(zhi)壹段(duan)時間，也(ye)可(ke)在37℃水(shui)浴中(zhong)預熱(re)10 min，以(yi)溶(rong)解(jie)沈(chen)澱(dian)，混勻後(hou)再(zai)使(shi)用(yong)。

3. 電(dian)泳檢(jian)測時，切勿(wu)使(shi)用(yong)含(han)有SDS的Loading Buffer。否(fou)則(ze)，電(dian)泳時會在泳道(dao)中(zhong)出(chu)現壹大(da)團拖(tuo)尾(wei)亮(liang)帶，影(ying)響(xiang)實(shi)驗結(jie)果(guo)。

4. 建議擴(kuo)增片段(duan)長度(du)1 kb以(yi)內，以(yi)便擴增效(xiao)率佳。

5. 為了(le)您的安全和健(jian)康(kang)，請穿(chuan)實(shi)驗服並佩(pei)戴(dai)壹次性(xing)手(shou)套操作(zuo)。