大豆疫黴菌

大豆疫黴菌

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實(shi)驗(yan)內容(rong):

1.稱量(liang)>溶(rong)化→調(tiao)pH >)過濾(lv)>分(fen)裝>加(jia)塞(sai)>包(bao)紮(zha)>滅(mie)菌>無(wu)菌檢查(zha)

2.幹(gan)熱滅(mie)菌:裝(zhuang)入待滅(mie)菌物品升(sheng)溫>恒溫>降溫>開(kai)箱(xiang)取(qu)物

3.高壓(ya)蒸(zheng)汽滅(mie)菌加(jia)水(shui)>裝(zhuang)物品>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱(re)>排冷空氣(qi)+加(jia)壓(ya)>恒壓(ya)>降壓(ya)回零(ling)》排汽(qi)>取(qu)物. >無(wu)菌檢查(zha)

4.過濾(lv)除菌:組(zu)裝滅(mie)菌>連接→壓(ya)濾(lv)>無(wu)菌檢查(zha)>清洗(xi)滅(mie)菌

低溫存(cun)法(fa):

公(gong)司產(chan)品僅(jin)用於科(ke)研(yan)

①簡(jian)單(dan)保存(cun)法(fa),將瓊脂(zhi)斜面(mian)孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang)物、菌絲懸浮(fu)液以(yi)及由麩(fu)皮(pi)、大米(mi)、小(xiao)米等谷(gu)物原料制成(cheng)的(de)孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang)物置(zhi)於4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保存(cun)時(shi)間(jian)不(bu)超過1 ~2個月(yue)，若將谷(gu)物原料制備的(de)孢(bao)子(zi)瓶抽真(zhen)空(kong)並在棉塞(sai)上(shang)浸(jin)蠟(la),以隔絕外(wai)界空(kong)氣(qi)和水汽(qi),保持時(shi)間(jian)可達3~ 4個月(yue);②液(ye)氮(dan)超di溫保存(cun)法(fa),將生長穩定(ding)期懸浮(fu)在10%甘油(you)或(huo)其(qi)他低(di)冰(bing)點(dian)液體中(zhong),密(mi)封於安(an)瓿(bu)管內(nei)，然後控制(zhi)冷卻速度(du),使(shi)安(an)瓿(bu)管溫度(du)逐(zhu)步下降至(zhi)-35℃時(shi)， 即可置(zhi)於-150 ~-196℃的(de)液(ye)氮(dan)罐中(zhong)保存(cun)。大(da)多數微(wei)生(sheng)物如病(bing)毒、噬(shi)菌體、多(duo)種(zhong)細菌、放線(xian)菌、酵(jiao)母和原蟲(chong)、特別(bie)是(shi)壹(yi)些用冷凍幹(gan)燥法(fa)有困(kun)難(nan)的(de)微(wei)生(sheng)物,都(dou)可用此(ci)法(fa)長期(qi)保存(cun)。

微(wei)生(sheng)物菌種的(de)培(pei)養(yang):

大(da)豆疫黴菌

1孢子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)放線(xian)菌孢子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

壹般采用瓊脂(zhi)斜面(mian)培(pei)養(yang)基(ji),培養(yang)基(ji)中(zhong)含(han)有壹(yi)些適合產(chan)孢子(zi)的(de)營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen),如麩皮、豌豆浸(jin)汁、蛋(dan)白腖(dong)和壹些無(wu)機(ji)鹽(yan)等(deng)。碳(tan)源和氮(dan)源(yuan)不(bu)要太(tai)豐富（碳(tan)源約(yue)為1%,氮(dan)源(yuan)不(bu)超過0.5%),碳(tan)源豐富容(rong)易造(zao)成(cheng)生理(li)酸(suan)性的(de)營(ying)養(yang)環境,不(bu)利(li)於放(fang)線菌孢子(zi)的(de)形(xing)成(cheng)，氮(dan)源(yuan)豐富則(ze)有利(li)於菌絲繁(fan)殖而(er)不(bu)利(li)於孢(bao)子(zi)形(xing)成(cheng)。壹般(ban)情(qing)況下(xia)， 幹(gan)燥和限(xian)制(zhi)營養(yang)可直接(jie)或(huo)間(jian)接誘(you)導孢子(zi)形(xing)成(cheng)。放線(xian)菌斜面(mian)的(de)培(pei)

養(yang)溫度(du)大多(duo)數(shu)為28℃,少(shao)數為37 ℃,培養(yang)時(shi)間(jian)為5~ 14天(tian)。

(2)黴菌孢子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

黴菌的(de)孢(bao)子(zi)培(pei)養(yang),壹般以大米(mi)、 小(xiao)米、玉(yu)米(mi)、麩皮、麥(mai)粒等天(tian)然農(nong)產(chan)品為培(pei)養(yang)基(ji)。這是(shi)由(you)於這(zhe)些農產(chan)品中(zhong)的(de)營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen)較適合黴菌的(de)孢(bao)子(zi)繁(fan)殖，而(er)且(qie)這(zhe)類(lei)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)表面積(ji)較大(da)，可獲得大量(liang)的(de)孢(bao)子(zi)。黴菌的(de)培(pei)養(yang)-般為25~ 28 ℃,培(pei)養(yang)時(shi)間(jian)為4~ 14天(tian)。

2種子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)搖瓶種(zhong)子(zi)制(zhi)備(bei)

搖瓶種(zhong)子(zi)進罐,常(chang)采用母瓶、子(zi)瓶兩(liang)級培養(yang),有時(shi)母(mu)瓶種(zhong)子(zi)也可以直接(jie)進罐。種子(zi)培(pei)養(yang)基(ji)要求(qiu)比較豐富,並易被(bei)菌體分(fen)解(jie)利(li)用，氮(dan)源(yuan)豐富有利(li)於菌絲生(sheng)長(chang)。原則(ze)上(shang)各(ge)種營(ying)養(yang)成(cheng)分(fen)不(bu)宜過濃(nong),子(zi)瓶培(pei)養(yang)基(ji)濃(nong)度(du)比母(mu)瓶略(lve)高,更(geng)接近(jin)種子(zi)罐的(de)培(pei)養(yang)基(ji)配方。

(2)種(zhong)子(zi)罐種子(zi)制(zhi)備(bei)

種子(zi)罐種子(zi)制(zhi)備(bei)的(de)工(gong)藝過程,因(yin)菌種不(bu)同(tong)而(er)異(yi)，壹般可分(fen)為壹級種子(zi)、 二級種子(zi)和三級種子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)。孢(bao)子(zi)(或(huo)搖(yao)瓶菌絲)被接入(ru)到體積(ji)較小(xiao)的(de)種(zhong)子(zi)罐中(zhong),經培養(yang)後形(xing)成(cheng)大量(liang)的(de)菌絲，這(zhe)樣的(de)種(zhong)子(zi)稱(cheng)為壹(yi)級種子(zi)， 把(ba)壹(yi)級種子(zi)轉(zhuan)入(ru)發酵(jiao)罐內發酵(jiao)，稱為二級發酵(jiao)。如果(guo)將壹級種子(zi)接(jie)入(ru)體(ti)積(ji)較大(da)的(de)種(zhong)子(zi)罐內,經過培養(yang)形(xing)成(cheng)更多(duo)的(de)菌絲,這樣制備的(de)種(zhong)子(zi)稱(cheng)為二級種子(zi)，將二級種子(zi)轉(zhuan)入(ru)發酵(jiao)罐內發酵(jiao)稱為三(san)級發酵(jiao)。同(tong)樣道(dao)理(li),使(shi)用三級種子(zi)的(de)發酵(jiao),稱(cheng)為四級發酵(jiao)。

脫水存(cun)法(fa):

①沙土保存(cun)法(fa),能產(chan)孢子(zi)的(de)細(xi)菌、放線(xian)菌及黴菌可采用此(ci)法(fa)保存(cun)，即將沙和土以3:2比(bi)例(li)混合(he)經稀(xi)酸(suan)處理(li)洗(xi)凈(jing)過篩,裝(zhuang)入(ru)小(xiao)試管內(nei)裝置(zhi)高度(du)為1cm滅(mie)菌2~ 3次,烘(hong)幹(gan)後即(ji)可將在斜面培養(yang)基(ji)上(shang)生長良(liang)好的(de)孢(bao)子(zi),用無(wu)菌蒸(zheng)餾水2~ 2.5m制成(cheng)孢子(zi)懸液(ye)，吸取(qu)少(shao)許加(jia)入(ru)沙土管中(zhong),經真(zhen)空(kong)抽幹(gan),外(wai)觀呈(cheng)松(song)散(san)狀態(tai),於4℃冰(bing)箱(xiang)保存(cun),保存(cun)期(qi)可達5 ~7年。

②冷凍幹(gan)燥法(fa),將孢子(zi)懸浮(fu)液與(yu)保護劑(ji)相(xiang)混(hun)合, 放(fang)在安瓿(bu)管內(nei)於-20 -30℃的(de)乙(yi)醇(chun)浴(yu)中(zhong)速凍。然後(hou),在低溫下(xia)用真(zhen)空(kong)泵抽幹(gan),用幹(gan)冰(bing)使(shi)水(shui)汽結凍(dong),熔(rong)封安(an)瓿(bu)管,於低(di)溫下(xia)保存(cun)。保存(cun)期(qi)可達5~ 10年之久(jiu)。

③石(shi)蠟(la)油封存(cun)法(fa),在斜面菌種培(pei)養(yang)物上(shang),倒上(shang)滅(mie)菌後的(de)石(shi)蠟(la)油,高出斜面(mian)1cm,於4℃冰(bing)箱(xiang)或(huo)低(di)溫幹(gan)燥處保存(cun)，此(ci)法(fa)不(bu)適用於能(neng)利(li)用石蠟(la)油作碳(tan)源的(de)微(wei)生(sheng)物，保存(cun)期(qi)為壹年以上(shang)。

菌種的(de)具體(ti)保存(cun)方法(fa)

   微(wei)生(sheng)物具有(you)容(rong)易變異(yi)的(de)特(te)性，因(yin)此(ci)，在保藏過程中(zhong)，必須使(shi)微(wei)生(sheng)物的(de)代謝(xie)處於不(bu)活躍(yue)或相(xiang)對(dui)靜止的(de)狀(zhuang)態(tai)，才(cai)能(neng)在壹定的(de)時(shi)間(jian)內使(shi)其(qi)不(bu)發生變異(yi)而(er)又保持生(sheng)活能(neng)力(li)。

低(di)溫、幹(gan)燥和隔絕空氣(qi)是(shi)使(shi)微(wei)生(sheng)物代謝(xie)能(neng)力(li)降低(di)的(de)重(zhong)要因(yin)素，所(suo)以(yi)，菌種保藏方法(fa)雖多(duo)，但(dan)都(dou)是(shi)根(gen)據(ju)這(zhe)三(san)個(ge)因(yin)素而(er)設計的(de)。

菌種保藏方法(fa)大致(zhi)可分(fen)為以(yi)下幾(ji)種(zhong)：

1．傳(chuan)代培(pei)養(yang)保藏法(fa)又有(you)斜面(mian)培養(yang)、穿刺培養(yang)、皰肉(rou)培(pei)養(yang)基(ji)培養(yang)等（後者作(zuo)保藏厭氧(yang)細菌用），培養(yang)後於4—6℃冰(bing)箱(xiang)內(nei)保存(cun)。

2．覆蓋(gai)保藏法(fa)是(shi)傳(chuan)代培(pei)養(yang)的(de)變相(xiang)方法(fa)，能夠(gou)適當延長(chang)保藏時(shi)間(jian)，它(ta)是(shi)在斜面培養(yang)物和穿刺(ci)培養(yang)物上(shang)面覆蓋(gai)滅(mie)菌，壹方面可防止因(yin)培(pei)養(yang)基(ji)水分(fen)蒸(zheng)發而(er)引(yin)起(qi)菌種死(si)亡，另(ling)壹方面可阻止氧(yang)氣(qi)進入，以減弱(ruo)代謝(xie)作(zuo)用。

   載(zai)體(ti)保藏法(fa)是(shi)將微(wei)生(sheng)物吸附(fu)在適當的(de)載(zai)體(ti)，如(ru)土壤、沙子(zi)、矽(gui)膠(jiao)、濾(lv)紙(zhi)上(shang)，而(er)後進行幹(gan)燥的(de)保藏法(fa)，例(li)如沙(sha)土保藏法(fa)和濾(lv)紙(zhi)保藏法(fa)應用相(xiang)當(dang)廣(guang)泛(fan)。

   寄主保藏法(fa)用於目(mu)前尚不(bu)能在人工(gong)培養(yang)基(ji)上(shang)生長的(de)微(wei)生(sheng)物，如病(bing)毒、立克(ke)次氏體(ti)、螺(luo)旋(xuan)體等(deng)，它(ta)們(men)必須(xu)在生活的(de)動(dong)物、昆蟲(chong)、雞胚(pei)內感(gan)染並(bing)傳(chuan)代，此(ci)法(fa)相(xiang)當(dang)於壹(yi)般微(wei)生(sheng)物的(de)傳(chuan)代培(pei)養(yang)保藏法(fa)。病毒等微(wei)生(sheng)物亦(yi)可用其他方法(fa)如液(ye)氮(dan)保藏法(fa)與冷凍幹(gan)燥保藏法(fa)進行保藏。

5．冷凍保藏法(fa)可分(fen)低溫冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹(gan)冰(bing)酒(jiu)精(jing)快速凍(dong)結(jie)（約(yue)-70℃）和液氮(dan)（-196℃）等(deng)保藏法(fa)。

冷凍幹(gan)燥保藏法(fa)先使(shi)微(wei)生(sheng)物在極低溫度(du)（-70℃左(zuo)右(you)）下(xia)快速冷凍，然(ran)後在減壓(ya)下利(li)用升(sheng)華現象除去水(shui)分(fen)（真(zhen)空(kong)幹(gan)燥）。

我司在重(zhong)視產(chan)品質量(liang)的(de)同(tong)時(shi)，也建(jian)立了壹(yi)套(tao)集(ji)技(ji)術(shu)支持(chi)、物流、售後(hou)服務(wu)等(deng)多(duo)個(ge)部門的(de)服(fu)務(wu)體(ti)系(xi)，努力(li)把我們(men)方便、快捷(jie)、周到的(de)服(fu)務(wu)提(ti)供給每壹個(ge)客(ke)戶。