白(bai)色鏈黴菌

白色(se)鏈黴菌

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實(shi)驗(yan)內容(rong):

1.稱(cheng)量>溶(rong)化→調pH >)過(guo)濾(lv)>分裝(zhuang)>加(jia)塞(sai)>包(bao)紮>滅(mie)菌>無(wu)菌(jun)檢查

2.幹(gan)熱(re)滅(mie)菌:裝(zhuang)入(ru)待(dai)滅(mie)菌物(wu)品(pin)升溫>恒溫>降(jiang)溫>開(kai)箱(xiang)取(qu)物(wu)

3.高(gao)壓蒸汽(qi)滅(mie)菌加(jia)水(shui)>裝(zhuang)物(wu)品(pin)>加(jia)蓋(gai)>加(jia)熱>排冷空氣(qi)+加(jia)壓>恒壓>降(jiang)壓回零》排汽(qi)>取(qu)物(wu). >無(wu)菌(jun)檢查

4.過(guo)濾(lv)除菌:組(zu)裝(zhuang)滅(mie)菌>連(lian)接(jie)→壓(ya)濾(lv)>無(wu)菌(jun)檢查>清(qing)洗滅(mie)菌

低溫存法(fa):

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)用於科(ke)研

①簡(jian)單保(bao)存法(fa),將(jiang)瓊脂斜面孢(bao)子(zi)培養(yang)物、菌絲(si)懸(xuan)浮液以及(ji)由麩(fu)皮(pi)、大米、小米等(deng)谷(gu)物(wu)原料(liao)制成的(de)孢(bao)子(zi)培養(yang)物置於4℃冰(bing)箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存時(shi)間(jian)不超過1 ~2個月(yue)，若(ruo)將谷(gu)物(wu)原料(liao)制備(bei)的(de)孢(bao)子(zi)瓶(ping)抽(chou)真(zhen)空並在(zai)棉塞(sai)上浸蠟,以(yi)隔絕(jue)外(wai)界(jie)空氣(qi)和(he)水(shui)汽(qi),保(bao)持時(shi)間(jian)可(ke)達3~ 4個月(yue);②液氮超di溫保(bao)存法(fa),將(jiang)生(sheng)長穩(wen)定(ding)期懸浮在10%甘(gan)油(you)或其他(ta)低冰(bing)點液體(ti)中,密(mi)封(feng)於安(an)瓿(bu)管內，然(ran)後控(kong)制(zhi)冷卻(que)速度,使(shi)安(an)瓿(bu)管溫度逐步下降(jiang)至-35℃時(shi)， 即(ji)可(ke)置於-150 ~-196℃的(de)液氮罐(guan)中保(bao)存。大多(duo)數(shu)微生(sheng)物(wu)如病(bing)毒(du)、噬菌體(ti)、多(duo)種細(xi)菌(jun)、放(fang)線菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和(he)原蟲、特(te)別是(shi)壹些用冷凍幹(gan)燥(zao)法(fa)有(you)困難(nan)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu),都可(ke)用此(ci)法(fa)長期(qi)保(bao)存。

微(wei)生(sheng)物(wu)菌(jun)種的(de)培養(yang):

白(bai)色(se)鏈黴菌

1孢(bao)子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)放(fang)線菌(jun)孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

壹般(ban)采(cai)用(yong)瓊(qiong)脂斜面培養(yang)基,培養(yang)基中含有(you)壹些適合(he)產孢(bao)子(zi)的(de)營(ying)養(yang)成分,如麩(fu)皮(pi)、豌(wan)豆(dou)浸(jin)汁、蛋(dan)白(bai)腖和(he)壹些無(wu)機鹽等。碳源(yuan)和(he)氮源(yuan)不要(yao)太豐(feng)富（碳源(yuan)約為1%,氮源(yuan)不超過0.5%),碳源(yuan)豐(feng)富容易(yi)造(zao)成生(sheng)理(li)酸性的(de)營(ying)養(yang)環境(jing),不利(li)於放線菌(jun)孢(bao)子(zi)的(de)形(xing)成，氮源(yuan)豐(feng)富則(ze)有(you)利於菌絲繁殖(zhi)而不利(li)於孢(bao)子(zi)形(xing)成。壹般(ban)情(qing)況(kuang)下， 幹(gan)燥(zao)和(he)限(xian)制營(ying)養(yang)可(ke)直(zhi)接(jie)或間(jian)接(jie)誘(you)導孢(bao)子(zi)形(xing)成。放(fang)線菌(jun)斜面的(de)培

養(yang)溫度大多(duo)數(shu)為28℃,少數(shu)為37 ℃,培養(yang)時間(jian)為(wei)5~ 14天。

(2)黴菌孢(bao)子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)

黴菌的(de)孢(bao)子(zi)培養(yang),壹般(ban)以(yi)大米、 小米、玉(yu)米、麩(fu)皮(pi)、麥粒(li)等(deng)天然(ran)農產品(pin)為(wei)培養(yang)基。這是(shi)由於這些農產品(pin)中的(de)營(ying)養(yang)成分較適(shi)合(he)黴菌的(de)孢(bao)子(zi)繁殖(zhi)，而且(qie)這(zhe)類培養(yang)基的(de)表面積(ji)較大，可(ke)獲(huo)得大量的(de)孢(bao)子(zi)。黴菌的(de)培養(yang)-般(ban)為(wei)25~ 28 ℃,培養(yang)時間(jian)為(wei)4~ 14天。

2種子(zi)制(zhi)備(bei)

(1)搖(yao)瓶種子(zi)制(zhi)備(bei)

搖(yao)瓶種子(zi)進罐(guan),常(chang)采(cai)用(yong)母(mu)瓶、子(zi)瓶(ping)兩級(ji)培養(yang),有(you)時母(mu)瓶種子(zi)也可(ke)以直(zhi)接(jie)進罐(guan)。種子(zi)培養(yang)基要求比較豐(feng)富,並易(yi)被(bei)菌體(ti)分解利(li)用，氮源(yuan)豐(feng)富有(you)利於菌絲生(sheng)長。原則(ze)上各(ge)種營(ying)養(yang)成分不宜(yi)過濃(nong),子(zi)瓶(ping)培養(yang)基濃(nong)度比母(mu)瓶略(lve)高,更(geng)接(jie)近(jin)種子(zi)罐(guan)的(de)培養(yang)基配方。

(2)種子(zi)罐(guan)種子(zi)制(zhi)備(bei)

種子(zi)罐(guan)種子(zi)制(zhi)備(bei)的(de)工(gong)藝(yi)過程,因(yin)菌種不同(tong)而異(yi)，壹般(ban)可(ke)分為壹級(ji)種子(zi)、 二級(ji)種子(zi)和(he)三(san)級(ji)種子(zi)的(de)制(zhi)備(bei)。孢(bao)子(zi)(或搖瓶(ping)菌(jun)絲)被(bei)接入(ru)到(dao)體(ti)積(ji)較小的(de)種子(zi)罐(guan)中,經培養(yang)後形(xing)成大量的(de)菌(jun)絲，這樣的(de)種子(zi)稱(cheng)為壹級(ji)種子(zi)， 把(ba)壹級(ji)種子(zi)轉(zhuan)入(ru)發酵(jiao)罐(guan)內發酵(jiao)，稱(cheng)為二級(ji)發酵(jiao)。如果(guo)將(jiang)壹級(ji)種子(zi)接(jie)入(ru)體(ti)積(ji)較大的(de)種子(zi)罐(guan)內,經過(guo)培養(yang)形成更(geng)多(duo)的(de)菌(jun)絲,這(zhe)樣制備(bei)的(de)種子(zi)稱(cheng)為二級(ji)種子(zi)，將(jiang)二級(ji)種子(zi)轉(zhuan)入(ru)發酵(jiao)罐(guan)內發酵(jiao)稱(cheng)為三(san)級(ji)發酵(jiao)。同(tong)樣道理(li),使(shi)用三(san)級(ji)種子(zi)的(de)發酵(jiao),稱(cheng)為四級(ji)發酵(jiao)。

脫水(shui)存(cun)法(fa):

①沙土(tu)保(bao)存法(fa),能(neng)產孢(bao)子(zi)的(de)細(xi)菌(jun)、放(fang)線菌(jun)及(ji)黴菌可(ke)采(cai)用(yong)此(ci)法(fa)保(bao)存，即(ji)將沙和(he)土以(yi)3:2比例(li)混(hun)合(he)經稀(xi)酸處(chu)理(li)洗凈過篩(shai),裝(zhuang)入(ru)小試(shi)管內裝(zhuang)置(zhi)高(gao)度(du)為1cm滅(mie)菌2~ 3次(ci),烘(hong)幹(gan)後即(ji)可(ke)將在(zai)斜面培養(yang)基上生(sheng)長良(liang)好的(de)孢(bao)子(zi),用(yong)無(wu)菌(jun)蒸餾水(shui)2~ 2.5m制(zhi)成孢(bao)子(zi)懸(xuan)液，吸取(qu)少許加(jia)入(ru)沙土(tu)管中,經真(zhen)空(kong)抽(chou)幹(gan),外(wai)觀呈(cheng)松散(san)狀(zhuang)態(tai),於4℃冰(bing)箱(xiang)保(bao)存,保(bao)存期(qi)可(ke)達5 ~7年。

②冷凍幹(gan)燥(zao)法(fa),將(jiang)孢(bao)子(zi)懸(xuan)浮液與保(bao)護(hu)劑相混(hun)合(he), 放(fang)在安(an)瓿(bu)管內於-20 -30℃的(de)乙(yi)醇(chun)浴(yu)中速凍。然(ran)後,在(zai)低溫下用(yong)真空(kong)泵(beng)抽(chou)幹(gan),用(yong)幹(gan)冰(bing)使水(shui)汽(qi)結(jie)凍,熔(rong)封(feng)安(an)瓿(bu)管,於低溫下保(bao)存。保(bao)存期(qi)可(ke)達5~ 10年之(zhi)久。

③石(shi)蠟油(you)封(feng)存(cun)法(fa),在(zai)斜面菌種培養(yang)物上,倒(dao)上滅(mie)菌後的(de)石(shi)蠟油(you),高(gao)出(chu)斜面1cm,於4℃冰(bing)箱(xiang)或低溫幹(gan)燥(zao)處(chu)保(bao)存，此(ci)法(fa)不適(shi)用於能利用石(shi)蠟油(you)作碳源(yuan)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)，保(bao)存期(qi)為(wei)壹年以上。

菌(jun)種的(de)具(ju)體(ti)保(bao)存方法(fa)

   微(wei)生(sheng)物(wu)具(ju)有(you)容易(yi)變(bian)異的(de)特(te)性，因(yin)此(ci)，在(zai)保(bao)藏(zang)過程中，必須(xu)使(shi)微生(sheng)物(wu)的(de)代(dai)謝處(chu)於不活(huo)躍或相對(dui)靜止的(de)狀(zhuang)態(tai)，才(cai)能在(zai)壹定(ding)的(de)時(shi)間(jian)內使(shi)其不發生(sheng)變(bian)異(yi)而又保(bao)持生(sheng)活(huo)能力。

低溫、幹(gan)燥(zao)和(he)隔絕(jue)空(kong)氣(qi)是(shi)使微生(sheng)物(wu)代(dai)謝能力(li)降低的(de)重(zhong)要因素，所(suo)以(yi)，菌(jun)種保(bao)藏(zang)方法(fa)雖(sui)多(duo)，但都是(shi)根據這三(san)個因(yin)素(su)而設(she)計(ji)的(de)。

菌(jun)種保(bao)藏(zang)方法(fa)大致可(ke)分為以(yi)下幾(ji)種：

1．傳(chuan)代培養(yang)保(bao)藏(zang)法(fa)又有(you)斜面培養(yang)、穿刺(ci)培養(yang)、皰肉(rou)培養(yang)基培養(yang)等（後者(zhe)作保(bao)藏(zang)厭氧(yang)細(xi)菌(jun)用(yong)），培養(yang)後於4—6℃冰(bing)箱(xiang)內保(bao)存。

2．覆(fu)蓋(gai)保(bao)藏(zang)法(fa)是(shi)傳代培養(yang)的(de)變(bian)相方法(fa)，能夠(gou)適(shi)當延(yan)長保(bao)藏(zang)時間(jian)，它(ta)是(shi)在斜面培養(yang)物和(he)穿刺(ci)培養(yang)物上面覆(fu)蓋(gai)滅(mie)菌，壹方面可(ke)防止因培養(yang)基水(shui)分蒸發而引起菌種死(si)亡(wang)，另壹方面可(ke)阻止氧氣(qi)進入(ru)，以(yi)減弱(ruo)代謝作用。

   載(zai)體(ti)保(bao)藏(zang)法(fa)是(shi)將微生(sheng)物(wu)吸(xi)附(fu)在適(shi)當(dang)的(de)載(zai)體(ti)，如土(tu)壤(rang)、沙子(zi)、矽(gui)膠(jiao)、濾(lv)紙(zhi)上(shang)，而後進行幹(gan)燥(zao)的(de)保(bao)藏(zang)法(fa)，例(li)如沙土(tu)保(bao)藏(zang)法(fa)和(he)濾(lv)紙(zhi)保(bao)藏(zang)法(fa)應用(yong)相當(dang)廣泛。

   寄(ji)主保(bao)藏(zang)法(fa)用於目(mu)前(qian)尚(shang)不能(neng)在人工(gong)培養(yang)基上生(sheng)長的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)，如病(bing)毒(du)、立(li)克次(ci)氏體(ti)、螺(luo)旋(xuan)體(ti)等(deng)，它們必(bi)須(xu)在(zai)生(sheng)活(huo)的(de)動(dong)物、昆蟲、雞(ji)胚(pei)內感(gan)染並傳(chuan)代(dai)，此(ci)法(fa)相當(dang)於壹般(ban)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)傳(chuan)代培養(yang)保(bao)藏(zang)法(fa)。病(bing)毒(du)等微生(sheng)物(wu)亦(yi)可(ke)用其他(ta)方法(fa)如液氮保(bao)藏(zang)法(fa)與冷凍幹(gan)燥(zao)保(bao)藏(zang)法(fa)進行保(bao)藏(zang)。

5．冷凍保(bao)藏(zang)法(fa)可(ke)分低溫冰(bing)箱(xiang)（-20—-30℃，-50—-80℃）、幹(gan)冰(bing)酒精(jing)快(kuai)速凍結(jie)（約-70℃）和(he)液氮（-196℃）等(deng)保(bao)藏(zang)法(fa)。

冷凍幹(gan)燥(zao)保(bao)藏(zang)法(fa)先使微(wei)生(sheng)物(wu)在(zai)極低溫度（-70℃左右）下快(kuai)速冷凍，然(ran)後在(zai)減(jian)壓下利(li)用升華(hua)現象除去(qu)水(shui)分（真空(kong)幹(gan)燥(zao)）。

我(wo)司在重(zhong)視(shi)產(chan)品質(zhi)量(liang)的(de)同(tong)時，也建(jian)立(li)了壹套(tao)集技(ji)術支(zhi)持、物(wu)流、售(shou)後服(fu)務(wu)等多(duo)個部門的(de)服(fu)務(wu)體(ti)系，努(nu)力把我們方便、快(kuai)捷(jie)、周(zhou)到的(de)服(fu)務(wu)提(ti)供(gong)給每壹個客(ke)戶(hu)。