土(tu)壤(rang)脫(tuo)氫酶(DHO)elisa檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

土(tu)壤(rang)脫(tuo)氫酶(DHO)elisa檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

我司(si)產品齊(qi)全，因(yin)上架(jia)數(shu)量有限，未(wei)能(neng)全(quan)部上架(jia)，如需(xu)訂購或(huo)者產品詳(xiang)情請(qing)直接聯系我司(si)銷(xiao)售(shou)！

ELISA法(fa)是免(mian)疫(yi)診斷(duan)中(zhong)的(de)壹項新技術(shu)，現(xian)已(yi)成(cheng)功地應用於(yu)多(duo)種(zhong)病(bing)原(yuan)微(wei)生物(wu)所(suo)引起(qi)的傳染(ran)病(bing)、寄生(sheng)蟲(chong)病(bing)及(ji)非傳染(ran)病(bing)等方面(mian)的免(mian)疫(yi)診斷(duan)。也已(yi)應(ying)用於(yu)大(da)分子(zi)抗原(yuan)和小(xiao)分子(zi)抗原(yuan)的(de)定量測(ce)定，根據已(yi)經(jing)使(shi)用的結(jie)果，認(ren)為(wei)ELISA法(fa)具有靈敏、特(te)異、簡單(dan)、快(kuai)速(su)、穩定及易(yi)於(yu)自(zi)動化操(cao)作(zuo)等特(te)點(dian)。不(bu)僅適用於(yu)臨床標本(ben)的檢(jian)查(zha)，而(er)且(qie)由於(yu)壹天(tian)之內可(ke)以檢查幾百甚(shen)至上千(qian)份(fen)標本(ben),因(yin)此，也適合於(yu)血(xue)清流行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查。本法(fa)不(bu)僅可(ke)以用來測(ce)定抗(kang)ti，而(er)且(qie)也可(ke)用於(yu)測(ce)定體液中(zhong)的(de)循環抗原(yuan)，所(suo)以也是壹種(zhong)早(zao)期診(zhen)斷(duan)的(de)良好方(fang)法(fa)。因(yin)此ELISA法(fa)在生物(wu)醫學(xue)各(ge)領(ling)域的應(ying)用範圍日益(yi)擴(kuo)大，

組(zu)成(cheng)結構

1、血(xue)清：操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞刺(ci)激。使用不(bu)含熱(re)原(yuan)和內du素(su)的(de)試管。收(shou)集(ji)血(xue)液後(hou)，1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地分離。

2、2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬suan鹽、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可(ke)用於(yu)檢(jian)測(ce)。1000×g離心(xin)30分鐘(zhong)去除顆粒(li)。

3、細(xi)胞上清液：1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)去除顆粒(li)和聚合物(wu)。

4、組織勻漿(jiang)：將(jiang)組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)，取(qu)上清液。

5、保(bao)存：如果樣(yang)品不(bu)立(li)即使(shi)用，應將(jiang)其分成(cheng)小(xiao)部(bu)分-70℃保(bao)存，避(bi)免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可(ke)能的不(bu)要使(shi)用溶血(xue)。如果血(xue)清中(zhong)大(da)量顆粒(li)，檢測(ce)前先(xian)離心(xin)或(huo)過濾(lv)。不(bu)要在(zai)37℃或(huo)更高的(de)溫度加熱解凍。應在室(shi)溫下解凍並確(que)保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地充分解凍。

土(tu)壤(rang)脫(tuo)氫酶(DHO)elisa檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

操(cao)作(zuo)步驟(zhou)：

1、使用前，將(jiang)所(suo)有試劑(ji)充分混勻。不(bu)要使(shi)液體(ti)產生大量的泡沫，以(yi)免(mian)加樣(yang)時(shi)加入大量的氣泡，產生加樣(yang)上的(de)誤(wu)差。

2、根據待測(ce)樣(yang)品數(shu)量加上標準(zhun)品的(de)數量決(jue)定所(suo)需(xu)的板(ban)條數(shu)。每(mei)個(ge)標準(zhun)品和空白孔(kong)建(jian)議(yi)做(zuo)復(fu)孔(kong)。每(mei)個(ge)樣(yang)品根(gen)據自己(ji)的數(shu)量來定，能使用復(fu)孔(kong)的(de)盡(jin)量做(zuo)復(fu)孔(kong)。

3、加入稀釋好後(hou)的(de)標準(zhun)品50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)、加入待測(ce)樣(yang)品50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)內(nei)。立(li)即加入50ul標記的抗(kang)體。蓋(gai)上膜(mo)板(ban)，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育(yu)45分鐘(zhong)。

4、甩去孔(kong)內(nei)液體(ti)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液，振(zhen)蕩(dang)30秒(miao)，甩去洗滌液，用吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重復(fu)此操(cao)作(zuo)4次。如果用洗板(ban)機(ji)洗滌，洗滌(di)次數增加壹次。

5、每(mei)孔(kong)加入100ul的親和鏈酶(mei)素(su)-HRP，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。

6、甩去孔(kong)內(nei)液體(ti)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液，振(zhen)蕩(dang)30秒(miao)，甩去洗滌液，用吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重復(fu)此操(cao)作(zuo)4次。如果用洗板(ban)機(ji)洗滌，洗滌(di)次數增加壹次。

7、每(mei)孔(kong)加入底物(wu)A、B各(ge)50ul，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育(yu)5分鐘(zhong)。避(bi)免(mian)光(guang)照(zhao)。

8、取出(chu)酶標板(ban)，迅(xun)速(su)加入50ul終止液，加入終止液後(hou)應(ying)立(li)即測(ce)定結果。

9、在450nm波(bo)長處測(ce)定各(ge)孔(kong)的(de)OD值。

操(cao)作(zuo)註意事項：

1、試劑(ji)應(ying)按標簽(qian)說明書儲(chu)存，使(shi)用前恢(hui)復(fu)到室(shi)溫。稀稀(xi)過後(hou)的(de)標準(zhun)品應(ying)丟棄(qi)，不(bu)可(ke)保(bao)存

2、實驗中(zhong)不(bu)用的板(ban)條應(ying)立(li)即放回包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong)，密(mi)封(feng)保(bao)存，以(yi)免(mian)變(bian)質。

3、不(bu)用的其(qi)它試劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好或(huo)蓋好。不(bu)同批號(hao)的(de)試劑(ji)不(bu)要混用。保(bao)質前使(shi)用。

4、使用壹次性的吸頭以(yi)免(mian)交叉汙(wu)染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液和底物(wu)A、B液時(shi)，避(bi)免(mian)使(shi)用帶(dai)金(jin)屬部(bu)分的(de)加樣(yang)器。

5、使用幹凈(jing)的塑料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置(zhi)洗(xi)滌液。使(shi)用前充分混勻試劑(ji)盒(he)裏的(de)各(ge)種(zhong)成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品。

6、底物(wu)A應揮發(fa)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對光(guang)敏(min)感(gan)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下(xia)。避(bi)免(mian)用手接(jie)觸，有(you)毒。實(shi)驗完(wan)成(cheng)後應(ying)立(li)即讀(du)取OD值。

7、加入試劑(ji)的(de)順序應(ying)壹致(zhi)，以保(bao)證所(suo)有反應(ying)板(ban)孔(kong)溫育(yu)的時(shi)間(jian)壹樣(yang)。按照說明書中(zhong)標明(ming)的時(shi)間(jian)、加液的(de)量及順序進行(xing)溫育(yu)操(cao)作(zuo)。

壹般來講，96T能檢(jian)測(ce)90個(ge)樣(yang)本，48T能檢(jian)測(ce)42個(ge)樣(yang)本，這裏面(mian)需(xu)要用標樣(yang)來做(zuo)標準(zhun)曲線(xian)，所(suo)以各(ge)位(wei)需(xu)要做(zuo)實(shi)驗的(de)老(lao)師們，請(qing)在購(gou)買ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)時(shi)候註意，需(xu)要做(zuo)多(duo)少(shao)個(ge)樣(yang)本，在決(jue)定買多大(da)規格(ge)的(de)試劑(ji)盒(he)，以(yi)免(mian)做(zuo)實(shi)驗時(shi)出(chu)現(xian)試劑(ji)盒(he)不(bu)夠用或(huo)者浪(lang)費！

原理(li)：將(jiang)特(te)異性(xing)抗體(ti)包被(bei)於(yu)固相(xiang)載體表面(mian)，經(jing)洗滌(di)後分成(cheng)兩(liang)組(zu)：壹組(zu)加酶標記抗原(yuan)和被(bei)測(ce)抗(kang)原的混合液，另壹組(zu)只加酶標記抗原(yuan)，經孵(fu)育(yu)洗滌(di)後(hou)加底物(wu)顯色(se)，這兩(liang)組(zu)底物(wu)降解量之差，即為(wei)所(suo)要測(ce)定的未知(zhi)抗原的量。