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          微(wei)生物(wu)亞(ya)硫酸(suan)鹽(yan)還原酶(mei)(SiR)elisa檢測試劑盒

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          ELISA法是(shi)免(mian)疫診(zhen)斷(duan)中(zhong)的壹項(xiang)新技術,現已(yi)成功地(di)應用(yong)於多種(zhong)病原(yuan)微生物(wu)所引(yin)起的傳(chuan)染病、寄生蟲病及(ji)非(fei)傳染病等方面的免(mian)疫診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應(ying)用於大分(fen)子(zi)抗原(yuan)和(he)小(xiao)分(fen)子(zi)抗原(yuan)的定量測定,根據(ju)已經使(shi)用的結果,認(ren)為(wei)ELISA法具(ju)有靈敏(min)、特(te)異、簡(jian)單、快速(su)、穩定及(ji)易於自動化(hua)操作等特(te)點。不(bu)僅(jin)適用(yong)於臨床(chuang)標本(ben)的檢(jian)查(zha),而(er)且(qie)由(you)於壹天(tian)之內(nei)可以(yi)檢查(zha)幾百甚(shen)至(zhi)上千份標本(ben),因此(ci),也適(shi)合於血清流行病學(xue)調查(zha)。本法不(bu)僅(jin)可以(yi)用來(lai)測定ti,而(er)且(qie)也可(ke)用(yong)於測定體液(ye)中的循環抗原(yuan),所以也是(shi)壹種(zhong)早期診(zhen)斷(duan)的良好(hao)方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物(wu)醫學(xue)各(ge)領(ling)域的應(ying)用範圍(wei)日益擴(kuo)大,

          組(zu)成結構(gou)

          1、血清:操作過程中(zhong)避(bi)免(mian)任何(he)細(xi)胞刺激(ji)。使(shi)用不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)du素的試(shi)管。收集(ji)血液後,1000×g離(li)心10分(fen)鐘將血紅細胞迅速(su)小心地分(fen)離(li)。

          2、2、血漿:EDTA、檸檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素血漿可用於檢測。1000×g離(li)心30分(fen)鐘去(qu)除顆(ke)粒。

          3、細(xi)胞(bao)上清液:1000×g離(li)心10分(fen)鐘去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物(wu)。

          4、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿:將組(zu)織(zhi)加入(ru)適量(liang)生理鹽(yan)水搗碎。1000×g離(li)心10分(fen)鐘,取(qu)上清液。

          5、保存(cun):如果樣(yang)品(pin)不立即(ji)使(shi)用,應(ying)將其分(fen)成小部(bu)分(fen)-70℃保存(cun),避免(mian)反復(fu)冷(leng)凍(dong)。盡(jin)可能(neng)的不(bu)要(yao)使(shi)用溶(rong)血。如果血清中大量顆(ke)粒,檢(jian)測前先離(li)心或過濾。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或更(geng)高(gao)的溫(wen)度加(jia)熱解凍。應在室(shi)溫(wen)下(xia)解凍並(bing)確保樣(yang)品(pin)均勻(yun)地充分(fen)解凍。

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          微生物(wu)亞(ya)硫酸(suan)鹽(yan)還原酶(mei)(SiR)elisa檢測試劑盒

          操作步(bu)驟:

          1、使(shi)用前(qian),將所有試劑(ji)充分(fen)混勻(yun)。不要(yao)使(shi)液體(ti)產(chan)生大量的泡(pao)沫,以免(mian)加樣(yang)時(shi)加入(ru)大(da)量(liang)的氣(qi)泡,產(chan)生加樣上的誤差。

          2、根(gen)據(ju)待(dai)測樣品數(shu)量(liang)加上標準品的數(shu)量(liang)決(jue)定所需(xu)的板(ban)條(tiao)數(shu)。每(mei)個標準品(pin)和(he)空(kong)白孔(kong)建(jian)議做(zuo)復(fu)孔(kong)。每(mei)個樣品根(gen)據自(zi)己的數(shu)量(liang)來(lai)定,能使(shi)用復(fu)孔(kong)的盡(jin)量做(zuo)復(fu)孔(kong)。

          3、加(jia)入(ru)稀釋好後的標(biao)準品50ul於反應(ying)孔(kong)、加(jia)入(ru)待(dai)測樣品50ul於反應(ying)孔(kong)內(nei)。立即(ji)加(jia)入(ru)50ul標記的抗體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育45分(fen)鐘。

          4、甩去(qu)孔(kong)內(nei)液體(ti),每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗滌液(ye),用吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果用(yong)洗板機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

          5、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100ul的親(qin)和(he)鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育30分(fen)鐘。

          6、甩去(qu)孔(kong)內(nei)液體(ti),每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗滌液(ye),用吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果用(yong)洗板機(ji)洗滌,洗滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

          7、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50ul,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫(wen)育5分(fen)鐘。避(bi)免(mian)光照(zhao)。

          8、取(qu)出酶(mei)標板(ban),迅速(su)加入50ul終(zhong)止液,加入終(zhong)止液後應立即(ji)測定結果。

          9、在(zai)450nm波(bo)長(chang)處(chu)測定各(ge)孔(kong)的OD值(zhi)。

          操作註意事(shi)項(xiang):

          1、試(shi)劑(ji)應(ying)按(an)標(biao)簽說(shuo)明書儲存(cun),使(shi)用前(qian)恢復(fu)到室(shi)溫(wen)。稀稀過後(hou)的標(biao)準品應丟棄,不可保存(cun)

          2、實(shi)驗(yan)中不用的板(ban)條(tiao)應(ying)立即(ji)放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋中(zhong),密封保存(cun),以免(mian)變質(zhi)。

          3、不(bu)用(yong)的其它試劑(ji)應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好。不同批號的試(shi)劑不要(yao)混用(yong)。保質(zhi)前(qian)使(shi)用。

          4、使(shi)用壹次(ci)性的吸頭(tou)以(yi)免(mian)交叉汙(wu)染,吸取(qu)終止液和(he)底(di)物(wu)A、B液(ye)時(shi),避免(mian)使(shi)用帶金屬(shu)部(bu)分(fen)的加(jia)樣器。

          5、使(shi)用幹凈(jing)的塑(su)料容器配(pei)置洗滌液(ye)。使(shi)用前(qian)充分(fen)混勻(yun)試劑(ji)盒裏(li)的各(ge)種(zhong)成份及(ji)樣(yang)品。

          6、底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發,避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)打開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對光敏(min)感,避免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)暴(bao)露(lu)於光下(xia)。避(bi)免(mian)用手(shou)接觸(chu),有毒(du)。實驗(yan)完成後應(ying)立即(ji)讀(du)取(qu)OD值(zhi)。

          7、加(jia)入(ru)試(shi)劑(ji)的順(shun)序應(ying)壹致,以(yi)保證(zheng)所有反應(ying)板孔(kong)溫(wen)育的時(shi)間(jian)壹樣。按(an)照(zhao)說(shuo)明書中標明的時(shi)間(jian)、加(jia)液(ye)的量(liang)及(ji)順(shun)序進行溫(wen)育操作。

          壹般來(lai)講(jiang),96T能(neng)檢(jian)測90個樣本,48T能(neng)檢測42個樣本,這(zhe)裏(li)面需(xu)要(yao)用(yong)標(biao)樣(yang)來(lai)做(zuo)標(biao)準曲(qu)線(xian),所以各(ge)位(wei)需(xu)要(yao)做(zuo)實(shi)驗(yan)的老師們(men),請在(zai)購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒的時(shi)候(hou)註意,需(xu)要(yao)做(zuo)多(duo)少(shao)個樣本,在(zai)決(jue)定買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的試(shi)劑盒,以免(mian)做(zuo)實(shi)驗(yan)時(shi)出現(xian)試(shi)劑(ji)盒不夠(gou)用或者(zhe)浪費(fei)!

          原(yuan)理(li):將特(te)異性(xing)抗體(ti)包(bao)被(bei)於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表面,經洗滌後(hou)分(fen)成兩組(zu):壹組(zu)加酶(mei)標記抗原(yuan)和(he)被(bei)測抗原(yuan)的混合液,另(ling)壹組(zu)只(zhi)加(jia)酶(mei)標記(ji)抗原(yuan),經孵育洗滌後(hou)加底(di)物(wu)顯(xian)色(se),這(zhe)兩(liang)組(zu)底物(wu)降解量之差,即(ji)為(wei)所要(yao)測定的未知(zhi)抗原(yuan)的量(liang)。

          蘋(ping)果花(hua)葉病毒(du)(APMV)elisa檢測試劑盒

          蘋果褪綠(lv)葉斑病(bing)毒(ACLSV)elisa檢(jian)測試劑盒

          蘋果莖(jing)溝(gou)病毒(ASGV)elisa檢(jian)測試劑盒

          蘋果銹(xiu)果類病毒(ASSVd)elisa檢(jian)測試劑盒

          蘋果莖(jing)痘(dou)病(bing)毒(du)(ASPV)elisa檢(jian)測試劑盒

          禽牛結核(Mycobacterium bovis)elisa檢(jian)測試劑盒

          蛇蛇(she)毒因(yin)子(zi)(CVF)elisa檢測試劑盒

          樹鼩Ⅰ型(xing)膠原交聯羧基(ji)端肽(tai)(CTXI)elisa檢(jian)測試劑盒

          樹鼩盤(pan)狀(zhuang)結構(gou)域受(shou)體家族(zu)成員(yuan)2(DDR2)elisa檢測試劑盒

          樹鼩乙型(xing)肝(gan)炎(yan)E抗原(yuan)(HBeAg)elisa檢(jian)測試劑盒

          水貂(diao)幹擾(rao)素R(IFN-r)elisa檢(jian)測試劑盒

          水牛乳糖酶(mei)(Lactase)elisa檢測試劑盒

          水牛酪(lao)蛋(dan)白αs1(CSN1S1)elisa檢測試劑盒

          梭子(zi)蟹卵(luan)黃(huang)蛋(dan)白(Vn)elisa檢測試劑盒

          土壤(rang)脫(tuo)氫(qing)酶(DHO)elisa檢(jian)測試劑盒

          土壤(rang)脲(niao)酶(mei)(UE)elisa檢(jian)測試劑盒

          土壤(rang)核(he)酮(tong)糖-1,5-二(er)磷(lin)酸(suan)羧化(hua)酶(mei)(Rubisco)elisa檢測試劑盒

          土壤(rang)GABA合成酶(GABA-S)elisa檢(jian)測試劑盒

          土壤(rang)水(shui)解脫氫(qing)酶(HDHO)elisa檢(jian)測試劑盒














































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