T2毒素(su)（T-2 Toxin）ELISA檢測試劑盒 @使(shi)用說(shuo)明書(shu)

試劑盒采(cai)用雙(shuang)抗體壹步夾(jia)心(xin)法酶(mei)聯(lian)免疫吸(xi)附試驗（ELISA）。往(wang)預(yu)先(xian)包被T2毒素(su)（T-2 Toxin）抗體的(de)包被微孔中，依(yi)次(ci)加(jia)入標(biao)本(ben)、標(biao)準品、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢測抗(kang)體，經(jing)過(guo)溫育並徹(che)di洗(xi)滌。用底(di)物TMB顯色(se)，TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催化下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並在酸(suan)的(de)作(zuo)用下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)最終的(de)黃色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺和(he)樣品中的(de)T2毒素(su)（T-2 Toxin）呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm 波(bo)長下(xia)測定(ding)吸(xi)光(guang)度（OD 值），計(ji)算樣(yang)品活性。

樣品收(shou)集(ji)、處理(li)及(ji)保(bao)存方(fang)法

1.  樣本(ben)不能(neng)含(han)疊氮(dan)鈉（NaN3），因(yin)為(wei)疊氮(dan)鈉（NaN3）是辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）的(de)抑(yi)制(zhi)劑。

2.  標(biao)本(ben)采集(ji)後盡早(zao)進(jin)行提取，提(ti)取(qu)按相(xiang)關(guan)文獻(xian)進行。

3.  植物(wu)萃(cui)取(qu)液或其(qi)它相(xiang)關(guan)樣本(ben)：請(qing)1000 x g離(li)心(xin)20分(fen)鐘，取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測。

4.  保(bao)存：如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)後不及(ji)時檢測，請(qing)按壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝，凍存於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融，在室溫下解凍並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。

自(zi)備(bei)物品

1. 酶(mei)標(biao)儀(yi)（450nm）

2. 高精(jing)度(du)加(jia)樣(yang)器及(ji)槍頭(tou)：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒(heng)溫箱

操作(zuo)註意(yi)事項(xiang)

1.  試劑盒保(bao)存在(zai)2-8℃，使用前室溫平衡20分(fen)鐘。從(cong)冰(bing)箱取(qu)出(chu)的(de)濃縮洗(xi)滌液會(hui)有結(jie)晶，這(zhe)屬於(yu)正常(chang)現(xian)象，水(shui)浴(yu)加(jia)熱使結(jie)晶wan全(quan)溶(rong)解後再使(shi)用(yong)。

2.  實驗中不用(yong)的(de)板條(tiao)應(ying)立(li)即放(fang)回自(zi)封(feng)袋中，密封(feng)（低(di)溫幹燥(zao)）保(bao)存。

3.  濃度為(wei)0的(de)S0號(hao)標(biao)準品即可(ke)視為(wei)陰(yin)性對照或者(zhe)空白；按照說明(ming)書(shu)操作(zuo)時樣本(ben)已經(jing)稀(xi)釋(shi)5倍(bei)，最終結(jie)果(guo)乘(cheng)以5才(cai)是(shi)樣本(ben)實際(ji)濃度。

4.  嚴格(ge)按照說明(ming)書(shu)中標(biao)明的(de)時間(jian)、加(jia)液(ye)量及(ji)順序進行溫育操作(zuo)。

5.  所(suo)有液(ye)體組分(fen)使(shi)用(yong)前充分(fen)搖(yao)勻(yun)。

試劑盒組成(cheng)

註：標(biao)準品（S0-S5）濃度依(yi)次(ci)為：0、0..5、1、2、4、8 PPb

試劑的(de)準備

 20×洗(xi)滌緩(huan)沖液的(de)稀釋(shi)：蒸(zheng)餾水按1：20稀釋，即1份(fen)的(de)20×洗(xi)滌緩(huan)沖液加(jia)19份(fen)的(de)蒸(zheng)餾水。

洗(xi)板(ban)方法

1.  手(shou)工洗(xi)板(ban)：甩盡孔內液體，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌液，靜(jing)置1min後甩盡孔內液體，在吸(xi)水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如(ru)此洗(xi)板(ban)5次(ci)。

2.  自(zi)動洗(xi)板(ban)機：每孔註入洗(xi)液(ye)350μL，浸泡(pao)1min，洗(xi)板(ban)5次(ci)。

操作(zuo)步驟

1.  從(cong)室溫平衡20min後(hou)的(de)鋁箔袋(dai)中取出(chu)所(suo)需板(ban)條(tiao)，剩(sheng)余板(ban)條(tiao)用自(zi)封(feng)袋密封放(fang)回4℃。

2.  設置標(biao)準品孔和樣(yang)本(ben)孔，標(biao)準品孔各(ge)加(jia)不(bu)同(tong)濃度的(de)標(biao)準品50μL；

3.  樣本(ben)孔先加(jia)待測樣(yang)本(ben)10μL，再加(jia)樣(yang)本(ben)稀釋(shi)液40μL；空白孔不加(jia)。

4.  除空白孔外(wai)，標(biao)準品孔和樣(yang)本(ben)孔中每孔加(jia)入辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標(biao)記(ji)的(de)檢測抗(kang)體100μL，用封(feng)板膜封(feng)住反應(ying)孔，37℃水浴(yu)鍋(guo)或恒(heng)溫箱溫育60min。

5.  棄(qi)去(qu)液體，吸水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌液，靜(jing)置1min，甩去洗(xi)滌液，吸(xi)水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如(ru)此重(zhong)復(fu)洗(xi)板(ban)5次(ci)（也可(ke)用洗(xi)板(ban)機洗(xi)板(ban)）。

6.  每孔加(jia)入底(di)物A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光(guang)孵育(yu)15min。

7.  每孔加(jia)入終止(zhi)液50μL，15min內，在450nm波(bo)長處測定(ding)各(ge)孔的(de)OD值。

結(jie)果(guo)判斷

 繪制(zhi)標(biao)準曲線(xian)：在Excel工作(zuo)表中，以標(biao)準品濃度作(zuo)橫坐標(biao)，對應(ying)OD值作(zuo)縱坐標(biao)，繪制(zhi)出(chu)標(biao)準品線性回歸(gui)曲線(xian)，按曲線(xian)方程(cheng)計(ji)算各(ge)樣(yang)本(ben)濃度值 

試劑盒性能(neng)

1.  準確性：標(biao)準品線性回歸(gui)與預(yu)期(qi)濃度相(xiang)關(guan)系數R值，大於(yu)等於0.9900。

2.  靈(ling)敏(min)度(du)：最di檢測濃度小於0.1PPb。

3.  特異性：不與(yu)其(qi)它可(ke)溶(rong)性結(jie)構類似物(wu)交叉(cha)反(fan)應(ying)。

4.  重(zhong)復(fu)性：板內、板間變(bian)異系(xi)數均(jun)小於15%。

5.  貯藏(zang)：2-8℃，避(bi)光(guang)防(fang)潮(chao)保(bao)存。

6.  有效(xiao)期：6個月

免責(ze)聲明

1.   試劑盒僅(jin)供研(yan)究使(shi)用，不(bu)得(de)用於臨(lin)床實(shi)驗或人(ren)體實驗，否則(ze)所(suo)產生(sheng)的(de)壹切(qie)後(hou)果(guo)，由(you)實驗者(zhe)承(cheng)擔，本(ben)公(gong)司(si)概不(bu)負(fu)責(ze)。

2.   嚴格(ge)按照說明(ming)書(shu)操作(zuo)，實驗者(zhe)違反說明書(shu)操作(zuo)，後果(guo)由(you)實驗者(zhe)承(cheng)擔。

 公(gong)司(si)相(xiang)關(guan)產品：

小鼠(shu)基質細(xi)胞(bao)衍生(sheng)因(yin)子(zi)1(SDF-1)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)β澱粉(fen)樣蛋白(Aβ)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)降鈣素(su)基(ji)因(yin)相(xiang)關(guan)肽(CGRP)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)氧(yang)化(hua)高密度(du)脂(zhi)蛋白(Ox-HDL)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)血(xue)纖(xian)蛋白(fibrin)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)基質細(xi)胞(bao)衍生(sheng)因(yin)子(zi)1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)肥(fei)大細(xi)胞(bao)蛋白酶(mei)(MMCP-1)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)血(xue)紅(hong)蛋白(Hb)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)鈣衛蛋白(CALP)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)生長因(yin)子(zi)15(FGF15)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)黃嘌呤(ling)氧(yang)化(hua)酶(mei)(XO)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)Wnt-7a蛋白(WNT7A)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)Wnt-16蛋白(WNT16)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)Wnt-10b蛋白(WNT10B)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒

小鼠(shu)Vinculin(VCL)ELISA科(ke)研(yan)試劑盒