土壤脲(niao)酶(UE)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

土壤脲(niao)酶(UE)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

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ELISA法是(shi)免疫(yi)診(zhen)斷(duan)中(zhong)的壹(yi)項(xiang)新技(ji)術(shu)，現已(yi)成功(gong)地應用(yong)於(yu)多(duo)種(zhong)病(bing)原微生(sheng)物(wu)所(suo)引起的傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄生蟲(chong)病(bing)及非(fei)傳染(ran)病(bing)等(deng)方面(mian)的免疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應用(yong)於(yu)大(da)分(fen)子(zi)抗原和小分子(zi)抗原的定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，根(gen)據(ju)已(yi)經(jing)使(shi)用(yong)的結(jie)果，認(ren)為(wei)ELISA法具有(you)靈敏、特異(yi)、簡單、快(kuai)速(su)、穩定(ding)及易於(yu)自動(dong)化(hua)操(cao)作等(deng)特點(dian)。不僅適用(yong)於(yu)臨床(chuang)標(biao)本的檢(jian)查(zha)，而(er)且(qie)由(you)於壹(yi)天(tian)之(zhi)內(nei)可(ke)以(yi)檢(jian)查(zha)幾(ji)百(bai)甚(shen)至(zhi)上千份(fen)標(biao)本,因(yin)此(ci)，也適合(he)於血清(qing)流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查。本法(fa)不僅可(ke)以(yi)用來測定(ding)抗ti，而(er)且(qie)也可(ke)用(yong)於測定體(ti)液中的循(xun)環(huan)抗(kang)原，所(suo)以也是(shi)壹種(zhong)早(zao)期診(zhen)斷(duan)的良(liang)好(hao)方(fang)法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物醫學(xue)各領域(yu)的應用(yong)範(fan)圍日(ri)益(yi)擴(kuo)大(da)，

組成結(jie)構

1、血(xue)清(qing)：操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免任(ren)何(he)細胞(bao)刺激。使(shi)用(yong)不含熱(re)原和內du素(su)的試(shi)管。收(shou)集(ji)血液後(hou)，1000×g離心(xin)10分(fen)鐘將血紅(hong)細胞(bao)迅速(su)小心(xin)地分離。

2、2、血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血漿(jiang)可(ke)用(yong)於檢(jian)測(ce)。1000×g離心(xin)30分(fen)鐘去除顆(ke)粒(li)。

3、細胞(bao)上清液：1000×g離心(xin)10分(fen)鐘去除顆(ke)粒(li)和聚(ju)合(he)物。

4、組(zu)織勻漿：將組織(zhi)加入適量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)搗碎。1000×g離心(xin)10分(fen)鐘，取上清液。

5、保存：如(ru)果樣(yang)品不立即使(shi)用(yong)，應將(jiang)其(qi)分成小(xiao)部分-70℃保(bao)存，避免反復冷(leng)凍。盡可(ke)能(neng)的不要使(shi)用(yong)溶血。如(ru)果血清中大(da)量(liang)顆(ke)粒(li)，檢(jian)測(ce)前(qian)先(xian)離心(xin)或(huo)過濾。不要在(zai)37℃或(huo)更高的溫(wen)度(du)加熱(re)解(jie)凍(dong)。應在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣(yang)品均(jun)勻地充分解(jie)凍(dong)。

土壤脲(niao)酶(UE)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

操(cao)作步驟：

1、使(shi)用(yong)前(qian)，將所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)充(chong)分混(hun)勻(yun)。不要使(shi)液體產(chan)生大(da)量(liang)的泡(pao)沫，以免加樣(yang)時(shi)加入大(da)量(liang)的氣(qi)泡(pao)，產生加樣(yang)上的誤差。

2、根(gen)據(ju)待測(ce)樣(yang)品數(shu)量(liang)加上標(biao)準品的數(shu)量(liang)決(jue)定(ding)所(suo)需(xu)的板(ban)條(tiao)數(shu)。每個標(biao)準品和空白孔建(jian)議(yi)做(zuo)復(fu)孔。每個樣(yang)品根(gen)據(ju)自己的數(shu)量(liang)來(lai)定(ding)，能使(shi)用(yong)復孔的盡量(liang)做(zuo)復(fu)孔。

3、加入稀釋(shi)好(hao)後(hou)的標(biao)準品50ul於反應孔、加入待測(ce)樣(yang)品50ul於(yu)反應孔內(nei)。立即加入50ul標(biao)記的抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板(ban)，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫(wen)育(yu)45分(fen)鐘。

4、甩去孔內(nei)液體，每孔加滿(man)洗(xi)滌液，振(zhen)蕩(dang)30秒(miao)，甩去洗(xi)滌(di)液，用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操(cao)作4次(ci)。如(ru)果用洗板(ban)機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌次(ci)數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。

5、每孔加入100ul的親(qin)和鏈(lian)酶素(su)-HRP，輕輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。

6、甩去孔內(nei)液體，每孔加滿(man)洗(xi)滌液，振(zhen)蕩(dang)30秒(miao)，甩去洗(xi)滌(di)液，用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操(cao)作4次(ci)。如(ru)果用洗板(ban)機(ji)洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌次(ci)數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。

7、每孔加入底(di)物A、B各(ge)50ul，輕輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫(wen)育(yu)5分(fen)鐘。避免光(guang)照(zhao)。

8、取(qu)出(chu)酶標(biao)板(ban)，迅(xun)速(su)加入50ul終(zhong)止(zhi)液，加入終(zhong)止(zhi)液後(hou)應立(li)即測定(ding)結(jie)果。

9、在(zai)450nm波長處(chu)測(ce)定(ding)各孔的OD值(zhi)。

操(cao)作註意(yi)事(shi)項(xiang)：

1、試(shi)劑(ji)應按(an)標(biao)簽說明書(shu)儲(chu)存，使(shi)用(yong)前(qian)恢(hui)復到(dao)室溫(wen)。稀稀過(guo)後(hou)的標(biao)準品應丟棄(qi)，不可(ke)保(bao)存

2、實(shi)驗(yan)中不用的板(ban)條(tiao)應立(li)即放(fang)回包(bao)裝(zhuang)袋中，密封(feng)保(bao)存，以免變(bian)質(zhi)。

3、不用的其(qi)它試(shi)劑(ji)應包(bao)裝(zhuang)好或(huo)蓋好。不同批號(hao)的試(shi)劑(ji)不要混(hun)用(yong)。保(bao)質前(qian)使(shi)用(yong)。

4、使(shi)用(yong)壹次(ci)性的吸(xi)頭(tou)以(yi)免交叉汙(wu)染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液和底(di)物A、B液時(shi)，避(bi)免使(shi)用(yong)帶金屬部分的加樣(yang)器。

5、使(shi)用(yong)幹凈(jing)的塑(su)料(liao)容(rong)器配(pei)置(zhi)洗滌(di)液。使(shi)用(yong)前(qian)充分(fen)混(hun)勻(yun)試(shi)劑(ji)盒(he)裏(li)的各(ge)種(zhong)成份(fen)及樣(yang)品。

6、底(di)物A應揮(hui)發(fa)，避免長時(shi)間(jian)打開蓋子(zi)。底(di)物B對(dui)光(guang)敏感(gan)，避(bi)免長時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下。避(bi)免用(yong)手(shou)接觸(chu)，有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完(wan)成後(hou)應立(li)即讀取(qu)OD值。

7、加入試(shi)劑(ji)的順(shun)序(xu)應壹(yi)致(zhi)，以保證所(suo)有(you)反應板(ban)孔溫(wen)育(yu)的時(shi)間(jian)壹(yi)樣(yang)。按照(zhao)說明書(shu)中(zhong)標(biao)明的時(shi)間(jian)、加液的量(liang)及順序(xu)進行(xing)溫(wen)育(yu)操(cao)作。

壹(yi)般來(lai)講(jiang)，96T能(neng)檢(jian)測(ce)90個樣(yang)本，48T能(neng)檢(jian)測(ce)42個樣(yang)本，這(zhe)裏(li)面(mian)需(xu)要用標(biao)樣(yang)來做(zuo)標(biao)準曲線，所(suo)以各位(wei)需(xu)要做(zuo)實(shi)驗的老(lao)師(shi)們，請(qing)在(zai)購買ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的時(shi)候註意(yi)，需(xu)要做(zuo)多(duo)少(shao)個樣(yang)本，在(zai)決(jue)定(ding)買多(duo)大(da)規(gui)格的試(shi)劑(ji)盒(he)，以(yi)免做(zuo)實(shi)驗時(shi)出(chu)現試(shi)劑(ji)盒(he)不夠(gou)用或(huo)者浪(lang)費(fei)！

原理：將(jiang)特異(yi)性(xing)抗(kang)體包(bao)被(bei)於(yu)固(gu)相載體表(biao)面(mian)，經(jing)洗滌(di)後(hou)分(fen)成兩(liang)組(zu)：壹(yi)組加酶標(biao)記抗原和被(bei)測(ce)抗(kang)原的混(hun)合(he)液，另壹(yi)組只(zhi)加酶標(biao)記抗原，經(jing)孵育洗(xi)滌(di)後(hou)加底(di)物顯(xian)色，這(zhe)兩(liang)組(zu)底(di)物降(jiang)解(jie)量(liang)之(zhi)差，即為所(suo)要測定的未(wei)知(zhi)抗原的量(liang)。

蘋(ping)果花葉病(bing)毒(du)(APMV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

蘋(ping)果褪綠葉斑(ban)病(bing)毒(du)(ACLSV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

蘋(ping)果莖(jing)溝(gou)病(bing)毒(du)(ASGV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

蘋(ping)果銹(xiu)果類病(bing)毒(du)(ASSVd)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

蘋(ping)果莖(jing)痘(dou)病(bing)毒(du)(ASPV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

禽牛結(jie)核(he)(Mycobacterium bovis)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)豆脂(zhi)肪(fang)氧化(hua)酶3(LOX3)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)豆β-乳球蛋白(bai)(β-LG)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)豆7S球蛋白(bai)(GLB7s)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦肝(gan)腸(chang)孢(bao)蟲(EHP)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦白斑(ban)病(bing)毒(du)(WSSV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦黃頭病(bing)毒(du)(YHV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦甲殼動(dong)物(wu)高血糖(tang)激素(su)(CHH)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦法尼酸甲基轉移(yi)酶(FA-O-MeT)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦多(duo)巴(ba)脫羧酶(DOPA)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦中過敏(min)原原肌(ji)球蛋白(bai)(AIA)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦鳥苷(gan)酸(GMP)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦白斑(ban)癥(zheng)病(bing)毒(du)(WSV)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦白斑(ban)病(bing)毒(du)VP28(WSSVVP28)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦錨蛋白(bai)(ankyrin)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

對(dui)蝦氨基吡啉(lin)-N-脫甲基酶(ARND)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

蜂蜜(mi)甘露(lu)糖(tang)(Mannose)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)