人粘(zhan)蛋(dan)白(bai)/粘(zhan)液(ye)素(su)5B(MUC5B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

人粘(zhan)蛋(dan)白(bai)/粘(zhan)液(ye)素(su)5B(MUC5B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

ELISA法(fa)是(shi)免疫(yi)診(zhen)斷(duan)中的(de)壹項(xiang)新技術，現已(yi)成(cheng)功地(di)應用於多種病(bing)原(yuan)微生物所(suo)引起的(de)傳(chuan)染病(bing)、寄生(sheng)蟲病(bing)及非(fei)傳(chuan)染病(bing)等方(fang)面(mian)的(de)免(mian)疫診斷(duan)。也(ye)已應用於大分(fen)子(zi)抗原(yuan)和小分(fen)子(zi)抗原(yuan)的(de)定(ding)量測定(ding)，根據(ju)已經(jing)使(shi)用(yong)的(de)結果(guo)，認(ren)為(wei)ELISA法(fa)具有靈(ling)敏(min)、特異、簡(jian)單(dan)、快(kuai)速(su)、穩定(ding)及易(yi)於自動(dong)化操(cao)作等特點。不僅(jin)適用於臨床標本(ben)的(de)檢查，而(er)且由於壹天之內(nei)可以檢查幾百(bai)甚(shen)至(zhi)上(shang)千份標(biao)本(ben),因此(ci)，也(ye)適合於血清(qing)流(liu)行(xing)病(bing)學調(tiao)查(zha)。本法(fa)不僅(jin)可以(yi)用來(lai)測定(ding)抗ti，而(er)且也(ye)可用(yong)於測定(ding)體液中(zhong)的(de)循環抗原(yuan)，所以(yi)也(ye)是壹種早期(qi)診斷(duan)的(de)良好(hao)方(fang)法(fa)。因此(ci)ELISA法(fa)在(zai)生物醫(yi)學各領域的(de)應用範圍日(ri)益(yi)擴大(da)，

免責聲明(ming)

1. 試劑(ji)盒(he)僅(jin)供研究使(shi)用(yong)，不得(de)用(yong)於臨床實(shi)驗或人(ren)體實(shi)驗，否(fou)則所產生的(de)壹切(qie)後果，由實(shi)驗者承擔，本(ben)公司(si)概(gai)不負(fu)責。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作，實(shi)驗者違反說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作，後(hou)果(guo)由實(shi)驗者承擔。

3. 產品(pin)特點

壹、高效(xiao)、靈(ling)敏(min)、特異的(de)抗ti；

二、穩(wen)定(ding)的(de)重復性和可(ke)靠性；

三、吸(xi)附(fu)性能好(hao)，空白值(zhi)低，孔(kong)底(di)透(tou)明(ming)度(du)高的(de)固(gu)相(xiang)載(zai)體；

四、適用血清、血(xue)漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)液(ye)、細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)液、尿(niao)液等等多(duo)種標本(ben)類型(xing)；

五、節(jie)省實(shi)驗經費。

elisa試劑(ji)盒(he)回收(shou)率是(shi)反應待測物在(zai)樣品(pin)分(fen)析(xi)過程(cheng)中(zhong)的(de)損(sun)失的(de)程(cheng)度(du)，損(sun)失越少，回(hui)收率越高，如果(guo)作(zuo)標(biao)液(ye)1PPM，就是1毫克(ke)/升，而(er)作出標(biao)準(zhun)數據(ju)為(wei)0.99毫(hao)克(ke)/升(sheng)，就是說(shuo)妳(ni)的(de)回(hui)收率是99%，這(zhe)個(ge)與真(zhen)實(shi)成(cheng)分(fen)有密(mi)切的(de)關(guan)系，說(shuo)明(ming)方(fang)法(fa)的(de)準(zhun)確度(du)。比(bi)如水(shui)中(zhong)總無(wu)機氯(lv)含(han)量(liang)測定(ding)，樣品(pin)水(shui)中(zhong)含有無(wu)機氯(lv)20mg/L，取(qu)100mL被(bei)測水(shui)樣(yang)品，加(jia)入0.1mL濃度(du)為(wei)10mg/mL的(de)含(han)無(wu)機氯(lv)標(biao)準(zhun)樣品，測定(ding)時(shi)忽(hu)略(lve)體積變(bian)化，如果(guo)測定(ding)出樣(yang)品(pin)中無(wu)機氯(lv)為(wei)29.8mg/L，則(ze)認(ren)為(wei)回(hui)收(shou)率(lv)為(wei)99%。

人(ren)粘(zhan)蛋(dan)白(bai)/粘(zhan)液(ye)素(su)5B(MUC5B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

組成(cheng)結構

1、血(xue)清(qing)：操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何細胞刺激(ji)。使(shi)用(yong)不含(han)熱原(yuan)和內(nei)du素(su)的(de)試(shi)管。收集血(xue)液後，1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速小心(xin)地(di)分(fen)離(li)。

2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可(ke)用(yong)於檢測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒。

3、細(xi)胞上(shang)清(qing)液：1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物。

4、組(zu)織勻漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入適量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)液。

5、保存：如果(guo)樣(yang)品(pin)不立(li)即使(shi)用(yong)，應將(jiang)其(qi)分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70℃保存，避(bi)免(mian)反復冷凍。盡可(ke)能(neng)的(de)不要使(shi)用(yong)溶(rong)血或高血(xue)脂(zhi)血(xue)。如果(guo)血(xue)清(qing)中(zhong)大量顆粒，檢測前先(xian)離心(xin)或過(guo)濾(lv)。不要在(zai)37℃或更(geng)高的(de)溫(wen)度(du)加(jia)熱(re)解(jie)凍(dong)。應在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍並(bing)確保樣品均(jun)勻地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

試(shi)劑盒(he)成(cheng)分(fen)

1 預(yu)包(bao)被(bei)板(ban): 抗小鼠(shu)白介(jie)素(su)-6兔子IgG,親合純(chun)化 96T

2 酶標(biao)記(ji)抗ti: (30倍濃縮(suo))HRP標(biao)記(ji)抗小鼠(shu)白介(jie)素(su)-6兔子IgG,親合純(chun)化 0.4mL x 1

3 標準(zhun)品: 重組小鼠(shu)白介(jie)素(su)-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 30mL x 1

5 標記(ji)抗ti稀釋(shi)液(ye): 含(han)1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色劑: TMB底(di)物液(ye) 15mL x 1

7 終止(zhi)液: 1N硫(liu)suan 12mL x 1

8 濃縮(suo)洗(xi)滌液(ye): (40倍濃縮(suo)) 含(han)1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 50mL x 1 操(cao)作說(shuo)明(ming) 1實(shi)驗所需(xu)器材(但(dan)試劑(ji)盒(he)沒有提(ti)供) 酶標儀(450nm) 微移液(ye)管(guan)及其(qi)吸嘴 量筒及燒(shao)杯 去(qu)離子(zi)水(shui) 冰(bing)箱(xiang)(4°C) 坐標紙(zhi)(log/log) 吸水(shui)紙(zhi) 試管(用於標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)) 溫(wen)育(yu)箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗(xi)瓶(ping) (用(yong)於洗(xi)板(ban)) 壹次(ci)性(xing)試劑(ji)管(guan)(用於濃縮(suo)酶(mei)標記(ji)抗ti和顯(xian)色劑)

常用(yong)方(fang)法(fa)及原(yuan)理如下：

1. 夾心(xin)法(fa)：

夾心(xin)法(fa)常(chang)用於檢測大分(fen)子(zi)抗原(yuan)，壹般(ban)的(de)操(cao)作步(bu)驟為(wei):

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹性(xing)的(de)抗ti固著(zhu)（coating）於塑膠孔盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余(yu)抗ti

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，檢體中若(ruo)含(han)有待(dai)測的(de)抗原(yuan)，則其(qi)會與塑(su)膠孔盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結

c. 洗(xi)去(qu)多余(yu)待(dai)測檢體，加(jia)入另(ling)壹種對抗原(yuan)專(zhuan)壹的(de)壹次(ci)抗ti，與待(dai)測抗原(yuan)進行(xing)鍵(jian)結

d. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結壹次(ci)抗ti，加(jia)入帶(dai)有酶(mei)的(de)二次(ci)抗ti，與壹次(ci)抗ti鍵(jian)結

e. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二次(ci)抗ti，加(jia)入酶(mei)底(di)物使(shi)酵素(su)呈(cheng)色，以肉(rou)眼(yan)或儀器讀取(qu)呈色結果(guo)

原(yuan)理：針對抗原(yuan)分(fen)子(zi)上(shang)2個不同抗原(yuan)決(jue)定(ding)簇(cu)的(de)單(dan)克(ke)隆抗ti分(fen)別(bie)作(zuo)為(wei)固(gu)相(xiang)抗ti和酶(mei)標(biao)抗ti，將(jiang)大(da)分(fen)子(zi)抗原(yuan)分(fen)別(bie)制(zhi)備(bei)固相(xiang)抗原(yuan)和酶(mei)標(biao)抗原(yuan)結合(he)物。

2. 間接(jie)法(fa)

間接(jie)法(fa)常(chang)用於檢測抗ti，壹般(ban)的(de)操(cao)作步(bu)驟為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的(de)抗原(yuan)固著(zhu)於塑膠孔盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余(yu)的(de)抗原(yuan)。

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，檢體中若(ruo)含(han)有待(dai)測的(de)壹次(ci)抗ti，則其(qi)會(hui)與塑(su)膠孔盤上(shang)的(de)抗原(yuan)進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結。

c. 洗(xi)去(qu)多余(yu)待(dai)測檢體，加(jia)入帶(dai)有酶(mei)的(de)二次(ci)抗ti，與待(dai)測的(de)壹次(ci)抗ti鍵(jian)結。

d. 洗(xi)去(qu)多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二次(ci)抗ti，加(jia)入酶(mei)底(di)物使(shi)酶(mei)呈色，藉儀器（ELISA reader）測定(ding)塑膠盤中(zhong)的(de)吸(xi)光(guang)值（OD值），以(yi)評(ping)估(gu)有色終產物的(de)含(han)量即可測量(liang)待(dai)測抗ti的(de)含(han)量。

原(yuan)理：利(li)用(yong)酶標(biao)記(ji)的(de)抗抗ti以檢測已(yi)與固(gu)相(xiang)結合(he)的(de)受(shou)檢抗ti。

3. 競爭(zheng)法(fa)

競爭(zheng)法(fa)是(shi)壹種較少用(yong)到(dao)的(de)ELISA檢測機(ji)制(zhi)，壹般(ban)用於檢測小分(fen)子(zi)抗原(yuan)，其操(cao)作步(bu)驟為(wei)：

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹性(xing)的(de)抗ti固著(zhu)於塑膠孔盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去(qu)多余(yu)抗ti

b. 加(jia)入待(dai)測檢體，使(shi)檢體中的(de)待(dai)測抗原(yuan)與塑(su)膠孔盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結

c. 加(jia)入帶(dai)有酶(mei)的(de)抗原(yuan)，此(ci)抗原(yuan)也(ye)可與塑(su)膠孔盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性(xing)鍵(jian)結，由於塑膠孔盤上(shang)固(gu)著的(de)抗ti數量(liang)有限(xian)，因此(ci)當(dang)檢體中抗原(yuan)的(de)量(liang)越多，則(ze)帶(dai)有酶(mei)的(de)抗原(yuan)可鍵(jian)結的(de)固(gu)著抗ti就越少，亦(yi)即，兩種抗原(yuan)皆競(jing)相(xiang)與塑(su)膠孔盤上(shang)抗ti鍵(jian)結，即(ji)所(suo)謂競爭法(fa)之由來。

d. 洗(xi)去(qu)檢體與帶(dai)有酶(mei)的(de)抗原(yuan)，加(jia)入酶(mei)底(di)物使(shi)酶(mei)呈色，當檢體中抗原(yuan)量越多，代表塑膠孔盤內(nei)留下之帶(dai)有酶(mei)的(de)抗原(yuan)越少，顯(xian)色也(ye)就越淺。

e. 當需(xu)要偵(zhen)測無(wu)法(fa)獲得(de)兩種以上(shang)單(dan)壹性(xing)抗ti的(de)抗原(yuan)，或是(shi)不易(yi)得(de)到(dao)足夠的(de)純(chun)化抗ti以固(gu)著(zhu)於孔盤上(shang)時(shi)，壹般(ban)會考慮使(shi)用(yong)競爭(zheng)法(fa)ELISA。

常見(jian)問(wen)題解析(xi)：

1、試劑(ji)的(de)選擇：選擇優良試(shi)劑(ji)大家都是(shi)知(zhi)道(dao)的(de)，但(dan)是在(zai)檢測之前還應該(gai)提(ti)前半(ban)個(ge)小時(shi)將(jiang)試(shi)劑(ji)拿(na)到(dao)常溫下進(jin)行(xing)解凍(dong)。

2、加(jia)樣(yang)中(zhong)可(ke)能遇到(dao)的(de)問(wen)題。

3、洗(xi)板(ban)時(shi)容易造(zao)成(cheng)誤(wu)差(cha)。

4、顯(xian)色問(wen)題：使(shi)用(yong)了過(guo)期(qi)的(de)顯(xian)色劑或者(zhe)是(shi)顯(xian)色劑用過(guo)後放置時(shi)間太長(chang)，都有可(ke)能造成(cheng)顯(xian)色劑不顯(xian)色。

5、終止(zhi)反應：在(zai)加(jia)終止(zhi)劑的(de)時(shi)候(hou)由於傾倒(dao)速(su)度(du)快(kuai)，產(chan)生氣泡(pao)，造成(cheng)假陽性結果(guo)，所(suo)以在(zai)倒終止(zhi)劑的(de)時(shi)候(hou)要緩(huan)慢倒(dao)。

6、讀板(ban)：讀板(ban)的(de)時(shi)候(hou)首(shou)先(xian)應該(gai)保證板(ban)的(de)清(qing)潔幹(gan)凈(jing)。

訂購(gou)說(shuo)明(ming):

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