人C4結(jie)合蛋白(bai)(C4BP)ELISA試劑盒(he)

檢測原(yuan)理

試劑盒(he)采(cai)用(yong)雙抗原(yuan)壹-步夾心(xin)法(fa)酶聯免疫(yi)吸(xi)附試驗(ELISA) 。往預(yu)先(xian)包(bao)被病毒(du)性腹瀉(xie)病(bing)毒(du)抗ti的包(bao)被微孔(kong)中(zhong)，依(yi)次加入(ru)標(biao)本(ben)、HRP標記的檢測抗原(yuan)，經過溫(wen)育(yu)並徹di洗滌(di)。用(yong)底物(wu)TMB顯色，TMB在過氧(yang)化物(wu)酶的催化下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色(se)，並在suan的作用(yong)下(xia)轉化(hua)成(cheng)最終的黃色。用(yong)酶標儀(yi)在450NM波長下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(du)(OD值(zhi)) ，與CUTOFF值(zhi)相(xiang)比較，從(cong)而(er)判定(ding)標本(ben)中豬(zhu)病毒(du)性腹瀉(xie)病(bing)毒(du)(BVDV) 的存在與否(fou)。

樣品收集(ji)、處(chu)理(li)及(ji)保存(cun)方(fang)法(fa)

1.血清:使用(yong)不(bu)含(han)熱原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素(su)的試管(guan)，操(cao)作過(guo)程中(zhong)避免任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺激，收(shou)集血液(ye)後，3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)將血清和(he)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅速(su)小心(xin)地(di)分離(li)。

2.血漿(jiang): EDTA、檸(ning)檬suan鹽或肝素(su)抗凝。3000轉離(li)心(xin)30分鐘(zhong)取上(shang)清。

3.細(xi)胞(bao)上(shang)清液(ye): 3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)去除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。

4.組(zu)織勻(yun)漿(jiang):將組(zu)織加入(ru)適(shi)量(liang)生理鹽水(shui)搗碎(sui)。3000轉 離(li)心(xin)10分鐘(zhong)取上(shang)清。

5.保存:如果(guo)樣本(ben)收集後不(bu)及(ji)時檢(jian)測，請按壹次用(yong)量(liang)分裝(zhuang)，凍存於-20°C， 避免反(fan)

復凍融，在室(shi)溫下(xia)解(jie)凍並確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍。

自備(bei)物(wu)品

1.酶標儀(yi)(450NM)

2.高精度加樣(yang)器(qi)及(ji)槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒溫箱(xiang)

操(cao)作註意事(shi)項(xiang)

1.試劑盒(he)保存(cun)在2-8°C，使用(yong)前室溫(wen)平衡20分鐘(zhong)。從(cong)冰(bing)箱(xiang)取出(chu)的濃縮洗(xi)滌(di)液(ye)會有(you)結晶，這屬(shu)於正(zheng)常(chang)現象，水(shui)浴(yu)加熱使結(jie)晶完(wan)quan溶(rong)解後再(zai)使用(yong)。

2.實(shi)驗(yan)中不(bu)用(yong)的板條(tiao)應立即(ji)放(fang)回自(zi)封袋(dai)中，密封(低溫幹(gan)燥)保存。

3.預(yu)處(chu)理(li)後的樣本請按(an)照操(cao)作步(bu)驟(zhou)用(yong)樣ben稀(xi)釋(shi)ye適(shi)當(dang)稀(xi)釋(shi)以(yi)達(da)到(dao)試劑盒(he)的的最jia檢測效(xiao)果(guo)。.

4.嚴(yan)格(ge)按照說明(ming)書(shu)中標(biao)明(ming)的時間、加液(ye)量(liang)及(ji)順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育(yu)操(cao)作。

5.所有(you)液(ye)體(ti)組(zu)分使用(yong)前充分(fen)搖勻(yun)。

人C4結(jie)合蛋白(bai)(C4BP)ELISA試劑盒(he)

常用(yong)方(fang)法(fa)：

1. 夾心(xin)法(fa)：

夾心(xin)法(fa)常用(yong)於檢(jian)測大分子抗原(yuan)，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為(wei):

a. 將具有(you)專(zhuan)壹性的抗ti固著(zhu)（coating）於塑膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成後洗去多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測的抗原(yuan)，則其(qi)會與塑膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性鍵(jian)結

c. 洗去多余(yu)待(dai)測檢體(ti)，加入(ru)另(ling)壹種(zhong)對抗原(yuan)專(zhuan)壹的壹次(ci)抗ti，與待(dai)測抗原(yuan)進行(xing)鍵(jian)結

d. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結壹次(ci)抗ti，加入(ru)帶(dai)有(you)酶的二(er)次(ci)抗ti，與壹次(ci)抗ti鍵(jian)結

e. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶底物(wu)使酵素(su)呈(cheng)色(se)，以(yi)肉眼(yan)或儀(yi)器讀取(qu)呈(cheng)色(se)結(jie)果(guo)

原(yuan)理：針(zhen)對(dui)抗原(yuan)分子上(shang)2個不(bu)同(tong)抗原(yuan)決定(ding)簇的單克(ke)隆(long)抗ti分別作為(wei)固相抗ti和(he)酶標抗ti，將大分子抗原(yuan)分別(bie)制(zhi)備(bei)固相抗原(yuan)和(he)酶標抗原(yuan)結合(he)物(wu)。

2. 間接(jie)法(fa)

間接(jie)法(fa)常(chang)用(yong)於檢(jian)測抗ti，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將已知的抗原(yuan)固著(zhu)於(yu)塑膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成後洗去多余(yu)的抗原(yuan)。

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測的壹次(ci)抗ti，則其(qi)會與塑膠孔(kong)盤上(shang)的抗原(yuan)進行(xing)專(zhuan)壹性鍵(jian)結。

c. 洗去多余(yu)待(dai)測檢體(ti)，加入(ru)帶(dai)有(you)酶的二(er)次(ci)抗ti，與待(dai)測的壹次(ci)抗ti鍵(jian)結。

d. 洗去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結二(er)次(ci)抗ti，加入(ru)酶底物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測定(ding)塑膠盤中的吸(xi)光值(zhi)（OD值(zhi)），以(yi)評(ping)估有(you)色終產(chan)物(wu)的含(han)量(liang)即(ji)可測量(liang)待(dai)測抗ti的含(han)量(liang)。

原(yuan)理：利(li)用(yong)酶標記的抗抗ti以(yi)檢測已與固相結合(he)的受檢抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法(fa)

競(jing)爭(zheng)法(fa)是(shi)壹種(zhong)較少(shao)用(yong)到(dao)的ELISA檢測機制(zhi)，壹般(ban)用(yong)於檢(jian)測小分(fen)子抗原(yuan)，其(qi)操(cao)作步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將具有(you)專(zhuan)壹性的抗ti固著(zhu)於(yu)塑膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成後洗去多余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，使檢(jian)體(ti)中的待(dai)測抗原(yuan)與塑膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性鍵(jian)結

c. 加入(ru)帶(dai)有(you)酶的抗原(yuan)，此(ci)抗原(yuan)也可與塑膠孔(kong)盤上(shang)的抗ti進行專(zhuan)壹性鍵(jian)結，由於(yu)塑膠孔(kong)盤上(shang)固著(zhu)的抗ti數量(liang)有(you)限(xian)，因此(ci)當檢(jian)體(ti)中抗原(yuan)的量(liang)越多，則帶有(you)酶的抗原(yuan)可鍵(jian)結的固著(zhu)抗ti就越少(shao)，亦(yi)即(ji)，兩種(zhong)抗原(yuan)皆競(jing)相(xiang)與塑膠孔(kong)盤上(shang)抗ti鍵(jian)結，即(ji)所謂競(jing)爭(zheng)法(fa)之(zhi)由來。

d. 洗去檢體(ti)與帶有(you)酶的抗原(yuan)，加入(ru)酶底物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，當(dang)檢(jian)體(ti)中抗原(yuan)量(liang)越多，代(dai)表塑(su)膠孔(kong)盤內(nei)留下(xia)之(zhi)帶有(you)酶的抗原(yuan)越少(shao)，顯色也就越(yue)淺。

e. 當需要偵測無(wu)法獲(huo)得(de)兩種(zhong)以(yi)上(shang)單壹性抗ti的抗原(yuan)，或是不(bu)易得到(dao)足夠(gou)的純(chun)化(hua)抗ti以(yi)固著(zhu)於(yu)孔(kong)盤上(shang)時，壹般(ban)會考慮(lv)使用(yong)競(jing)爭(zheng)法(fa)ELISA。

標本要求 :

1．不(bu)能(neng)檢測含(han)NaN3的樣品，因NaN3辣(la)根(gen)過氧(yang)化物(wu)酶的（HRP）活(huo)性。

2．標本采(cai)集後盡(jin)早(zao)進行提(ti)取，提(ti)取按(an)相關(guan)文獻進行(xing)，提(ti)取後應盡(jin)快進行(xing)實(shi)驗(yan)。若(ruo)不(bu)能(neng)馬上(shang)進行(xing)試驗，可將標本放(fang)於-20℃保(bao)存，但應避免反(fan)復凍融。

3.各(ge)步加樣(yang)均(jun)應使用(yong)加樣(yang)器(qi)，並經常校(xiao)對其(qi)準(zhun)確(que)性，以(yi)避免試驗誤差(cha)。壹次(ci)加樣(yang)時(shi)間(jian)控

制(zhi)在(zai)5分(fen)鐘(zhong)內(nei)，如標本(ben)數量(liang)多，推(tui)薦使用(yong)排槍加樣(yang)。

4.請每(mei)次(ci)測定(ding)的同(tong)時做標準(zhun)曲(qu)線(xian)，做復孔(kong)。如標本(ben)中待(dai)測物(wu)質(zhi)含(han)量(liang)過高(樣本(ben)OD值(zhi)大(da)於

標準(zhun)品孔(kong)孔(kong)的OD值(zhi))，請(qing)先用(yong)樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)壹定(ding)倍數(n倍) 後再(zai)測定(ding)，計(ji)算(suan)時(shi)請(qing)

後乘以(yi)總稀(xi)釋(shi)倍數(xnx5)

5.封板膜只(zhi)限(xian)壹次(ci)性使用(yong)，以(yi)避免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。

6.底物(wu)請避光保(bao)存。

7.嚴(yan)格(ge)按照說明(ming)書(shu)的操(cao)作進(jin)行，試驗結(jie)果(guo)判定(ding)必須以(yi)酶標儀(yi)讀數(shu)為(wei)準(zhun).

8.所有(you)樣品，洗滌(di)液(ye)和(he)各(ge)種廢棄物(wu)都(dou)應按傳染(ran)物(wu)處(chu)理(li)。

9.本試劑不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組(zu)分不(bu)得混(hun)用(yong)。

訂購說明(ming):

※關(guan)於產(chan)品售價,由於(yu)市場(chang)的不(bu)穩定(ding)性,價格(ge)變動(dong)是必然的,但是我(wo)們可以(yi)提(ti)供(gong)當下(xia)公允的市場(chang)價(jia)格(ge),批(pi)量(liang)訂購還可享(xiang)受(shou)相(xiang)應的優惠活(huo)動;

※關(guan)於產(chan)品的具體(ti)信息(xi),本(ben)頁(ye)面(mian)展示的內(nei)容僅(jin)供(gong)參(can)考,而(er)詳(xiang)細(xi)的產(chan)品信息(xi),可以(yi)咨(zi)詢(xun)我(wo)們;

※關(guan)於運(yun)費問題(ti),批(pi)量(liang)訂購可免郵(you),本品采(cai)用(yong)低溫(wen)箱(xiang)冷(leng)凍保存;

※關(guan)於服(fu)務(wu),我(wo)們提(ti)供(gong)完(wan)整(zheng)的售前售後服(fu)務(wu),並貫(guan)穿(chuan)妳的整(zheng)個實(shi)驗(yan)過程,如遇(yu)技(ji)術(shu)問題(ti),可隨時聯系(xi)我(wo)們,我(wo)們真(zhen)誠(cheng)地(di)為(wei)您(nin)答疑解(jie)惑(huo)。

豬(zhu)白(bai)細(xi)胞(bao)介(jie)素(su)4(IL-4)ELISA試劑盒(he)

山(shan)羊(yang)表(biao)面(mian)活(huo)性蛋白(bai)A(SP-A)ELISA試劑盒(he)

豬(zhu)心(xin)肌肌鈣蛋白(bai)Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒(he)

豬(zhu)血管(guan)緊(jin)張(zhang)素(su)Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒(he)