人C多(duo)肽(CP)ELISA試(shi)劑盒(he)

人C多(duo)肽(CP)ELISA試(shi)劑盒(he)

ELISA法(fa)是免疫(yi)診(zhen)斷(duan)中(zhong)的壹項新技術(shu)，現(xian)已(yi)成(cheng)功地應用於(yu)多(duo)種(zhong)病(bing)原(yuan)微生(sheng)物所(suo)引起(qi)的傳(chuan)染病(bing)、寄生(sheng)蟲病(bing)及(ji)非(fei)傳(chuan)染病(bing)等(deng)方(fang)面的免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也(ye)已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)和小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)的定(ding)量測定，根(gen)據(ju)已(yi)經(jing)使用(yong)的結(jie)果(guo)，認(ren)為(wei)ELISA法(fa)具有靈敏、特異、簡單、快(kuai)速(su)、穩定及(ji)易(yi)於(yu)自(zi)動化(hua)操作等(deng)特點(dian)。不(bu)僅(jin)適用(yong)於(yu)臨床(chuang)標(biao)本的檢(jian)查(zha)，而(er)且由於(yu)壹天(tian)之(zhi)內(nei)可以檢(jian)查(zha)幾(ji)百甚(shen)至(zhi)上千份(fen)標本,因此(ci)，也適合(he)於(yu)血(xue)清流(liu)行病(bing)學(xue)調(tiao)查(zha)。本(ben)法不僅(jin)可以用(yong)來測定抗(kang)ti，而(er)且也可用於(yu)測定體(ti)液(ye)中的循(xun)環抗(kang)原(yuan)，所(suo)以也是(shi)壹種早(zao)期診斷的良(liang)好方(fang)法。因此(ci)ELISA法(fa)在生物醫學(xue)各領(ling)域(yu)的應(ying)用範(fan)圍日(ri)益擴大，

免(mian)責聲明(ming)

1. 試(shi)劑盒(he)僅(jin)供(gong)研(yan)究使用，不得用於(yu)臨床(chuang)實(shi)驗(yan)或(huo)人體(ti)實(shi)驗(yan)，否則所(suo)產生的壹切後(hou)果(guo)，由實(shi)驗(yan)者承(cheng)擔，本(ben)公司概不負(fu)責。

2. 嚴(yan)格(ge)按照(zhao)說明(ming)書(shu)操作，實驗(yan)者違反說(shuo)明(ming)書(shu)操作，後果(guo)由實(shi)驗(yan)者承(cheng)擔。

3. 產品(pin)特點(dian)

壹、高效(xiao)、靈敏、特異的抗(kang)ti；

二(er)、穩定的重(zhong)復性(xing)和可靠(kao)性(xing)；

三(san)、吸(xi)附(fu)性(xing)能好，空白(bai)值低，孔(kong)底透明(ming)度高的固(gu)相載體；

四(si)、適用(yong)血(xue)清、血(xue)漿(jiang)、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)液(ye)、細胞(bao)培(pei)養(yang)上清液(ye)、尿液(ye)等(deng)等(deng)多(duo)種(zhong)標(biao)本類(lei)型(xing)；

五(wu)、節省實(shi)驗(yan)經(jing)費。

elisa試(shi)劑盒(he)回(hui)收(shou)率是反應(ying)待(dai)測物在(zai)樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)過(guo)程中的損(sun)失(shi)的程度，損(sun)失(shi)越少(shao)，回(hui)收(shou)率越高，如(ru)果(guo)作標(biao)液(ye)1PPM，就是(shi)1毫(hao)克(ke)/升，而(er)作(zuo)出標準(zhun)數據(ju)為(wei)0.99毫(hao)克(ke)/升(sheng)，就(jiu)是說妳的回(hui)收(shou)率是99%，這(zhe)個與真(zhen)實成(cheng)分(fen)有密切(qie)的關(guan)系，說明(ming)方(fang)法的準(zhun)確(que)度。比如水中總無機(ji)氯(lv)含(han)量測定，樣(yang)品(pin)水中含(han)有無機(ji)氯(lv)20mg/L，取100mL被(bei)測水樣品(pin)，加入(ru)0.1mL濃(nong)度為(wei)10mg/mL的含(han)無機(ji)氯(lv)標準(zhun)樣(yang)品(pin)，測定時(shi)忽(hu)略(lve)體積(ji)變(bian)化(hua)，如(ru)果(guo)測定出樣品(pin)中無機(ji)氯(lv)為(wei)29.8mg/L，則認(ren)為(wei)回(hui)收(shou)率為(wei)99%。

人C多(duo)肽(CP)ELISA試(shi)劑盒(he)

組(zu)成(cheng)結構(gou)

1、血(xue)清：操作過程中避免任何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激。使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱原和內du素的試(shi)管(guan)。收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後，1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小心地分(fen)離(li)。

2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬suan鹽、肝素血(xue)漿(jiang)可用於(yu)檢測。1000×g離(li)心30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒。

3、細(xi)胞上清液(ye)：1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和聚合(he)物。

4、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織加入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽水搗碎。1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)，取上清液(ye)。

5、保存(cun)：如果(guo)樣品(pin)不立即(ji)使(shi)用(yong)，應將(jiang)其(qi)分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70℃保(bao)存(cun)，避免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡可能的不(bu)要使用(yong)溶血(xue)或(huo)高血(xue)脂血(xue)。如果(guo)血(xue)清中(zhong)大量(liang)顆(ke)粒，檢(jian)測前(qian)先(xian)離(li)心或(huo)過濾。不要在37℃或(huo)更高的溫度加熱解(jie)凍(dong)。應在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍(dong)並確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均勻(yun)地充分(fen)解(jie)凍(dong)。

試(shi)劑盒(he)成(cheng)分(fen)

1 預包被(bei)板(ban): 抗(kang)小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素-6兔子(zi)IgG,親合純化(hua) 96T

2 酶(mei)標(biao)記抗(kang)ti: (30倍濃(nong)縮)HRP標(biao)記抗(kang)小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素-6兔子(zi)IgG,親合純化(hua) 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品(pin): 重(zhong)組小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖液(ye): 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記抗(kang)ti稀(xi)釋液(ye): 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色劑: TMB底物液(ye) 15mL x 1

7 終止(zhi)液(ye): 1N硫(liu)suan 12mL x 1

8 濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye): (40倍濃(nong)縮) 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明(ming) 1實(shi)驗(yan)所(suo)需(xu)器(qi)材(cai)(但試(shi)劑盒(he)沒有提供(gong)) 酶(mei)標(biao)儀(450nm) 微移(yi)液(ye)管(guan)及(ji)其(qi)吸嘴 量筒及(ji)燒(shao)杯 去離(li)子(zi)水 冰箱(xiang)(4°C) 坐(zuo)標(biao)紙(zhi)(log/log) 吸(xi)水紙 試(shi)管(guan)(用(yong)於(yu)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)) 溫育(yu)箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗(xi)瓶 (用(yong)於(yu)洗(xi)板) 壹次性(xing)試(shi)劑管(guan)(用(yong)於(yu)濃(nong)縮酶(mei)標(biao)記抗(kang)ti和顯(xian)色劑)

實(shi)驗(yan)詳細(xi)操作程序(xu)

1.  從室(shi)溫平(ping)衡(heng)20min後(hou)的鋁(lv)箔(bo)袋(dai)中取出所(suo)需(xu)板(ban)條，剩余(yu)板條(tiao)用(yong)自(zi)封袋(dai)密(mi)封放(fang)回(hui)4℃。

2.  設(she)置(zhi)標準(zhun)品(pin)孔和樣本(ben)孔(kong)，標準(zhun)品(pin)孔各(ge)加不(bu)同(tong)濃(nong)度的標(biao)準(zhun)品(pin)50μL；樣本(ben)孔加待(dai)測樣本(ben)50μL。

3.  樣(yang)本孔先(xian)加待(dai)測樣本(ben)10μL，再(zai)加樣(yang)ben稀(xi)釋ye40μL；空白(bai)孔不(bu)加。

4.  除(chu)空白(bai)孔外，標準(zhun)品(pin)孔和樣本(ben)孔(kong)中每孔加入(ru)辣(la)根(gen)過氧化(hua)物酶(mei)（HRP）標(biao)記的檢(jian)測抗(kang)體(ti)100μL，用封板(ban)膜封住(zhu)反應(ying)孔，37℃水浴鍋或(huo)恒溫箱(xiang)溫育(yu)60min。

5.  棄去液(ye)體，吸(xi)水紙上拍幹(gan)，每孔加滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi)1min，甩去(qu)洗(xi)滌(di)液(ye)，吸水紙上拍幹(gan)，如(ru)此重(zhong)復洗(xi)板5次(ci)（也可用洗(xi)板機(ji)洗(xi)板）。

6.  每孔加入(ru)底物A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光孵(fu)育15min。

7.  每孔加入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μL，15min內，在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測定各(ge)孔的OD值。

常用方(fang)法及(ji)原(yuan)理如下：

1. 夾心法(fa)：

夾心法(fa)常用於(yu)檢測大分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)，壹般的操作步驟為(wei):

a. 將(jiang)具(ju)有專(zhuan)壹性(xing)的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)（coating）於(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)抗(kang)ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，檢體(ti)中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測的抗(kang)原(yuan)，則其會(hui)與(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上的抗(kang)ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結(jie)

c. 洗(xi)去多(duo)余(yu)待(dai)測檢體(ti)，加入(ru)另(ling)壹種對抗(kang)原(yuan)專(zhuan)壹的壹次抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測抗(kang)原(yuan)進行鍵結

d. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結壹次抗(kang)ti，加入(ru)帶有酶(mei)的二(er)次抗(kang)ti，與(yu)壹次抗(kang)ti鍵(jian)結

e. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結二(er)次抗(kang)ti，加入(ru)酶(mei)底物使(shi)酵(jiao)素呈色，以(yi)肉(rou)眼或(huo)儀器(qi)讀(du)取呈(cheng)色結(jie)果(guo)

原(yuan)理：針對抗(kang)原(yuan)分(fen)子(zi)上2個不同(tong)抗(kang)原(yuan)決定(ding)簇的單(dan)克隆(long)抗(kang)ti分(fen)別作為(wei)固(gu)相(xiang)抗(kang)ti和酶(mei)標(biao)抗(kang)ti，將(jiang)大分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)分(fen)別制備(bei)固(gu)相抗(kang)原(yuan)和酶(mei)標(biao)抗(kang)原(yuan)結合物。

2. 間(jian)接法

間(jian)接法常用於(yu)檢測抗(kang)ti，壹般的操作步驟為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知的抗(kang)原(yuan)固著(zhu)於(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)的抗(kang)原(yuan)。

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，檢體(ti)中(zhong)若(ruo)含(han)有待(dai)測的壹次抗(kang)ti，則其會(hui)與(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上的抗(kang)原(yuan)進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結(jie)。

c. 洗(xi)去多(duo)余(yu)待(dai)測檢體(ti)，加入(ru)帶有酶(mei)的二(er)次抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測的壹次抗(kang)ti鍵(jian)結。

d. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結二(er)次抗(kang)ti，加入(ru)酶(mei)底物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測定塑(su)膠(jiao)盤(pan)中的吸(xi)光值（OD值），以評估(gu)有色終(zhong)產物的含(han)量即(ji)可測量待(dai)測抗(kang)ti的含(han)量。

原(yuan)理：利(li)用酶(mei)標(biao)記的抗(kang)抗(kang)ti以(yi)檢測已(yi)與(yu)固(gu)相(xiang)結(jie)合的受(shou)檢抗(kang)ti。

3. 競爭法

競爭法是壹種較(jiao)少(shao)用到的ELISA檢(jian)測機(ji)制，壹般用(yong)於(yu)檢測小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)，其操作步驟為(wei)：

a. 將(jiang)具(ju)有專(zhuan)壹性(xing)的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)於(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)抗(kang)ti

b. 加入(ru)待(dai)測檢體(ti)，使檢(jian)體(ti)中(zhong)的待(dai)測抗(kang)原(yuan)與塑膠(jiao)孔(kong)盤上的抗(kang)ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結(jie)

c. 加入(ru)帶有酶(mei)的抗(kang)原(yuan)，此抗(kang)原(yuan)也可與塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上的抗(kang)ti進行專(zhuan)壹性(xing)鍵結(jie)，由於(yu)塑膠(jiao)孔(kong)盤上固著(zhu)的抗(kang)ti數量有限，因此(ci)當(dang)檢體中(zhong)抗(kang)原(yuan)的量(liang)越多(duo)，則帶有酶(mei)的抗(kang)原(yuan)可鍵結(jie)的固(gu)著(zhu)抗(kang)ti就(jiu)越少，亦(yi)即，兩(liang)種(zhong)抗(kang)原(yuan)皆(jie)競相與塑膠(jiao)孔(kong)盤上抗(kang)ti鍵(jian)結，即所(suo)謂競爭法之(zhi)由來。

d. 洗(xi)去檢(jian)體與帶有酶(mei)的抗(kang)原(yuan)，加入(ru)酶(mei)底物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色，當(dang)檢體中(zhong)抗(kang)原(yuan)量越多(duo)，代(dai)表塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤內(nei)留(liu)下之(zhi)帶有酶(mei)的抗(kang)原(yuan)越少，顯(xian)色也(ye)就(jiu)越(yue)淺(qian)。

e. 當(dang)需(xu)要偵(zhen)測無法獲得兩種以(yi)上單壹性(xing)抗(kang)ti的抗(kang)原(yuan)，或(huo)是不(bu)易(yi)得到足夠的純化(hua)抗(kang)ti以(yi)固著(zhu)於(yu)孔盤上時(shi)，壹般會(hui)考(kao)慮(lv)使用(yong)競爭法ELISA。

常見問(wen)題(ti)解(jie)析：

1、試(shi)劑的選(xuan)擇：選(xuan)擇優良(liang)試(shi)劑大家(jia)都(dou)是知道(dao)的，但是(shi)在(zai)檢(jian)測之(zhi)前(qian)還(hai)應(ying)該(gai)提前(qian)半個小時(shi)將(jiang)試(shi)劑拿到(dao)常溫下進行解(jie)凍(dong)。

2、加樣(yang)中(zhong)可能遇(yu)到的問(wen)題(ti)。

3、洗(xi)板時(shi)容易(yi)造成(cheng)誤(wu)差(cha)。

4、顯(xian)色問(wen)題(ti)：使(shi)用了過期的顯(xian)色劑或(huo)者是(shi)顯(xian)色劑用過(guo)後放(fang)置(zhi)時(shi)間太(tai)長(chang)，都有可能造成(cheng)顯(xian)色劑不顯(xian)色。

5、終(zhong)止(zhi)反應(ying)：在加終(zhong)止(zhi)劑的時(shi)候由於(yu)傾倒速(su)度快(kuai)，產生氣泡，造成(cheng)假(jia)陽(yang)性(xing)結果(guo)，所(suo)以在倒(dao)終(zhong)止(zhi)劑的時(shi)候要緩(huan)慢倒(dao)。

6、讀(du)板：讀(du)板的時(shi)候首(shou)先(xian)應(ying)該(gai)保(bao)證板的清(qing)潔幹凈(jing)。

訂(ding)購說明(ming):

※關(guan)於(yu)產品(pin)售(shou)價(jia),由於(yu)市場(chang)的不(bu)穩定性(xing),價格(ge)變(bian)動(dong)是必然(ran)的,但是(shi)我(wo)們(men)可以提(ti)供(gong)當(dang)下公允(yun)的市(shi)場(chang)價格(ge),批量(liang)訂(ding)購還可享受(shou)相應(ying)的優惠(hui)活動;

※關(guan)於(yu)產品(pin)的具(ju)體信息,本頁(ye)面(mian)展示(shi)的內(nei)容僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),而(er)詳(xiang)細(xi)的產品(pin)信息,可以咨(zi)詢我(wo)們(men);

※關(guan)於(yu)運(yun)費問(wen)題(ti),批(pi)量訂(ding)購可免郵(you),本(ben)品(pin)采用低(di)溫箱(xiang)冷(leng)凍(dong)保存(cun);

※關(guan)於(yu)服(fu)務(wu),我(wo)們(men)提(ti)供(gong)完(wan)整的售(shou)前(qian)售(shou)後(hou)服(fu)務(wu),並貫(guan)穿(chuan)妳的整個實驗(yan)過程,如遇(yu)技術(shu)問(wen)題(ti),可隨時(shi)聯(lian)系我(wo)們(men),我(wo)們(men)真(zhen)誠地為(wei)您答(da)疑(yi)解(jie)惑。

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