| 品(pin)牌(pai) | 其(qi)他品(pin)牌(pai) | 貨(huo)號(hao) | RQ-TW29326 |
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| 規(gui)格(ge) | 96T/48T | 供貨(huo)周期(qi) | 現貨(huo) |
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| 主(zhu)要(yao)用(yong)途 | 科研(yan)試驗(yan) | 品(pin)牌(pai) | 瑞清 |
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| 檢(jian)測(ce)樣本 | 血清.血漿.組(zu)織.相關(guan)液體(ti)等 | 產(chan)品(pin)優勢(shi) | 靈(ling)敏(min)性高(gao)特(te)異性強(qiang) |
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| 售(shou)後 | 專屬服務(wu) | | |
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我司產(chan)品(pin)齊(qi)全(quan)，因(yin)上架(jia)數量(liang)有(you)限(xian)，未能(neng)全(quan)部上(shang)架(jia)，如(ru)需(xu)訂購或者產品(pin)詳(xiang)情(qing)請直(zhi)接(jie)聯系我司銷(xiao)售(shou)！
大(da)鼠Dickkopf 1抗體(ti)（DKK1 Ab）試劑(ji)盒
僅供體(ti)外(wai)研(yan)究(jiu)使用(yong)，不(bu)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷!
本試劑(ji)盒用(yong)於體(ti)外(wai)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)血清、血漿、組(zu)織勻漿及相關(guan)液體(ti)樣本中大(da)鼠 腫瘤壞死因(yin)子a（TNF-a）的(de)含量(liang)。
有(you)效(xiao)期(qi)：6個月(yue)
保存(cun)條件(jian)：2-8℃
[實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li)]
試(shi)劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗體(ti)壹(yi)步(bu)夾心法(fa)酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附試驗(yan)（ELISA）。往(wang)預先(xian)包(bao)被大鼠 腫瘤壞死因(yin)子a（TNF-a）捕(bu)獲抗體(ti)的包(bao)被微(wei)孔中，依(yi)次(ci)加(jia)入(ru)標(biao)本、標(biao)準品(pin)、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗體(ti)，經(jing)過溫(wen)育(yu)並(bing)徹(che)di洗滌(di)。用(yong)底物TMB顯(xian)色(se)，TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的催(cui)化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸(suan)的作(zuo)用(yong)下轉化(hua)成(cheng)最終的(de)黃色(se)。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中的(de)大(da)鼠 腫瘤壞死因(yin)子a（TNF-a）呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm 波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)（OD 值），計(ji)算樣品(pin)濃度(du)。
[樣本處理及要求(qiu)]
1. 血清：將(jiang)收集於血清分(fen)離(li)管(guan)的全(quan)血標(biao)本在(zai)室(shi)溫(wen)放置(zhi)2小(xiao)時(shi)或4℃過(guo)夜(ye)，然後(hou)1000×g離(li)心20 分鐘(zhong)，取上清即(ji)可，或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融。
2. 血漿：用(yong)EDTA或肝素(su)作為(wei)抗凝(ning)劑(ji)采(cai)集標(biao)本，並(bing)將(jiang)標(biao)本在(zai)采(cai)集後的(de)30分鐘(zhong)內於2-8℃ 1000×g離(li)心15分鐘(zhong)，取上清即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上(shang)清置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融。
3. 組(zu)織勻漿：用(yong)預冷的(de)PBS (0.01M, pH=7.4)沖(chong)洗組(zu)織，去除(chu)殘留血液（勻漿中裂(lie)解(jie)的(de)紅細胞(bao)會(hui)影響(xiang)測(ce)量(liang)結(jie)果），稱(cheng)重後將(jiang)組(zu)織jian碎(sui)。將剪(jian)碎(sui)的組(zu)織與對(dui)應(ying)體(ti)積的(de)PBS（壹(yi)般按1:9的重(zhong)量(liang)體(ti)積比(bi)，比(bi)如1g的(de)組(zu)織樣品(pin)對(dui)應(ying)9mL的PBS，具體(ti)體(ti)積可根(gen)據實驗(yan)需(xu)要(yao)適(shi)當(dang)調(tiao)整，並(bing)做(zuo)好(hao)記(ji)錄(lu)。推(tui)薦(jian)在(zai)PBS中加(jia)入(ru)蛋(dan)白酶(mei)抑制劑）加(jia)入(ru)玻璃(li)勻漿器中，於(yu)冰(bing)上(shang)充分(fen)研(yan)磨。為(wei)了(le)進壹(yi)步(bu)裂解(jie)組(zu)織細胞(bao)，可以(yi)對勻漿液進行超(chao)聲破(po)碎(sui)，或反(fan)復凍(dong)融。最後將(jiang)勻漿液於5000×g離(li)心5~10分鐘(zhong)，取上清檢(jian)測(ce)。
4. 細胞(bao)培(pei)養物(wu)上(shang)清或(huo)其(qi)它(ta)生物標(biao)本：請1000×g離(li)心20分鐘(zhong)，取上清即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上(shang)清置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融。
註(zhu)：標(biao)本溶血會(hui)影響(xiang)最後檢(jian)測(ce)結果，因(yin)此溶(rong)血標(biao)本不(bu)宜(yi)進行此項(xiang)檢(jian)測(ce)。
[需要(yao)而(er)未提(ti)供的(de)試劑和器材(cai)]
1.酶(mei)標(biao)儀（450nm）
2.高(gao)精(jing)度(du)加(jia)樣(yang)器及槍頭(tou)：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒(heng)溫(wen)箱
4.蒸餾水(shui)或去離子水
[試(shi)劑盒組(zu)成(cheng)]
備(bei)註(zhu)：
1. 標(biao)準品(pin)濃度(du)依次(ci)為(wei)：4000、2000、1000、500、250、125 pg/mL
2. 經(jing)過大(da)量(liang)正(zheng)常標(biao)本檢(jian)驗(yan)，標(biao)本的正(zheng)常濃度(du)值均(jun)在(zai)試(shi)劑盒提(ti)供的檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)內，實驗(yan)過(guo)程(cheng)中直(zhi)接(jie)取50μL樣(yang)本上樣(yang)即可。當(dang)有(you)部分(fen)樣(yang)本值超(chao)過最大標(biao)準品(pin)濃度(du)時(shi)，可用(yong)樣本稀釋ye將(jiang)標(biao)本進行適(shi)當稀(xi)釋後(hou)再進行實(shi)驗(yan)。
大(da)鼠Dickkopf 1抗體(ti)（DKK1 Ab）試劑(ji)盒
[註(zhu)意(yi)事項(xiang)]
1.嚴格按照規(gui)定(ding)的時(shi)間和溫(wen)度(du)進行溫(wen)育(yu)以(yi)保證(zheng)準確(que)結(jie)果。所有試(shi)劑(ji)都必(bi)須(xu)在(zai)使用(yong)前達(da)到室(shi)溫(wen)20-25℃。使用(yong)後立即冷藏保存試劑(ji)。
2.洗板(ban)不(bu)正(zheng)確(que)可以(yi)導致(zhi)不(bu)準確(que)的(de)結(jie)果。在(zai)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)前確(que)保(bao)盡量(liang)吸(xi)幹(gan)孔內液體(ti)。溫(wen)育(yu)過(guo)程(cheng)中不(bu)要讓(rang)微(wei)孔幹(gan)燥(zao)掉。
3.消除(chu)板底(di)殘留的(de)液體(ti)和手(shou)指(zhi)印(yin)，否(fou)則(ze)影響(xiang)OD值(zhi)。
4.底物(wu)顯(xian)色(se)液應(ying)呈無色或(huo)很淺(qian)的(de)顏(yan)色(se)，已(yi)經(jing)變(bian)藍的(de)底物(wu)液不(bu)能(neng)使用(yong)。
5.避(bi)免(mian)試劑(ji)和標(biao)本的交叉(cha)汙染(ran)以(yi)免(mian)造(zao)成錯誤結果。
6.在(zai)儲(chu)存和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射(she)。
7.平衡至室(shi)溫(wen)後再打(da)開密封袋以(yi)防水滴凝(ning)聚在(zai)冷板(ban)條上。
8.任(ren)何反(fan)應(ying)試劑(ji)不(bu)能(neng)接(jie)觸(chu)漂(piao)白(bai)溶(rong)劑或漂(piao)白(bai)溶(rong)劑所散發(fa)的強(qiang)烈氣體(ti)。任何(he)漂(piao)白(bai)成(cheng)分都會(hui)破壞(huai)試劑盒中反(fan)應(ying)試劑(ji)的(de)生(sheng)物活(huo)性(xing)。
9.不(bu)能(neng)使用(yong)過期(qi)產(chan)品(pin)。
10.如(ru)果可能(neng)傳播(bo)疾病，所有的(de)樣(yang)品(pin)都(dou)應(ying)管理(li)好(hao)，按照規(gui)定(ding)的程(cheng)序處理樣(yang)品(pin)和(he)檢(jian)測(ce)裝置。
[試劑準備(bei)]
試(shi)劑(ji)盒從(cong)冷藏環境中取(qu)出應(ying)在(zai)室(shi)溫(wen)平衡後(hou)方(fang)可使用(yong)。
20×洗滌(di)緩沖(chong)液的稀(xi)釋：蒸餾水(shui)按1：20稀釋，即(ji)1份20×洗滌(di)緩沖(chong)液加(jia)19份(fen)蒸餾水(shui)。
[操(cao)作步(bu)驟]
1. 從(cong)室(shi)溫(wen)平衡20min後(hou)的鋁箔(bo)袋中取(qu)出所需板(ban)條(tiao)，剩余(yu)板(ban)條用(yong)自(zi)封袋密(mi)封放回4℃。
2. 設置標(biao)準品(pin)孔(kong)和(he)樣本孔，標(biao)準品(pin)孔(kong)各(ge)加(jia)不(bu)同濃度(du)的標(biao)準品(pin)50μL；
3. 樣(yang)本孔中加(jia)入(ru)待測(ce)樣本50μL；空白(bai)孔不(bu)加(jia)。
4. 除(chu)空白(bai)孔外(wai)，標(biao)準品(pin)孔(kong)和(he)樣本孔中每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)辣根過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標(biao)記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗體(ti)100μL，用(yong)封板膜(mo)封住(zhu)反(fan)應(ying)孔，37℃水(shui)浴鍋(guo)或(huo)恒(heng)溫(wen)箱溫(wen)育(yu)60min。
5. 棄去液體(ti)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液（350μL），靜置1min，甩去洗滌(di)液，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，如(ru)此重(zhong)復(fu)洗板(ban)5次(ci)（也可用(yong)洗板(ban)機洗板(ban)）。
6. 每(mei)孔加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光孵(fu)育(yu)15min。
7. 每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)終止(zhi)液50μL，15min內，在(zai)450nm波(bo)長處測(ce)定(ding)各(ge)孔(kong)的OD值。
[實驗(yan)結(jie)果計(ji)算]
試(shi)劑盒以(yi)所測(ce)標(biao)準品(pin)的(de)OD值(zhi)為(wei)橫坐(zuo)標(biao)，標(biao)準品(pin)的(de)濃度(du)值為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，在(zai)坐(zuo)標(biao)紙(zhi)上(shang)或用(yong)相關(guan)軟件(jian)繪(hui)制標(biao)準曲線(xian)，並(bing)得(de)到(dao)直(zhi)線(xian)回歸(gui)方(fang)程(cheng)，將樣(yang)品(pin)的(de)OD值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)，計算(suan)出樣品(pin)的(de)濃度(du)。
[試劑(ji)盒性(xing)能(neng)]
1. 檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)：125 pg/mL – 4000 pg/mL。
2. 靈(ling)敏(min)度(du)：最di檢(jian)測(ce)濃度(du)小(xiao)於(yu)10 pg/mL。
3. 特(te)異性：不(bu)與其(qi)它(ta)可溶(rong)性(xing)結(jie)構(gou)類似物交叉(cha)反(fan)應(ying)。
4. 重復(fu)性(xing)：板(ban)內變(bian)異系數小(xiao)於(yu)10% ，板(ban)間變(bian)異系數小(xiao)於(yu)15% 。
[說(shuo)明(ming)]
1.由於(yu)現有條件(jian)及科學(xue)技(ji)術水(shui)平尚不(bu)能(neng)對(dui)所有供(gong)貨(huo)商(shang)提(ti)供(gong)的所有原(yuan)料(liao)進行全(quan)面的(de)鑒定(ding)與分(fen)析(xi)，本產品(pin)可能(neng)存(cun)在(zai)壹(yi)定(ding)的質(zhi)量(liang)技(ji)術風(feng)險(xian)。
2.最終的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果與試(shi)劑(ji)的有效性、實驗(yan)者(zhe)的(de)相(xiang)關(guan)操(cao)作以(yi)及當時(shi)的實(shi)驗(yan)環境密(mi)切(qie)相關(guan)，請務(wu)必(bi)準備(bei)充足的標(biao)本備份(fen)。
3.不(bu)同批(pi)次(ci)的(de)同壹(yi)產品(pin)可能(neng)會(hui)有少(shao)許(xu)差(cha)別，如：檢(jian)測(ce)限(xian)、靈敏(min)度(du)以(yi)及顯(xian)色(se)時(shi)間等，請(qing)依(yi)據試劑(ji)盒內說明(ming)書進行實(shi)驗(yan)操(cao)作，網(wang)站電(dian)子版說明(ming)書僅作參考(kao)。
4.只有(you)全(quan)部使用(yong)本試劑(ji)盒配套(tao)試劑(ji)才能(neng)保(bao)證(zheng)檢(jian)測(ce)效果，不(bu)能(neng)混用(yong)其他制造(zao)商的(de)產品(pin)。只(zhi)有(you)嚴格(ge)遵守(shou)本試劑(ji)盒的(de)實驗(yan)說(shuo)明(ming)才會(hui)得(de)到(dao)最佳的檢(jian)測(ce)結果。
5.本公(gong)司(si)只(zhi)對(dui)試劑盒本身負(fu)責，不(bu)對因(yin)使用(yong)該(gai)試劑盒所造(zao)成的(de)樣本消耗(hao)負(fu)責，請(qing)使用(yong)者使用(yong)前充分(fen)考(kao)慮到樣(yang)本的可能(neng)使用(yong)量(liang)，預(yu)留充足的樣本。
6.使用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解液制備(bei)的(de)組(zu)織勻漿或(huo)細胞(bao)提(ti)取(qu)液可能(neng)會(hui)由於(yu)某些(xie)化(hua)學(xue)物(wu)質的引入(ru)導致(zhi)ELISA實(shi)驗(yan)結(jie)果偏差。
7.若(ruo)樣本為(wei)細胞(bao)培(pei)養上(shang)清，因(yin)該(gai)類樣本幹擾(rao)因(yin)素(su)較多(duo)，如(ru)：細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數(shu)量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間等，所以(yi)可能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出的情況。
8.某些(xie)天然蛋(dan)白或重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，包(bao)括原核(he)及真核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可能(neng)因(yin)為(wei)與本產品(pin)所使用(yong)的檢(jian)測(ce)抗體(ti)及捕獲抗體(ti)不(bu)匹(pi)配，而(er)不(bu)被檢(jian)測(ce)出。
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2023-09-06 
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