| 品牌(pai) | 其他品牌(pai) | 貨號(hao) | RQ-TW29325 |
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| 規格 | 96T/48T | 供貨周期 | 現貨 |
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| 主要(yao)用(yong)途 | 科(ke)研試驗(yan) | 品牌(pai) | 瑞(rui)清(qing) |
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| 檢(jian)測(ce)樣(yang)本 | 血清.血漿.組(zu)織.相(xiang)關液體(ti)等 | 產(chan)品優(you)勢(shi) | 靈敏(min)性高特(te)異(yi)性強 |
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| 售(shou)後(hou) | 專(zhuan)屬(shu)服務(wu) | | |
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我(wo)司產品齊(qi)全(quan)，因上架數量(liang)有限(xian)，未(wei)能全(quan)部上架，如(ru)需(xu)訂(ding)購(gou)或者(zhe)產(chan)品詳情(qing)請(qing)直(zhi)接聯系(xi)我(wo)司銷售(shou)！
大(da)鼠(shu)noggin蛋(dan)白（NOG）試劑(ji)盒
僅供體(ti)外(wai)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)!
本試劑(ji)盒用(yong)於體(ti)外(wai)定量(liang)檢測(ce)血清、血漿、組(zu)織勻(yun)漿及(ji)相關液體(ti)樣(yang)本中(zhong)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因子(zi)a（TNF-a）的(de)含量(liang)。
有效期：6個月(yue)
保(bao)存條件：2-8℃
[實(shi)驗原(yuan)理]
試劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙抗(kang)體(ti)壹步夾心(xin)法(fa)酶(mei)聯免疫吸(xi)附(fu)試驗(yan)（ELISA）。往(wang)預先(xian)包(bao)被(bei)大(da)鼠 腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因子(zi)a（TNF-a）捕獲抗(kang)體(ti)的(de)包(bao)被(bei)微(wei)孔中(zhong)，依次(ci)加(jia)入(ru)標本、標準品、HRP標記的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)，經過(guo)溫(wen)育(yu)並(bing)徹di洗(xi)滌(di)。用(yong)底物TMB顯(xian)色，TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)催化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色，並(bing)在(zai)酸的(de)作用(yong)下(xia)轉化(hua)成(cheng)最終的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深淺和(he)樣(yang)品中(zhong)的(de)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤(liu)壞(huai)死(si)因子(zi)a（TNF-a）呈(cheng)正相(xiang)關。用(yong)酶標儀(yi)在450nm 波(bo)長下(xia)測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)（OD 值(zhi)），計(ji)算樣(yang)品濃度(du)。
[樣(yang)本處(chu)理及(ji)要(yao)求(qiu)]
1. 血清：將(jiang)收(shou)集(ji)於(yu)血清分(fen)離(li)管的(de)全(quan)血標本在(zai)室溫(wen)放置2小時(shi)或4℃過(guo)夜，然(ran)後(hou)1000×g離(li)心(xin)20 分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)，或將(jiang)上清置於-20℃或-80℃保(bao)存，但(dan)應避免反(fan)復凍(dong)融。
2. 血漿：用(yong)EDTA或肝素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝劑(ji)采(cai)集(ji)標本，並(bing)將標本在(zai)采(cai)集(ji)後(hou)的(de)30分鐘(zhong)內(nei)於2-8℃ 1000×g離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上清置於-20℃或-80℃保(bao)存，但(dan)應避免反(fan)復凍(dong)融。
3. 組(zu)織勻(yun)漿：用(yong)預冷(leng)的(de)PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗(xi)組(zu)織，去除(chu)殘留血液（勻(yun)漿中(zhong)裂解的(de)紅細胞會影(ying)響(xiang)測(ce)量(liang)結果(guo)），稱重(zhong)後(hou)將(jiang)組織jian碎(sui)。將剪(jian)碎(sui)的(de)組織與(yu)對(dui)應體(ti)積(ji)的(de)PBS（壹般(ban)按(an)1:9的(de)重量(liang)體(ti)積(ji)比，比(bi)如(ru)1g的(de)組織樣(yang)品對(dui)應9mL的(de)PBS，具(ju)體(ti)體(ti)積(ji)可(ke)根據實(shi)驗需(xu)要(yao)適(shi)當調(tiao)整，並(bing)做好(hao)記錄(lu)。推薦在PBS中(zhong)加入(ru)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制劑）加(jia)入玻(bo)璃勻(yun)漿器中(zhong)，於冰(bing)上充分研磨(mo)。為(wei)了(le)進(jin)壹(yi)步裂解組(zu)織細胞，可(ke)以對(dui)勻(yun)漿液進(jin)行(xing)超聲破(po)碎(sui)，或反(fan)復凍融。最後(hou)將(jiang)勻(yun)漿液於(yu)5000×g離心(xin)5~10分(fen)鐘(zhong)，取上清檢測(ce)。
4. 細胞培養物上清或其它(ta)生(sheng)物標本：請(qing)1000×g離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上清置於-20℃或-80℃保(bao)存，但(dan)應避免反(fan)復凍(dong)融。
註(zhu)：標本溶(rong)血會影(ying)響(xiang)最後(hou)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)，因此(ci)溶(rong)血標本不宜(yi)進(jin)行(xing)此(ci)項(xiang)檢(jian)測(ce)。
[需(xu)要(yao)而未(wei)提供(gong)的(de)試劑(ji)和(he)器材]
1.酶(mei)標儀(yi)（450nm）
2.高精(jing)度加樣(yang)器及(ji)槍(qiang)頭(tou)：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒(heng)溫(wen)箱(xiang)
4.蒸餾水(shui)或去離子(zi)水(shui)
[試劑(ji)盒組(zu)成(cheng)]
備(bei)註：
1. 標準品濃度(du)依次(ci)為(wei)：4000、2000、1000、500、250、125 pg/mL
2. 經(jing)過大量(liang)正常(chang)標本檢(jian)驗，標本的(de)正常(chang)濃度(du)值均在試劑(ji)盒提供(gong)的(de)檢測(ce)範(fan)圍內(nei)，實(shi)驗過(guo)程中(zhong)直接取50μL樣(yang)本上樣(yang)即(ji)可(ke)。當有部(bu)分(fen)樣(yang)本值超過最大(da)標準品濃度(du)時，可(ke)用(yong)樣(yang)本稀(xi)釋(shi)ye將標本進(jin)行(xing)適(shi)當稀(xi)釋(shi)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)實(shi)驗。
大(da)鼠noggin蛋(dan)白（NOG）試劑(ji)盒
[註(zhu)意事項]
1.嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)規定的(de)時間和(he)溫(wen)度(du)進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)以保證準確結(jie)果(guo)。所有(you)試劑(ji)都(dou)必(bi)須(xu)在(zai)使(shi)用(yong)前達到(dao)室溫(wen)20-25℃。使(shi)用(yong)後(hou)立(li)即(ji)冷(leng)藏保存試劑(ji)。
2.洗(xi)板(ban)不正確可(ke)以導致(zhi)不準(zhun)確的(de)結果(guo)。在加(jia)入(ru)底物前確保(bao)盡(jin)量(liang)吸(xi)幹孔(kong)內(nei)液體(ti)。溫(wen)育(yu)過(guo)程中(zhong)不要(yao)讓(rang)微孔(kong)幹(gan)燥(zao)掉。
3.消除(chu)板(ban)底殘留的(de)液體(ti)和(he)手指(zhi)印，否則影(ying)響(xiang)OD值(zhi)。
4.底物顯(xian)色液應呈(cheng)無色或很(hen)淺的(de)顏(yan)色，已(yi)經(jing)變(bian)藍的(de)底物液不能(neng)使用(yong)。
5.避免試劑(ji)和(he)標本的(de)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)以免造(zao)成(cheng)錯誤(wu)結果(guo)。
6.在儲(chu)存和(he)溫(wen)育(yu)時(shi)避免強光直(zhi)接照(zhao)射。
7.平衡至室溫(wen)後(hou)再(zai)打開密(mi)封袋(dai)以防(fang)水滴凝聚(ju)在(zai)冷(leng)板(ban)條(tiao)上。
8.任何反應試劑(ji)不能(neng)接觸(chu)漂白溶(rong)劑(ji)或漂(piao)白溶(rong)劑(ji)所散(san)發的(de)強烈(lie)氣(qi)體(ti)。任何漂白成(cheng)分都會破(po)壞(huai)試劑(ji)盒中(zhong)反應試劑(ji)的(de)生物(wu)活性。
9.不能(neng)使用(yong)過期產品。
10.如(ru)果(guo)可(ke)能傳播疾病(bing)，所(suo)有的(de)樣(yang)品都應管(guan)理(li)好，按(an)照(zhao)規定的(de)程序(xu)處(chu)理樣(yang)品和(he)檢測(ce)裝(zhuang)置。
[試劑(ji)準(zhun)備(bei)]
試劑(ji)盒從冷(leng)藏環境中(zhong)取出應在(zai)室溫(wen)平(ping)衡後(hou)方可(ke)使用(yong)。
20×洗(xi)滌(di)緩(huan)沖液的(de)稀(xi)釋(shi)：蒸餾水(shui)按1：20稀(xi)釋(shi)，即(ji)1份20×洗(xi)滌(di)緩(huan)沖液加(jia)19份蒸餾水(shui)。
[操(cao)作(zuo)步驟]
1. 從室溫(wen)平(ping)衡20min後(hou)的(de)鋁箔袋中(zhong)取出所(suo)需(xu)板(ban)條(tiao)，剩余(yu)板(ban)條(tiao)用(yong)自(zi)封(feng)袋(dai)密(mi)封放回(hui)4℃。
2. 設置標準品孔和(he)樣(yang)本孔，標準品孔各加(jia)不同濃度(du)的(de)標準品50μL；
3. 樣(yang)本孔中(zhong)加入(ru)待(dai)測(ce)樣(yang)本50μL；空(kong)白(bai)孔不加(jia)。
4. 除(chu)空(kong)白(bai)孔外(wai)，標準品孔和(he)樣(yang)本孔中(zhong)每(mei)孔加(jia)入(ru)辣(la)根過氧化(hua)物酶(mei)（HRP）標記的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)100μL，用(yong)封板(ban)膜(mo)封住(zhu)反(fan)應孔(kong)，37℃水(shui)浴(yu)鍋或恒(heng)溫(wen)箱(xiang)溫(wen)育(yu)60min。
5. 棄(qi)去液體(ti)，吸(xi)水紙(zhi)上拍幹，每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液（350μL），靜置1min，甩去洗(xi)滌(di)液，吸(xi)水紙(zhi)上拍幹，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板(ban)5次(ci)（也(ye)可(ke)用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)板(ban)）。
6. 每(mei)孔加(jia)入(ru)底物A、B各50μL，37℃避光孵(fu)育(yu)15min。
7. 每(mei)孔加(jia)入(ru)終止(zhi)液50μL，15min內(nei)，在450nm波(bo)長處(chu)測(ce)定(ding)各孔(kong)的(de)OD值。
[實(shi)驗結(jie)果(guo)計(ji)算]
試劑(ji)盒以所測(ce)標準品的(de)OD值為(wei)橫(heng)坐標，標準品的(de)濃度(du)值為(wei)縱(zong)坐標，在坐標紙上或用(yong)相關軟件繪制標準曲線(xian)，並得(de)到(dao)直線(xian)回(hui)歸方程，將(jiang)樣(yang)品的(de)OD值代(dai)入方程，計(ji)算出(chu)樣(yang)品的(de)濃度(du)。
[試劑(ji)盒性能]
1. 檢(jian)測(ce)範(fan)圍：125 pg/mL – 4000 pg/mL。
2. 靈敏(min)度(du)：最di檢(jian)測(ce)濃度(du)小於(yu)10 pg/mL。
3. 特(te)異(yi)性：不與(yu)其它(ta)可(ke)溶(rong)性結構類似物(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
4. 重(zhong)復(fu)性：板(ban)內(nei)變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)小於(yu)10% ，板(ban)間變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)小於(yu)15% 。
[說(shuo)明(ming)]
1.由於(yu)現有條件及(ji)科(ke)學技術(shu)水(shui)平(ping)尚不能(neng)對(dui)所有(you)供貨商(shang)提供(gong)的(de)所有(you)原料(liao)進(jin)行(xing)全(quan)面的(de)鑒定(ding)與分(fen)析(xi)，本(ben)產(chan)品可(ke)能存在壹(yi)定(ding)的(de)質(zhi)量(liang)技術(shu)風(feng)險(xian)。
2.最終的(de)實(shi)驗結(jie)果(guo)與試劑(ji)的(de)有效(xiao)性、實(shi)驗者(zhe)的(de)相關(guan)操(cao)作(zuo)以及(ji)當時的(de)實(shi)驗環(huan)境密(mi)切(qie)相(xiang)關(guan)，請(qing)務必(bi)準(zhun)備(bei)充足的(de)標本備(bei)份。
3.不同批(pi)次(ci)的(de)同壹(yi)產品可(ke)能會有(you)少(shao)許(xu)差(cha)別(bie)，如(ru)：檢(jian)測(ce)限(xian)、靈(ling)敏度以及(ji)顯(xian)色時(shi)間等(deng)，請(qing)依(yi)據試劑(ji)盒內(nei)說明(ming)書進(jin)行(xing)實(shi)驗操(cao)作(zuo)，網站(zhan)電子(zi)版(ban)說(shuo)明(ming)書僅作參(can)考。
4.只(zhi)有(you)全(quan)部使(shi)用(yong)本試劑(ji)盒配(pei)套(tao)試劑(ji)才能保(bao)證檢測(ce)效(xiao)果(guo)，不能(neng)混用(yong)其他制造商(shang)的(de)產品。只(zhi)有(you)嚴(yan)格(ge)遵守本試劑(ji)盒的(de)實(shi)驗說(shuo)明才會得(de)到(dao)最佳(jia)的(de)檢測(ce)結(jie)果(guo)。
5.本公(gong)司只(zhi)對(dui)試劑(ji)盒本(ben)身負責(ze)，不對(dui)因使(shi)用(yong)該(gai)試劑(ji)盒所(suo)造成(cheng)的(de)樣(yang)本消耗負責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前充分(fen)考慮到(dao)樣(yang)本的(de)可(ke)能使用(yong)量(liang)，預留充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本。
6.使用(yong)化(hua)學裂解液制備(bei)的(de)組織勻(yun)漿或細胞提取液可(ke)能會由(you)於(yu)某些(xie)化(hua)學物質(zhi)的(de)引入導致(zhi)ELISA實(shi)驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。
7.若樣(yang)本為(wei)細胞培養上清，因該(gai)類樣(yang)本幹擾因素較多(duo)，如(ru)：細胞狀(zhuang)態、細胞數量(liang)、采(cai)樣(yang)時間等(deng)，所(suo)以可(ke)能存在檢(jian)測(ce)不出(chu)的(de)情況(kuang)。
8.某些(xie)天然(ran)蛋(dan)白或重(zhong)組蛋(dan)白，包(bao)括(kuo)原核及(ji)真核重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可(ke)能因為(wei)與(yu)本產品所使(shi)用(yong)的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)及(ji)捕獲抗(kang)體(ti)不匹配，而不被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。
關鍵(jian)詞：
2023-09-06 
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