大鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)夾(jia)心法操(cao)作(zuo)步驟

大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)夾(jia)心法操(cao)作(zuo)步驟
ELISA（酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附測(ce)定(ding)法）是(shi)壹(yi)種高靈(ling)敏度、高特(te)異(yi)性(xing)的(de)實驗方法，廣(guang)泛(fan)應用(yong)於(yu)生物分(fen)子(zi)的(de)檢(jian)測(ce)與定(ding)量分(fen)析。其中，大鼠(shu)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)夾(jia)心法是(shi)壹(yi)種常(chang)用(yong)的(de)ELISA分(fen)析方法，適(shi)用(yong)於(yu)大(da)鼠(shu)樣本中特定(ding)分(fen)析物的(de)檢(jian)測(ce)。本文(wen)將從樣本處(chu)理、試(shi)劑(ji)制備(bei)、操作(zuo)步驟、結(jie)果解(jie)讀四(si)個方面(mian)詳(xiang)細(xi)介(jie)紹大鼠(shu)ELISA試劑盒(he)夾(jia)心法的(de)操(cao)作(zuo)步驟。
壹(yi)、樣本處(chu)理
樣(yang)本處(chu)理是(shi)大(da)鼠ELISA試(shi)劑盒(he)夾(jia)心法的(de)第(di)壹(yi)步。首先(xian)，收集(ji)大鼠的(de)血(xue)液(ye)樣(yang)本，並將其置於(yu)離心管(guan)中。然(ran)後，用(yong)離心機(ji)以2000轉/分(fen)鐘的(de)速(su)度離心10分(fen)鐘，將血液與(yu)血(xue)漿或血清(qing)分(fen)離。將分(fen)離得到的(de)血(xue)漿(jiang)或(huo)血(xue)清(qing)轉移到(dao)壹(yi)只新(xin)的(de)離心管(guan)中。最後，用(yong)微量吸管將血漿或(huo)血(xue)清(qing)轉移至操作(zuo)板中(zhong)，細(xi)心避免(mian)產(chan)生任(ren)何氣泡。
二(er)、試(shi)劑制備(bei)
試劑制備(bei)是大鼠ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)夾(jia)心法的(de)第(di)二步(bu)。首先(xian)，將試劑盒(he)中(zhong)提供(gong)的(de)稀釋緩沖液(ye)取(qu)出(chu)，並(bing)根據(ju)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書(shu)中(zhong)的(de)比(bi)例(li)將其稀釋至所(suo)需(xu)濃(nong)度。接著，將酶(mei)抗(kang)體溶(rong)液、標(biao)記(ji)物、洗滌(di)緩沖液(ye)、底(di)物A、底(di)物B等試劑按比例(li)制(zhi)備(bei)好，並分(fen)裝至不同(tong)的(de)工作(zuo)管中(zhong)。確(que)保(bao)試(shi)劑(ji)濃(nong)度和配(pei)比(bi)準確(que)無(wu)誤(wu)。
三、操作(zuo)步驟
1. 將操作(zuo)板中(zhong)的(de)血(xue)漿(jiang)或(huo)血(xue)清(qing)樣(yang)本排(pai)空(kong)，並(bing)加(jia)入稀釋好的(de)酶(mei)抗(kang)體溶(rong)液。輕輕震動操作(zuo)板，使(shi)酶(mei)抗(kang)體均(jun)勻(yun)分(fen)布(bu)，並(bing)將其反(fan)應(ying)30分(fen)鐘。
2. 將操作(zuo)板放(fang)入洗滌(di)緩沖液(ye)中(zhong)浸(jin)泡1分(fen)鐘，然(ran)後用(yong)洗滌(di)緩沖液(ye)將操作(zuo)板中(zhong)的(de)酶(mei)抗(kang)體溶(rong)液洗滌(di)幹(gan)凈(jing)。每個孔(kong)洗滌(di)3-4次，避免(mian)洗滌(di)液殘留。
3. 加(jia)入標(biao)記(ji)物溶(rong)液，輕輕震動操作(zuo)板，將標(biao)記(ji)物均勻(yun)分(fen)布(bu)，並(bing)將其反(fan)應(ying)30分(fen)鐘。
4. 重(zhong)復第(di)二步(bu)，用(yong)洗滌(di)緩沖液(ye)將操作(zuo)板中(zhong)的(de)標(biao)記(ji)物溶(rong)液洗滌(di)幹(gan)凈(jing)。
5. 加(jia)入底(di)物A和底(di)物B的(de)混(hun)合物，輕輕震動操作(zuo)板，真(zhen)成(cheng)酶(mei)底(di)物反(fan)應(ying)，並(bing)在(zai)室(shi)溫下避光(guang)孵(fu)育(yu)15-30分(fen)鐘。
6. 加(jia)入終(zhong)止(zhi)液(ye)，終(zhong)止(zhi)酶(mei)反(fan)應(ying)，並(bing)避免(mian)任(ren)何形成(cheng)氣(qi)泡。
四(si)、結(jie)果解(jie)讀
ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)使(shi)用(yong)者(zhe)可(ke)以通過(guo)以(yi)下兩(liang)種方式對(dui)操(cao)作(zuo)板的(de)結(jie)果進(jin)行解(jie)讀：
1. 光(guang)度計(ji)測(ce)量：使(shi)用(yong)光(guang)度計(ji)來(lai)測(ce)量操(cao)作(zuo)板中(zhong)每個孔(kong)的(de)吸光(guang)度，並(bing)記(ji)錄下結(jie)果。根據(ju)吸光(guang)度讀數(shu)，可(ke)以判(pan)斷(duan)出(chu)樣(yang)品(pin)中(zhong)目標(biao)分(fen)析物的(de)濃(nong)度。同(tong)時(shi)，還應(ying)該(gai)根據(ju)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書(shu)中(zhong)提(ti)供(gong)的(de)標(biao)準曲線(xian)來(lai)計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)中(zhong)分(fen)析物的(de)準確(que)濃(nong)度。
2. 色(se)譜(pu)法讀板：將操作(zuo)板放(fang)入色(se)譜(pu)法讀板機(ji)中進(jin)行(xing)讀取(qu)，並(bing)保存(cun)結(jie)果。色(se)譜法讀板機(ji)會自動獲取每個孔(kong)的(de)吸光(guang)度信(xin)息，並根據(ju)事先設(she)定(ding)的(de)參數(shu)進(jin)行(xing)計(ji)算(suan)和解(jie)讀。

綜(zong)上(shang)所(suo)述(shu)，大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒(he)夾(jia)心法的(de)操(cao)作(zuo)步驟主要包括樣本處(chu)理、試(shi)劑(ji)制備(bei)、操作(zuo)步驟、結(jie)果解(jie)讀四(si)個方面(mian)。正(zheng)確(que)而(er)精準地(di)進(jin)行操作(zuo)步驟，對(dui)於(yu)得到可(ke)靠的(de)實驗結(jie)果非常(chang)重(zhong)要。使(shi)用(yong)者(zhe)在(zai)進(jin)行(xing)大鼠ELISA試(shi)劑盒(he)夾(jia)心法時(shi)，應嚴格按照(zhao)操作(zuo)步驟進行(xing)，並參考相關文(wen)獻(xian)和試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書(shu)進(jin)行(xing)正(zheng)確(que)的(de)樣(yang)本處(chu)理、試(shi)劑(ji)制備(bei)和結(jie)果解(jie)讀。

深(shen)圳(zhen)瑞清(qing)生物擁(yong)有壹(yi)批(pi)經(jing)驗豐(feng)富(fu)的(de)技術(shu)工程師(shi)，經(jing)過多(duo)年積累(lei)，試劑(ji)盒(he)現(xian)已涵蓋種屬甚(shen)多(duo)，上(shang)千(qian)余種指(zhi)標(biao)，有(you)快速(su)、簡(jian)單(dan)、準確(que)的(de)特(te)點，迎合(he)了(le)廣大(da)高校(xiao)和科(ke)研(yan)人(ren)員的(de)需(xu)求(qiu)，極(ji)大(da)的(de)提(ti)高了(le)科(ke)研(yan)人(ren)員的(de)工作(zuo)效(xiao)率(lv)，成(cheng)熟(shu)穩(wen)定(ding)的(de)質(zhi)量(liang)，贏(ying)得了眾(zhong)多科研(yan)機(ji)構的(de)認(ren)可(ke)，完(wan)善的(de)庫(ku)存(cun)及(ji)供(gong)應(ying)體系(xi)以(yi)及(ji)高效(xiao)穩(wen)定(ding)的(de)技術(shu)指(zhi)導，保(bao)證(zheng)產(chan)品(pin)均(jun)能(neng)現(xian)貨供(gong)應(ying)。期待(dai)您(nin)的(de)來(lai)電(dian)。