| 品(pin)牌 | 其他品(pin)牌 | 貨(huo)號(hao) | RQ-SW18266 |
|---|
| 規格(ge) | 96T/48T | 供(gong)貨周期(qi) | 現貨(huo) |
|---|
| 主(zhu)要(yao)用(yong)途(tu) | 科研(yan)試驗 | 品(pin)牌 | 瑞(rui)清 |
|---|
| 檢(jian)測樣本(ben) | 血清.血(xue)漿.組織(zhi).相關液(ye)體(ti)等 | 產(chan)品(pin)優(you)勢 | 靈敏(min)性(xing)高特(te)異性(xing)強(qiang) |
|---|
| 售(shou)後(hou) | 專(zhuan)屬服(fu)務(wu) | | |
|---|
我(wo)司(si)產(chan)品(pin)齊全(quan)，因上(shang)架(jia)數量(liang)有(you)限，未(wei)能(neng)全(quan)部上(shang)架(jia)，如(ru)需(xu)訂購或(huo)者(zhe)產品(pin)詳(xiang)情請直接聯系我(wo)司(si)銷售(shou)！
畢(bi)赤(chi)酵(jiao)母(mu)菌(jun)宿(xiu)主(zhu)蛋白(bai)殘(can)留elisa試劑(ji)盒(he)
僅(jin)供(gong)體(ti)外(wai)研(yan)究使(shi)用(yong)，不用(yong)於臨(lin)床診斷!
本(ben)試劑(ji)盒(he)用(yong)於體(ti)外(wai)定(ding)量(liang)檢(jian)測血清、血(xue)漿、組織(zhi)勻(yun)漿及(ji)相關液(ye)體(ti)樣本(ben)中(zhong)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤(liu)壞死因子a（TNF-a）的(de)含量(liang)。
有(you)效期(qi)：6個(ge)月(yue)
保存條(tiao)件：2-8℃
[實驗原理(li)]
試劑(ji)盒(he)采(cai)用(yong)雙抗體(ti)壹步夾(jia)心(xin)法(fa)酶聯(lian)免疫(yi)吸附試驗（ELISA）。往預(yu)先(xian)包(bao)被(bei)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤(liu)壞死因子a（TNF-a）捕(bu)獲抗(kang)體(ti)的包被(bei)微(wei)孔中(zhong)，依(yi)次(ci)加(jia)入(ru)標本(ben)、標準品(pin)、HRP標記(ji)的檢(jian)測抗體(ti)，經過(guo)溫育(yu)並(bing)徹di洗(xi)滌(di)。用(yong)底(di)物TMB顯(xian)色，TMB在過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)的(de)催化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成藍(lan)色，並(bing)在酸(suan)的作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成最終(zhong)的黃(huang)色。顏色的深淺和(he)樣品(pin)中(zhong)的(de)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤(liu)壞死因子a（TNF-a）呈正(zheng)相關。用(yong)酶(mei)標儀在450nm 波(bo)長下測定吸光度(du)（OD 值），計算樣品(pin)濃度(du)。
[樣本(ben)處(chu)理及(ji)要(yao)求(qiu)]
1. 血(xue)清：將(jiang)收(shou)集(ji)於血清分(fen)離管的(de)全(quan)血標本(ben)在室(shi)溫(wen)放置(zhi)2小(xiao)時(shi)或(huo)4℃過(guo)夜，然(ran)後(hou)1000×g離心20 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清即(ji)可(ke)，或(huo)將上(shang)清置(zhi)於-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
2. 血漿：用EDTA或(huo)肝素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)采(cai)集(ji)標本(ben)，並(bing)將標本(ben)在采(cai)集(ji)後(hou)的30分鐘內(nei)於2-8℃ 1000×g離心15分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上(shang)清置(zhi)於-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
3. 組織(zhi)勻(yun)漿：用預(yu)冷(leng)的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗(xi)組(zu)織(zhi)，去除殘(can)留血(xue)液(ye)（勻(yun)漿中(zhong)裂(lie)解的(de)紅(hong)細(xi)胞(bao)會(hui)影響測量(liang)結(jie)果(guo)），稱重(zhong)後(hou)將組織(zhi)jian碎(sui)。將(jiang)剪(jian)碎(sui)的(de)組(zu)織(zhi)與對(dui)應(ying)體(ti)積的(de)PBS（壹(yi)般按1:9的(de)重(zhong)量(liang)體(ti)積比(bi)，比(bi)如(ru)1g的(de)組織(zhi)樣品(pin)對應(ying)9mL的(de)PBS，具體(ti)體(ti)積可(ke)根(gen)據實驗需(xu)要(yao)適當(dang)調整(zheng)，並(bing)做(zuo)好記(ji)錄。推薦(jian)在PBS中(zhong)加(jia)入(ru)蛋白(bai)酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑(ji)）加(jia)入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿器中(zhong)，於冰(bing)上(shang)充(chong)分研磨(mo)。為(wei)了(le)進壹(yi)步裂(lie)解組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)，可(ke)以(yi)對勻(yun)漿液(ye)進(jin)行(xing)超(chao)聲破(po)碎(sui)，或(huo)反復(fu)凍(dong)融(rong)。最後(hou)將勻(yun)漿液(ye)於5000×g離心5~10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清檢(jian)測。
4. 細(xi)胞(bao)培養物上(shang)清或(huo)其它生物標本(ben)：請1000×g離心20分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上(shang)清置(zhi)於-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
註：標本(ben)溶血會(hui)影響最後(hou)檢測結果，因此溶血(xue)標本(ben)不宜(yi)進行(xing)此項檢(jian)測。
[需(xu)要(yao)而(er)未(wei)提供(gong)的試劑(ji)和(he)器材(cai)]
1.酶(mei)標儀（450nm）
2.高精(jing)度(du)加(jia)樣器(qi)及(ji)槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒(heng)溫箱(xiang)
4.蒸餾水(shui)或(huo)去離子水(shui)
[試劑(ji)盒(he)組(zu)成]
備註：
1. 標準品(pin)濃度(du)依次(ci)為(wei)：4000、2000、1000、500、250、125 pg/mL
2. 經過(guo)大量(liang)正(zheng)常(chang)標本(ben)檢驗，標本(ben)的正(zheng)常(chang)濃度(du)值均(jun)在試劑(ji)盒(he)提供(gong)的檢(jian)測範圍內，實(shi)驗過(guo)程中(zhong)直接取(qu)50μL樣(yang)本(ben)上(shang)樣(yang)即可(ke)。當(dang)有(you)部分(fen)樣本(ben)值超(chao)過(guo)最大標準品(pin)濃度(du)時(shi)，可(ke)用(yong)樣本(ben)稀(xi)釋ye將標本(ben)進行(xing)適當(dang)稀(xi)釋後再(zai)進行(xing)實(shi)驗。
畢(bi)赤(chi)酵(jiao)母(mu)菌(jun)宿(xiu)主(zhu)蛋白(bai)殘(can)留elisa試劑(ji)盒(he)
[註意(yi)事項]
1.嚴格(ge)按照(zhao)規定(ding)的時(shi)間和(he)溫度(du)進(jin)行(xing)溫(wen)育(yu)以(yi)保證準確結果。所(suo)有(you)試劑(ji)都(dou)必(bi)須(xu)在使(shi)用(yong)前達(da)到(dao)室溫(wen)20-25℃。使(shi)用(yong)後立即(ji)冷(leng)藏(zang)保存試劑(ji)。
2.洗(xi)板(ban)不正(zheng)確可(ke)以(yi)導致(zhi)不準確的結果。在加(jia)入(ru)底(di)物前(qian)確保盡量(liang)吸幹(gan)孔內(nei)液(ye)體(ti)。溫育過(guo)程中(zhong)不要(yao)讓(rang)微(wei)孔幹(gan)燥掉(diao)。
3.消(xiao)除板(ban)底殘(can)留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手指(zhi)印，否(fou)則影響OD值。
4.底(di)物顯(xian)色液(ye)應(ying)呈無色或(huo)很淺的顏色，已(yi)經變(bian)藍(lan)的(de)底(di)物液(ye)不能(neng)使用(yong)。
5.避免試劑(ji)和(he)標本(ben)的交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)以(yi)免造成錯誤結果(guo)。
6.在儲(chu)存(cun)和(he)溫育(yu)時(shi)避免強(qiang)光直接照射。
7.平衡至室溫後再(zai)打(da)開密(mi)封袋以防(fang)水滴(di)凝(ning)聚(ju)在冷(leng)板(ban)條上(shang)。
8.任(ren)何(he)反(fan)應(ying)試劑(ji)不能(neng)接觸(chu)漂白(bai)溶(rong)劑(ji)或(huo)漂白(bai)溶(rong)劑(ji)所(suo)散發(fa)的強(qiang)烈氣體(ti)。任何(he)漂白(bai)成分都(dou)會(hui)破(po)壞試劑(ji)盒(he)中(zhong)反(fan)應(ying)試劑(ji)的(de)生(sheng)物活性(xing)。
9.不能(neng)使用(yong)過(guo)期(qi)產(chan)品(pin)。
10.如(ru)果(guo)可(ke)能(neng)傳播(bo)疾(ji)病，所(suo)有(you)的樣(yang)品(pin)都(dou)應(ying)管(guan)理好，按照(zhao)規定(ding)的程序處(chu)理樣(yang)品(pin)和(he)檢測裝置(zhi)。
[試劑(ji)準備]
試劑(ji)盒(he)從冷(leng)藏(zang)環(huan)境中(zhong)取(qu)出(chu)應(ying)在室(shi)溫(wen)平衡後方可(ke)使(shi)用。
20×洗滌(di)緩(huan)沖液(ye)的(de)稀(xi)釋：蒸餾水(shui)按1：20稀(xi)釋，即1份(fen)20×洗滌(di)緩(huan)沖液(ye)加(jia)19份蒸餾水(shui)。
[操(cao)作(zuo)步驟(zhou)]
1. 從室溫(wen)平衡20min後的鋁(lv)箔袋中(zhong)取(qu)出(chu)所(suo)需(xu)板(ban)條，剩(sheng)余(yu)板(ban)條用(yong)自(zi)封袋密(mi)封放(fang)回4℃。
2. 設置(zhi)標準品(pin)孔和(he)樣本(ben)孔，標準品(pin)孔各加(jia)不同(tong)濃度(du)的標準品(pin)50μL；
3. 樣本(ben)孔中(zhong)加(jia)入(ru)待(dai)測樣本(ben)50μL；空白(bai)孔(kong)不加(jia)。
4. 除空白(bai)孔(kong)外(wai)，標準品(pin)孔和(he)樣本(ben)孔中(zhong)每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)（HRP）標記(ji)的檢(jian)測抗體(ti)100μL，用封板(ban)膜(mo)封住(zhu)反應(ying)孔(kong)，37℃水浴鍋或(huo)恒溫(wen)箱(xiang)溫育(yu)60min。
5. 棄去(qu)液(ye)體(ti)，吸水紙上(shang)拍(pai)幹(gan)，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜(jing)置(zhi)1min，甩(shuai)去洗滌(di)液(ye)，吸水紙上(shang)拍(pai)幹(gan)，如(ru)此重(zhong)復(fu)洗板(ban)5次（也(ye)可(ke)用(yong)洗板(ban)機洗(xi)板(ban)）。
6. 每孔(kong)加(jia)入(ru)底(di)物A、B各50μL，37℃避光孵(fu)育(yu)15min。
7. 每(mei)孔加(jia)入(ru)終(zhong)止液(ye)50μL，15min內(nei)，在450nm波(bo)長處(chu)測定各孔的(de)OD值。
[實(shi)驗結果(guo)計算]
試劑(ji)盒(he)以(yi)所(suo)測標準品(pin)的OD值為(wei)橫(heng)坐(zuo)標，標準品(pin)的濃(nong)度值為(wei)縱坐(zuo)標，在坐(zuo)標紙上(shang)或(huo)用相(xiang)關軟件繪(hui)制標準曲線，並(bing)得到(dao)直線回歸方程(cheng)，將(jiang)樣(yang)品(pin)的OD值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)，計算出樣品(pin)的濃(nong)度。
[試劑(ji)盒(he)性(xing)能]
1. 檢測範圍：125 pg/mL – 4000 pg/mL。
2. 靈敏(min)度(du)：最di檢(jian)測濃度小(xiao)於10 pg/mL。
3. 特(te)異性(xing)：不與其它可(ke)溶(rong)性結構類(lei)似(si)物交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
4. 重(zhong)復(fu)性：板(ban)內變(bian)異(yi)系數(shu)小(xiao)於10% ，板(ban)間變(bian)異(yi)系數(shu)小(xiao)於15% 。
[說(shuo)明(ming)]
1.由(you)於現有(you)條件及(ji)科學(xue)技術(shu)水平尚不能(neng)對所(suo)有(you)供(gong)貨商(shang)提供(gong)的所(suo)有(you)原料(liao)進(jin)行(xing)全(quan)面的鑒定與分(fen)析(xi)，本(ben)產品(pin)可(ke)能(neng)存在壹(yi)定(ding)的質量(liang)技術(shu)風險(xian)。
2.最終(zhong)的實(shi)驗結果(guo)與試劑(ji)的(de)有(you)效性、實(shi)驗者(zhe)的相(xiang)關操(cao)作(zuo)以(yi)及(ji)當時(shi)的實(shi)驗環(huan)境密(mi)切相關，請務(wu)必準備充足(zu)的標本(ben)備份。
3.不同(tong)批(pi)次的(de)同壹(yi)產品(pin)可(ke)能(neng)會(hui)有(you)少(shao)許(xu)差(cha)別，如(ru)：檢(jian)測限、靈敏(min)度(du)以及(ji)顯(xian)色時(shi)間等，請依(yi)據試劑(ji)盒(he)內(nei)說(shuo)明(ming)書進行(xing)實(shi)驗操作(zuo)，網(wang)站(zhan)電(dian)子版(ban)說(shuo)明(ming)書僅(jin)作(zuo)參(can)考(kao)。
4.只有(you)全(quan)部使(shi)用本(ben)試劑(ji)盒(he)配套(tao)試劑(ji)才能保證檢(jian)測效果，不能(neng)混(hun)用(yong)其他制造商(shang)的產(chan)品(pin)。只有(you)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)本(ben)試劑(ji)盒(he)的(de)實驗說(shuo)明(ming)才會(hui)得到(dao)最佳(jia)的檢(jian)測結果。
5.本(ben)公(gong)司(si)只(zhi)對試劑(ji)盒(he)本(ben)身負(fu)責(ze)，不對(dui)因使用(yong)該試劑(ji)盒(he)所(suo)造成的樣本(ben)消(xiao)耗負(fu)責(ze)，請使(shi)用者(zhe)使用(yong)前充(chong)分考(kao)慮(lv)到(dao)樣本(ben)的可(ke)能(neng)使用量(liang)，預(yu)留充(chong)足(zu)的樣(yang)本(ben)。
6.使用化(hua)學裂(lie)解液(ye)制(zhi)備的組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於某些(xie)化(hua)學物質的引入(ru)導致(zhi)ELISA實驗結果(guo)偏(pian)差(cha)。
7.若(ruo)樣本(ben)為細(xi)胞(bao)培養上(shang)清，因該類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾因素較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀態、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間等，所(suo)以可(ke)能(neng)存在檢(jian)測不出(chu)的情(qing)況。
8.某些(xie)天(tian)然蛋白(bai)或(huo)重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真核重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，可(ke)能(neng)因為與本(ben)產品(pin)所(suo)使用(yong)的檢測抗體(ti)及(ji)捕(bu)獲抗(kang)體(ti)不匹配，而(er)不被(bei)檢(jian)測出。
關鍵詞：
2023-10-16 
您(nin)的位(wei)置(zhi)：首頁(ye) - 產品(pin)中(zhong)心(xin) - elisa試劑(ji)盒(he) - 其他elisa試劑(ji)盒(he) - 畢(bi)赤(chi)酵(jiao)母(mu)宿(xiu)主(zhu)蛋白(bai)殘(can)留ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒(he)
產(chan)品(pin)型號(hao)：
立(li)即(ji)咨詢(xun)
聯系電(dian)話(hua)：0755-28019324
QQ
廣(guang)東省(sheng)深圳市(shi)福(fu)田(tian)區福(fu)田(tian)街道(dao)崗廈社區福華(hua)三(san)路(lu)88號(hao)財(cai)富大廈39H-Z25
在線咨詢(xun)
返回(hui)頂(ding)部