| 品(pin)牌 | 其他品牌(pai) | 貨號 | RQ-TW29323 |
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| 規(gui)格(ge) | 96T/48T | 供(gong)貨周期 | 現貨 |
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| 主要(yao)用(yong)途(tu) | 科(ke)研(yan)試(shi)驗(yan) | 品牌(pai) | 瑞清 |
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| 檢測(ce)樣本(ben) | 血清(qing).血漿(jiang).組(zu)織(zhi).相關(guan)液(ye)體(ti)等 | 產品(pin)優(you)勢(shi) | 靈(ling)敏(min)性高(gao)特(te)異性強(qiang) |
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| 售(shou)後(hou) | 專(zhuan)屬服務 | | |
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我(wo)司產(chan)品齊全，因(yin)上架(jia)數(shu)量有(you)限，未(wei)能全部上架(jia)，如需(xu)訂購(gou)或(huo)者(zhe)產(chan)品(pin)詳情請(qing)直接(jie)聯系(xi)我(wo)司銷(xiao)售(shou)！
大鼠(shu)磷酸烯醇式丙酮激(ji)酶(mei)（PEPCK）試(shi)劑(ji)盒
僅(jin)供(gong)體外(wai)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)，不(bu)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷!
本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於(yu)體外(wai)定(ding)量檢(jian)測血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)及相關(guan)液(ye)體(ti)樣本(ben)中(zhong)大鼠(shu) 腫(zhong)瘤壞死因子(zi)a（TNF-a）的含(han)量。
有(you)效期(qi)：6個(ge)月
保存條件(jian)：2-8℃
[實(shi)驗(yan)原理(li)]
試劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)壹(yi)步(bu)夾心(xin)法(fa)酶(mei)聯免(mian)疫吸附(fu)試驗(yan)（ELISA）。往預(yu)先(xian)包(bao)被大鼠(shu) 腫(zhong)瘤壞死因子(zi)a（TNF-a）捕(bu)獲抗(kang)體(ti)的包(bao)被微(wei)孔中，依次加入(ru)標(biao)本(ben)、標(biao)準品(pin)、HRP標(biao)記(ji)的檢(jian)測抗(kang)體(ti)，經過(guo)溫育並(bing)徹(che)di洗(xi)滌(di)。用底(di)物(wu)TMB顯色，TMB在過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色，並(bing)在(zai)酸(suan)的作(zuo)用下(xia)轉化(hua)成(cheng)最(zui)終(zhong)的黃色。顏色的深淺(qian)和(he)樣品中(zhong)的大鼠(shu) 腫(zhong)瘤壞死因子(zi)a（TNF-a）呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標儀(yi)在450nm 波長(chang)下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(du)（OD 值），計算(suan)樣品濃(nong)度(du)。
[樣本(ben)處(chu)理及要(yao)求]
1. 血清(qing)：將(jiang)收集於血清(qing)分(fen)離(li)管(guan)的全血標(biao)本(ben)在(zai)室溫放(fang)置(zhi)2小時或(huo)4℃過(guo)夜(ye)，然(ran)後(hou)1000×g離(li)心(xin)20 分(fen)鐘，取上清即(ji)可(ke)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。
2. 血漿(jiang)：用(yong)EDTA或(huo)肝(gan)素(su)作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標本(ben)，並(bing)將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後(hou)的30分(fen)鐘內於2-8℃ 1000×g離(li)心(xin)15分(fen)鐘，取上清即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。
3. 組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)：用預冷(leng)的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗(xi)組(zu)織(zhi)，去除殘(can)留(liu)血液(ye)（勻漿(jiang)中裂解的紅(hong)細(xi)胞(bao)會影響(xiang)測(ce)量結(jie)果），稱重後(hou)將(jiang)組(zu)織(zhi)jian碎。將(jiang)剪(jian)碎(sui)的組(zu)織(zhi)與(yu)對應體積(ji)的PBS（壹(yi)般按(an)1:9的重量體(ti)積(ji)比，比如1g的組(zu)織(zhi)樣品對(dui)應9mL的PBS，具(ju)體體(ti)積(ji)可(ke)根據(ju)實(shi)驗(yan)需(xu)要適當(dang)調(tiao)整，並(bing)做(zuo)好(hao)記(ji)錄(lu)。推(tui)薦(jian)在(zai)PBS中加入(ru)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑制(zhi)劑(ji)）加入(ru)玻(bo)璃勻漿(jiang)器中，於(yu)冰(bing)上(shang)充分(fen)研磨(mo)。為了進壹(yi)步(bu)裂解組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)，可(ke)以對(dui)勻漿(jiang)液(ye)進(jin)行(xing)超(chao)聲破(po)碎(sui)，或(huo)反復凍(dong)融。最(zui)後(hou)將(jiang)勻漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g離(li)心(xin)5~10分(fen)鐘，取上清檢測。
4. 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)物上清或(huo)其它生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben)：請(qing)1000×g離(li)心(xin)20分(fen)鐘，取上清即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。
註(zhu)：標(biao)本(ben)溶(rong)血會影響(xiang)最(zui)後(hou)檢測結(jie)果，因此溶(rong)血標(biao)本(ben)不(bu)宜(yi)進(jin)行(xing)此(ci)項檢測(ce)。
[需(xu)要而未提供(gong)的試(shi)劑(ji)和器(qi)材(cai)]
1.酶標儀(yi)（450nm）
2.高精度(du)加樣器及(ji)槍頭(tou)：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒(heng)溫箱(xiang)
4.蒸餾水(shui)或(huo)去離(li)子(zi)水(shui)
[試劑(ji)盒組(zu)成(cheng)]
備註(zhu)：
1. 標準品(pin)濃(nong)度(du)依次為：4000、2000、1000、500、250、125 pg/mL
2. 經過(guo)大量正(zheng)常標(biao)本(ben)檢(jian)驗(yan)，標本(ben)的正(zheng)常濃(nong)度(du)值均(jun)在(zai)試劑(ji)盒提(ti)供(gong)的檢(jian)測範圍(wei)內(nei)，實(shi)驗(yan)過(guo)程中直接(jie)取(qu)50μL樣本(ben)上(shang)樣即(ji)可(ke)。當(dang)有(you)部分(fen)樣本(ben)值超(chao)過(guo)最(zui)大標(biao)準品(pin)濃(nong)度(du)時，可(ke)用樣本(ben)稀(xi)釋(shi)ye將(jiang)標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)適(shi)當(dang)稀(xi)釋後(hou)再進行(xing)實(shi)驗(yan)。
大鼠(shu)磷酸烯醇式丙酮激(ji)酶(mei)（PEPCK）試(shi)劑(ji)盒
[註(zhu)意(yi)事項]
1.嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)規(gui)定(ding)的時間和(he)溫度(du)進行(xing)溫育以保證(zheng)準確(que)結(jie)果。所有試劑(ji)都必(bi)須(xu)在使(shi)用(yong)前(qian)達(da)到室溫20-25℃。使(shi)用(yong)後(hou)立(li)即(ji)冷(leng)藏(zang)保存(cun)試劑(ji)。
2.洗(xi)板(ban)不正(zheng)確可(ke)以導致(zhi)不(bu)準確(que)的結(jie)果。在加入(ru)底(di)物(wu)前(qian)確(que)保盡(jin)量吸(xi)幹孔內液(ye)體(ti)。溫育過(guo)程中不(bu)要(yao)讓微孔幹燥(zao)掉。
3.消(xiao)除(chu)板(ban)底(di)殘(can)留(liu)的液(ye)體(ti)和(he)手指印，否則影響(xiang)OD值。
4.底(di)物(wu)顯色液(ye)應呈無(wu)色或(huo)很(hen)淺的顏色，已經變(bian)藍的底(di)物(wu)液(ye)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)。
5.避(bi)免(mian)試劑(ji)和標(biao)本(ben)的交(jiao)叉汙(wu)染(ran)以免(mian)造(zao)成錯(cuo)誤(wu)結(jie)果。
6.在儲存和(he)溫育時避(bi)免(mian)強(qiang)光直接(jie)照(zhao)射。
7.平衡至室溫後(hou)再打開密(mi)封袋(dai)以(yi)防(fang)水(shui)滴(di)凝聚在冷(leng)板(ban)條上。
8.任(ren)何(he)反應試劑(ji)不能(neng)接(jie)觸(chu)漂(piao)白(bai)溶(rong)劑(ji)或(huo)漂(piao)白(bai)溶(rong)劑(ji)所散(san)發的強(qiang)烈(lie)氣(qi)體(ti)。任(ren)何(he)漂(piao)白(bai)成(cheng)分(fen)都會破(po)壞試劑(ji)盒中(zhong)反應試劑(ji)的生(sheng)物(wu)活性。
9.不(bu)能使(shi)用(yong)過(guo)期(qi)產品。
10.如(ru)果可(ke)能傳(chuan)播疾病，所有的樣品都(dou)應管理好(hao)，按(an)照(zhao)規(gui)定(ding)的程序(xu)處(chu)理樣品和(he)檢測裝置(zhi)。
[試(shi)劑(ji)準備(bei)]
試(shi)劑(ji)盒從冷藏(zang)環(huan)境中(zhong)取出應在室溫平衡後(hou)方(fang)可(ke)使(shi)用(yong)。
20×洗(xi)滌(di)緩沖液(ye)的稀(xi)釋：蒸(zheng)餾水(shui)按(an)1：20稀釋，即(ji)1份(fen)20×洗(xi)滌(di)緩沖液(ye)加19份蒸餾水(shui)。
[操作(zuo)步(bu)驟]
1. 從室溫平衡20min後(hou)的鋁(lv)箔袋(dai)中(zhong)取出所(suo)需(xu)板條，剩余板(ban)條用自封袋(dai)密(mi)封放(fang)回4℃。
2. 設(she)置(zhi)標(biao)準品(pin)孔和樣本(ben)孔，標準品(pin)孔各加不同濃度(du)的標(biao)準品(pin)50μL；
3. 樣本(ben)孔中加入(ru)待測樣本(ben)50μL；空(kong)白(bai)孔不加。
4. 除空白孔外(wai)，標(biao)準品(pin)孔和樣本(ben)孔中每(mei)孔加入(ru)辣根過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標記的檢(jian)測抗(kang)體(ti)100μL，用封板膜(mo)封住反應孔，37℃水(shui)浴鍋或(huo)恒(heng)溫箱(xiang)溫育60min。
5. 棄(qi)去液(ye)體(ti)，吸(xi)水(shui)紙上(shang)拍幹(gan)，每(mei)孔加滿洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜(jing)置(zhi)1min，甩去洗(xi)滌(di)液(ye)，吸(xi)水(shui)紙上(shang)拍幹(gan)，如(ru)此重復洗(xi)板(ban)5次（也可(ke)用洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)板(ban)）。
6. 每孔加入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光孵(fu)育15min。
7. 每(mei)孔加入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測定(ding)各(ge)孔的OD值。
[實(shi)驗(yan)結(jie)果計算(suan)]
試(shi)劑(ji)盒以(yi)所(suo)測標準品(pin)的OD值為(wei)橫(heng)坐標，標準品(pin)的濃(nong)度(du)值為(wei)縱坐標，在坐標紙上或(huo)用(yong)相關(guan)軟件(jian)繪(hui)制(zhi)標(biao)準曲(qu)線(xian)，並(bing)得(de)到直線(xian)回歸(gui)方(fang)程，將(jiang)樣品的OD值代(dai)入(ru)方(fang)程，計算(suan)出(chu)樣品的濃(nong)度(du)。
[試劑(ji)盒性(xing)能(neng)]
1. 檢測範圍(wei)：125 pg/mL – 4000 pg/mL。
2. 靈(ling)敏(min)度(du)：最di檢(jian)測(ce)濃(nong)度(du)小於(yu)10 pg/mL。
3. 特(te)異性：不與(yu)其它可(ke)溶(rong)性結(jie)構(gou)類似物交(jiao)叉反應。
4. 重復性：板內變(bian)異系(xi)數(shu)小於(yu)10% ，板間(jian)變(bian)異系(xi)數(shu)小於(yu)15% 。
[說明]
1.由(you)於(yu)現(xian)有條(tiao)件(jian)及科(ke)學技(ji)術水(shui)平尚(shang)不(bu)能(neng)對所有(you)供(gong)貨商提供(gong)的所(suo)有原(yuan)料進行全面(mian)的鑒定(ding)與(yu)分(fen)析，本(ben)產(chan)品(pin)可(ke)能存(cun)在壹(yi)定(ding)的質(zhi)量技(ji)術風(feng)險。
2.最(zui)終(zhong)的實(shi)驗(yan)結(jie)果與(yu)試劑(ji)的有(you)效性(xing)、實(shi)驗(yan)者的相關(guan)操作(zuo)以及(ji)當(dang)時的實(shi)驗(yan)環(huan)境密(mi)切相關(guan)，請(qing)務必(bi)準備(bei)充(chong)足(zu)的標(biao)本(ben)備(bei)份(fen)。
3.不(bu)同批次(ci)的同壹(yi)產品(pin)可(ke)能會有少(shao)許差(cha)別(bie)，如(ru)：檢測(ce)限(xian)、靈(ling)敏(min)度(du)以及(ji)顯色時間等，請(qing)依據試劑(ji)盒內(nei)說明書(shu)進(jin)行實(shi)驗(yan)操作(zuo)，網站電子(zi)版說明書(shu)僅(jin)作參(can)考。
4.只(zhi)有(you)全部使(shi)用(yong)本(ben)試(shi)劑(ji)盒配(pei)套(tao)試劑(ji)才能(neng)保(bao)證(zheng)檢測(ce)效果，不能混用(yong)其他制(zhi)造(zao)商的產(chan)品。只(zhi)有(you)嚴(yan)格(ge)遵守本(ben)試(shi)劑(ji)盒的實(shi)驗(yan)說明才會得(de)到最佳的檢(jian)測結(jie)果。
5.本(ben)公(gong)司只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒本(ben)身(shen)負(fu)責(ze)，不對因使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所(suo)造(zao)成的樣本(ben)消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考慮(lv)到樣本(ben)的可(ke)能使(shi)用(yong)量，預(yu)留充(chong)足(zu)的樣本(ben)。
6.使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解液(ye)制(zhi)備(bei)的組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)或(huo)細(xi)胞(bao)提取液(ye)可(ke)能會由(you)於(yu)某(mou)些(xie)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的引入(ru)導致(zhi)ELISA實(shi)驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
7.若樣本(ben)為(wei)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清，因該(gai)類樣本(ben)幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su)較(jiao)多，如：細(xi)胞(bao)狀態、細(xi)胞(bao)數(shu)量、采(cai)樣時間等，所以(yi)可(ke)能存(cun)在檢(jian)測不出的情(qing)況(kuang)。
8.某(mou)些(xie)天(tian)然(ran)蛋(dan)白(bai)或(huo)重組(zu)蛋(dan)白(bai)，包(bao)括原核(he)及(ji)真核(he)重組(zu)蛋(dan)白(bai)，可(ke)能因(yin)為與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使(shi)用(yong)的檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲抗(kang)體(ti)不匹(pi)配(pei)，而不被(bei)檢(jian)測出。
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2023-09-06 
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