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          兔磷酸(suan)化AKT蛋白(p-AKT)ELISA試劑(ji)盒

          兔(tu)磷酸(suan)化AKT蛋白(p-AKT)ELISA試劑(ji)盒
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          兔(tu)磷酸(suan)化AKT蛋白(p-AKT)ELISA試劑(ji)盒

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          ELISA法是(shi)免(mian)疫(yi)診斷中的(de)壹項新(xin)技術(shu),現(xian)已(yi)成(cheng)功地(di)應(ying)用於多種病原微(wei)生(sheng)物所引(yin)起(qi)的(de)傳染(ran)病、寄(ji)生蟲病及(ji)非傳染(ran)病等(deng)方(fang)面(mian)的(de)免疫(yi)診斷。也(ye)已(yi)應(ying)用於大(da)分(fen)子抗(kang)原和(he)小(xiao)分(fen)子抗(kang)原的(de)定量測定,根(gen)據(ju)已(yi)經使(shi)用的(de)結果(guo),認(ren)為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏(min)、特異、簡(jian)單(dan)、快速、穩(wen)定及(ji)易於自動(dong)化(hua)操作(zuo)等(deng)特點(dian)。不(bu)僅(jin)適(shi)用於臨(lin)床(chuang)標本的(de)檢(jian)查(zha),而(er)且(qie)由(you)於(yu)壹(yi)天(tian)之內(nei)可以檢(jian)查(zha)幾百(bai)甚(shen)至(zhi)上(shang)千(qian)份標(biao)本(ben),因此(ci),也(ye)適(shi)合(he)於血清流行(xing)病學調(tiao)查(zha)。本(ben)法不(bu)僅(jin)可以用來(lai)測(ce)定(ding)抗(kang)ti,而(er)且(qie)也(ye)可用於測定體液中的(de)循環(huan)抗(kang)原,所以也是(shi)壹(yi)種早(zao)期診斷的(de)良好(hao)方(fang)法(fa)。因此(ci)ELISA法在生物醫學各(ge)領(ling)域的(de)應(ying)用範圍日益(yi)擴大(da),

          組成結構(gou)

          1、血(xue)清:操作(zuo)過(guo)程(cheng)中避免(mian)任何(he)細(xi)胞刺激。使(shi)用不(bu)含熱原和(he)內(nei)du素(su)的(de)試管(guan)。收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後,1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將血紅(hong)細胞迅速小心(xin)地分(fen)離(li)。

          2、2、血漿:EDTA、檸檬(meng)suan鹽(yan)、肝素血(xue)漿(jiang)可用於檢(jian)測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘(zhong)去除顆粒(li)。

          3、細(xi)胞上(shang)清液(ye):1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去除顆粒(li)和(he)聚(ju)合(he)物。

          4、組織勻漿:將(jiang)組(zu)織加(jia)入(ru)適量生理鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong),取上(shang)清液(ye)。

          5、保(bao)存:如果(guo)樣(yang)品不(bu)立(li)即(ji)使(shi)用,應(ying)將其分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70℃保(bao)存,避免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡可能(neng)的(de)不(bu)要(yao)使(shi)用溶血。如(ru)果(guo)血清中大(da)量顆粒(li),檢(jian)測前先離心(xin)或(huo)過濾(lv)。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或(huo)更(geng)高的(de)溫度加(jia)熱解凍(dong)。應(ying)在室溫下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻地充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

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          兔(tu)磷酸(suan)化AKT蛋白(p-AKT)ELISA試劑(ji)盒

          操作(zuo)步(bu)驟:

          1、使(shi)用前,將所有試劑(ji)充(chong)分(fen)混(hun)勻。不(bu)要(yao)使(shi)液體產生大(da)量的(de)泡沫,以免加(jia)樣時(shi)加(jia)入(ru)大(da)量的(de)氣泡,產(chan)生加(jia)樣上(shang)的(de)誤差(cha)。

          2、根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)樣品數(shu)量加(jia)上(shang)標(biao)準品的(de)數(shu)量決定所需(xu)的(de)板條數(shu)。每(mei)個標準品和(he)空(kong)白孔建(jian)議做(zuo)復(fu)孔。每(mei)個樣品根(gen)據(ju)自己(ji)的(de)數(shu)量來(lai)定(ding),能(neng)使(shi)用復(fu)孔的(de)盡量做復(fu)孔。

          3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好(hao)後(hou)的(de)標準品50ul於反應(ying)孔、加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)樣品50ul於反應(ying)孔內(nei)。立(li)即加(jia)入(ru)50ul標記的(de)抗(kang)體。蓋上(shang)膜(mo)板(ban),輕輕振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)45分(fen)鐘(zhong)。

          4、甩去孔內(nei)液(ye)體,每(mei)孔加(jia)滿洗滌(di)液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩(shuai)去(qu)洗滌(di)液(ye),用吸水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操作(zuo)4次(ci)。如(ru)果用洗板(ban)機(ji)洗滌(di),洗滌(di)次(ci)數(shu)增(zeng)加(jia)壹次(ci)。

          5、每(mei)孔加(jia)入(ru)100ul的(de)親和(he)鏈(lian)酶(mei)素-HRP,輕輕振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

          6、甩去孔內(nei)液(ye)體,每(mei)孔加(jia)滿洗滌(di)液(ye),振(zhen)蕩(dang)30秒(miao),甩(shuai)去(qu)洗滌(di)液(ye),用吸水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操作(zuo)4次(ci)。如(ru)果用洗板(ban)機(ji)洗滌(di),洗滌(di)次(ci)數(shu)增(zeng)加(jia)壹次(ci)。

          7、每(mei)孔加(jia)入(ru)底(di)物A、B各(ge)50ul,輕輕振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃溫育(yu)5分(fen)鐘(zhong)。避免光照(zhao)。

          8、取出(chu)酶標板,迅速加(jia)入(ru)50ul終止(zhi)液(ye),加(jia)入(ru)終止(zhi)液(ye)後應(ying)立即測定結果(guo)。

          9、在450nm波長處(chu)測定(ding)各(ge)孔的(de)OD值(zhi)。

          操作(zuo)註(zhu)意(yi)事項(xiang):

          1、試劑應(ying)按標(biao)簽說明(ming)書儲(chu)存,使(shi)用前恢復(fu)到室溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後(hou)的(de)標準品應(ying)丟棄(qi),不(bu)可保(bao)存

          2、實驗中不(bu)用的(de)板條應(ying)立即放回包(bao)裝袋中,密(mi)封保(bao)存,以免變(bian)質。

          3、不(bu)用的(de)其它試劑應(ying)包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同(tong)批(pi)號的(de)試劑不(bu)要(yao)混(hun)用。保(bao)質前使(shi)用。

          4、使(shi)用壹次(ci)性(xing)的(de)吸頭以免交(jiao)叉汙(wu)染(ran),吸取(qu)終止(zhi)液(ye)和(he)底(di)物A、B液時(shi),避(bi)免(mian)使(shi)用帶金屬部(bu)分(fen)的(de)加(jia)樣器。

          5、使(shi)用幹凈的(de)塑(su)料容器配置洗滌(di)液(ye)。使(shi)用前充(chong)分(fen)混(hun)勻試劑(ji)盒(he)裏的(de)各(ge)種(zhong)成份及(ji)樣品。

          6、底(di)物A應(ying)揮發,避免長時(shi)間(jian)打(da)開蓋(gai)子。底(di)物B對光敏(min)感,避免長時(shi)間(jian)暴(bao)露(lu)於(yu)光下(xia)。避免(mian)用手(shou)接(jie)觸(chu),有毒。實(shi)驗完(wan)成(cheng)後(hou)應(ying)立即讀取OD值(zhi)。

          7、加(jia)入(ru)試劑(ji)的(de)順序應(ying)壹致(zhi),以保(bao)證所有反應(ying)板孔溫育(yu)的(de)時(shi)間(jian)壹(yi)樣。按照(zhao)說(shuo)明(ming)書中標明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加(jia)液的(de)量及(ji)順序進(jin)行(xing)溫育(yu)操作(zuo)。

          壹般來(lai)講(jiang),96T能檢(jian)測90個樣本(ben),48T能(neng)檢(jian)測42個樣本(ben),這(zhe)裏面(mian)需(xu)要(yao)用標樣來(lai)做(zuo)標(biao)準曲(qu)線,所以各(ge)位需(xu)要(yao)做實驗的(de)老師們,請(qing)在(zai)購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)時(shi)候(hou)註(zhu)意(yi),需(xu)要(yao)做多少(shao)個樣本(ben),在(zai)決定買(mai)多大(da)規格(ge)的(de)試劑盒(he),以免做(zuo)實(shi)驗時(shi)出(chu)現(xian)試(shi)劑盒(he)不(bu)夠(gou)用或(huo)者(zhe)浪費(fei)!

          原理:將特異性抗(kang)體包(bao)被於固相載體表面(mian),經洗滌(di)後(hou)分(fen)成(cheng)兩組:壹組(zu)加(jia)酶標(biao)記抗(kang)原和(he)被(bei)測(ce)抗(kang)原的(de)混合液(ye),另壹組(zu)只加(jia)酶標(biao)記抗(kang)原,經孵育(yu)洗滌(di)後(hou)加(jia)底(di)物顯(xian)色,這兩組(zu)底(di)物降(jiang)解量之差(cha),即為(wei)所要(yao)測(ce)定的(de)未知抗(kang)原的(de)量。

          大(da)豆脂(zhi)肪氧化(hua)酶3(LOX3)elisa檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

          大(da)豆β-乳(ru)球(qiu)蛋白(β-LG)elisa檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

          大(da)豆7S球(qiu)蛋白(GLB7s)elisa檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

          對蝦(xia)肝腸(chang)孢(bao)蟲(EHP)elisa檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

          對蝦(xia)白斑(ban)病毒(WSSV)elisa檢(jian)測試(shi)劑盒(he)

          犬胸苷(gan)激酶(mei)1TK1 ELISA試(shi)劑盒(he)

          犬血小板因子4PF-4;CXCL4 elisa試劑(ji)盒(he)

          犬可溶性補體激活(huo)產(chan)物SC5b9 elisa試劑盒

          犬皰(pao)疹(zhen)病毒抗(kang)體V-Ab elisa試劑盒

          犬線粒(li)體分(fen)裂(lie)蛋白Drp-1 elisa試劑(ji)盒

          犬巴(ba)貝(bei)斯抗(kang)體Babesia Ab elisa試劑盒

          犬流感H3N2亞型(xing)抗(kang)體FLU-H3N2 Ab ELISA試劑盒

          雞(ji)13,14二(er)氫(qing)15-酮前列腺素F2α(PGFM)elisa試劑(ji)盒

          雞(ji)MAX二(er)聚(ju)化(hua)蛋白1(mxd1)elisa試劑(ji)盒

          雞(ji)Mx基(ji)因(Mx Gene)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)













































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