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        1. 產(chan)品中(zhong)心(xin)/ products

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          ELISA法是免疫診(zhen)斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項(xiang)新(xin)技(ji)術(shu),現已成功(gong)地應(ying)用(yong)於多種病(bing)原(yuan)微生(sheng)物(wu)所引起(qi)的傳染(ran)病、寄生(sheng)蟲病及非(fei)傳染(ran)病等方(fang)面(mian)的免疫診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應(ying)用於(yu)大(da)分子(zi)抗(kang)原(yuan)和(he)小分子(zi)抗(kang)原(yuan)的(de)定量(liang)測定,根據已經使用(yong)的(de)結(jie)果,認(ren)為ELISA法具有(you)靈(ling)敏、特異(yi)、簡(jian)單(dan)、快(kuai)速(su)、穩(wen)定及(ji)易(yi)於自(zi)動(dong)化(hua)操(cao)作(zuo)等特點(dian)。不僅適(shi)用於(yu)臨床(chuang)標(biao)本(ben)的檢(jian)查,而(er)且由(you)於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可以(yi)檢(jian)查幾(ji)百甚(shen)至上千份(fen)標(biao)本(ben),因此(ci),也適(shi)合(he)於血(xue)清流(liu)行(xing)病學(xue)調查。本(ben)法不僅可以用來測定抗(kang)ti,而且也可(ke)用(yong)於測定體(ti)液中(zhong)的(de)循環(huan)抗(kang)原(yuan),所以也是(shi)壹(yi)種(zhong)早(zao)期診(zhen)斷(duan)的良(liang)好方(fang)法。因此(ci)ELISA法在生(sheng)物(wu)醫學(xue)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應用範圍(wei)日益擴大(da),

          組成結(jie)構

          1、血(xue)清:操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避免任何細胞刺激(ji)。使用不含熱原和內du素的(de)試管(guan)。收集(ji)血(xue)液後,1000×g離心(xin)10分鐘將血(xue)紅(hong)細胞迅速(su)小心(xin)地分離。

          2、2、血(xue)漿:EDTA、檸(ning)檬suan鹽(yan)、肝(gan)素血(xue)漿可(ke)用於檢測。1000×g離心(xin)30分鐘去(qu)除顆粒(li)。

          3、細胞上清液:1000×g離心(xin)10分鐘去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合(he)物(wu)。

          4、組(zu)織勻(yun)漿(jiang):將組織加(jia)入適(shi)量生(sheng)理鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。1000×g離心(xin)10分鐘,取(qu)上(shang)清液。

          5、保(bao)存(cun):如果樣(yang)品不立即(ji)使用,應(ying)將其分成小部分-70℃保(bao)存(cun),避免反(fan)復冷(leng)凍(dong)。盡可(ke)能的不要(yao)使(shi)用(yong)溶(rong)血(xue)。如果血(xue)清中(zhong)大(da)量(liang)顆(ke)粒,檢測前先(xian)離心(xin)或過濾。不要(yao)在(zai)37℃或更高的(de)溫(wen)度(du)加熱解凍(dong)。應(ying)在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地充(chong)分解凍(dong)。

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          兔(tu)磷酸(suan)化蛋(dan)白(bai)激(ji)酶C(P-PKC)ELISA試劑(ji)盒

          操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou):

          1、使(shi)用(yong)前(qian),將所有(you)試劑(ji)充(chong)分混(hun)勻(yun)。不要(yao)使(shi)液體產(chan)生(sheng)大量(liang)的泡(pao)沫(mo),以(yi)免加樣(yang)時(shi)加入(ru)大(da)量(liang)的氣泡(pao),產(chan)生(sheng)加樣(yang)上(shang)的(de)誤差。

          2、根據待(dai)測樣(yang)品數量(liang)加上(shang)標(biao)準(zhun)品的數(shu)量決(jue)定所需(xu)的(de)板(ban)條數。每(mei)個標(biao)準(zhun)品和空(kong)白(bai)孔建議(yi)做復(fu)孔。每(mei)個樣(yang)品根據自己(ji)的數(shu)量來定,能(neng)使(shi)用復(fu)孔的盡量(liang)做復(fu)孔。

          3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好(hao)後(hou)的(de)標(biao)準(zhun)品50ul於反(fan)應孔、加入待(dai)測樣(yang)品50ul於反(fan)應孔內。立即(ji)加入50ul標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板(ban),輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育45分鐘。

          4、甩(shuai)去(qu)孔內液體,每(mei)孔加滿洗滌(di)液,振(zhen)蕩30秒,甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌(di)液,用吸(xi)水(shui)紙拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作(zuo)4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機洗滌(di),洗滌(di)次數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。

          5、每(mei)孔加入100ul的(de)親(qin)和鏈(lian)酶素-HRP,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育30分鐘。

          6、甩(shuai)去(qu)孔內液體,每(mei)孔加滿洗滌(di)液,振(zhen)蕩30秒,甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌(di)液,用吸(xi)水(shui)紙拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作(zuo)4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機洗滌(di),洗滌(di)次數增(zeng)加壹(yi)次(ci)。

          7、每(mei)孔加入底物(wu)A、B各(ge)50ul,輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育5分鐘。避免光照。

          8、取(qu)出(chu)酶標板(ban),迅速(su)加入50ul終(zhong)止(zhi)液,加入終止(zhi)液後應立即(ji)測定結(jie)果。

          9、在(zai)450nm波(bo)長處測定各(ge)孔的OD值。

          操(cao)作(zuo)註意(yi)事項(xiang):

          1、試劑(ji)應(ying)按標(biao)簽說(shuo)明書(shu)儲(chu)存(cun),使(shi)用前恢復到(dao)室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後的(de)標準(zhun)品應丟棄,不可保(bao)存(cun)

          2、實(shi)驗中(zhong)不用的(de)板(ban)條應立即(ji)放回包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密(mi)封(feng)保(bao)存(cun),以(yi)免變(bian)質。

          3、不用的(de)其它試劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋(gai)好。不同批號(hao)的(de)試劑(ji)不要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質前使(shi)用。

          4、使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭以(yi)免交叉(cha)汙染(ran),吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液和底物(wu)A、B液時(shi),避免使用(yong)帶(dai)金(jin)屬(shu)部分的加樣(yang)器(qi)。

          5、使(shi)用(yong)幹(gan)凈(jing)的塑(su)料容(rong)器(qi)配置洗滌(di)液。使用前充(chong)分混(hun)勻(yun)試劑(ji)盒裏的(de)各種(zhong)成份(fen)及(ji)樣(yang)品。

          6、底物(wu)A應(ying)揮發,避免長時(shi)間(jian)打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對(dui)光敏(min)感,避免長時(shi)間(jian)暴露(lu)於光下(xia)。避免用手(shou)接觸,有(you)毒(du)。實(shi)驗完成後(hou)應(ying)立即(ji)讀取(qu)OD值(zhi)。

          7、加(jia)入(ru)試劑(ji)的(de)順(shun)序(xu)應壹(yi)致(zhi),以(yi)保(bao)證(zheng)所有(you)反(fan)應板(ban)孔溫(wen)育的時(shi)間(jian)壹(yi)樣(yang)。按照說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加液的量及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫(wen)育操作(zuo)。

          壹(yi)般(ban)來講,96T能(neng)檢(jian)測90個樣(yang)本(ben),48T能檢(jian)測42個樣(yang)本(ben),這裏(li)面(mian)需(xu)要(yao)用(yong)標(biao)樣(yang)來做標(biao)準(zhun)曲線(xian),所以各(ge)位需(xu)要(yao)做實(shi)驗的老師們(men),請(qing)在(zai)購買(mai)ELISA試劑(ji)盒的時(shi)候註意(yi),需(xu)要(yao)做多少(shao)個(ge)樣(yang)本(ben),在決(jue)定買(mai)多大規格(ge)的(de)試劑(ji)盒,以免做實(shi)驗時(shi)出現(xian)試劑(ji)盒不夠(gou)用(yong)或者浪費(fei)!

          原(yuan)理(li):將特異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)包(bao)被於(yu)固(gu)相(xiang)載體表(biao)面(mian),經洗滌(di)後分成兩(liang)組:壹(yi)組(zu)加(jia)酶標記(ji)抗(kang)原(yuan)和(he)被測抗(kang)原(yuan)的(de)混(hun)合(he)液,另壹(yi)組(zu)只(zhi)加酶標記(ji)抗(kang)原(yuan),經孵育洗滌(di)後加底物(wu)顯(xian)色(se),這兩(liang)組底物(wu)降解量之(zhi)差,即(ji)為所要(yao)測定的(de)未(wei)知抗(kang)原(yuan)的(de)量(liang)。



          小鼠繁(fan)殖與(yu)呼吸(xi)綜(zong)合(he)征病(bing)毒(du)抗(kang)體(ti)(PRRSV-Ab)elisa試劑(ji)盒

          小鼠甘(gan)油三(san)酯(zhi)水(shui)解酶(TGH)elisa試劑(ji)盒

          小鼠幹(gan)擾素(su)誘導鳥苷酸(suan)結(jie)合(he)蛋白(bai)1(GBP1)elisa試劑(ji)盒

          小鼠黑素(su)皮(pi)質素受(shou)體(ti)4(MC4R)elisa試劑(ji)盒

          小鼠角(jiao)化細胞內分泌因子(zi)(KAF)elisa試劑(ji)盒

          犬胸(xiong)苷激(ji)酶1TK1 ELISA試劑(ji)盒

          犬胸(xiong)苷激(ji)酶1TK1 ELISA試劑(ji)盒

          犬血(xue)小板(ban)因子(zi)4PF-4;CXCL4 elisa試劑(ji)盒

          犬可(ke)溶性(xing)補(bu)體(ti)激(ji)活(huo)產(chan)物(wu)SC5b9 elisa試劑(ji)盒

          犬皰(pao)疹病(bing)毒(du)抗(kang)體(ti)V-Ab elisa試劑(ji)盒

          犬線(xian)粒(li)體分裂蛋白(bai)Drp-1 elisa試劑(ji)盒

          犬巴貝斯抗(kang)體(ti)Babesia Ab elisa試劑(ji)盒

          犬流(liu)感H3N2亞(ya)型抗(kang)體(ti)FLU-H3N2 Ab ELISA試劑(ji)盒

          雞13,14二(er)氫15-酮前(qian)列(lie)腺素F2α(PGFM)elisa試劑(ji)盒

          雞MAX二(er)聚化蛋白(bai)1(mxd1)elisa試劑(ji)盒

          雞Mx基(ji)因(Mx Gene)elisa試劑(ji)盒














































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