雞(ji)尿素(su)(carbamide)elisa試(shi)劑盒

雞(ji)尿素(su)(carbamide)elisa試(shi)劑盒

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ELISA法是(shi)免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)中的壹項新(xin)技(ji)術，現已成功地(di)應(ying)用於(yu)多種病(bing)原微生物所引(yin)起的傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄生蟲病(bing)及非(fei)傳(chuan)染(ran)病(bing)等方面(mian)的免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也已應(ying)用於(yu)大分(fen)子抗(kang)原和(he)小分(fen)子抗(kang)原的定量測(ce)定，根(gen)據已(yi)經(jing)使(shi)用(yong)的結(jie)果，認為(wei)ELISA法具(ju)有(you)靈(ling)敏(min)、特異、簡(jian)單(dan)、快(kuai)速、穩定及易(yi)於(yu)自動(dong)化操(cao)作(zuo)等特點(dian)。不(bu)僅適用(yong)於(yu)臨床標本的檢查(zha)，而(er)且(qie)由於(yu)壹天之(zhi)內可以(yi)檢查(zha)幾百(bai)甚(shen)至上千份(fen)標本(ben),因此(ci)，也(ye)適合於(yu)血(xue)清流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調查(zha)。本法(fa)不(bu)僅可以(yi)用來(lai)測(ce)定抗(kang)ti，而(er)且(qie)也可用(yong)於(yu)測定體液(ye)中的循環(huan)抗(kang)原，所以(yi)也是(shi)壹(yi)種(zhong)早(zao)期(qi)診(zhen)斷(duan)的良好方(fang)法(fa)。因此ELISA法(fa)在生物醫(yi)學(xue)各領域(yu)的應(ying)用範(fan)圍(wei)日益擴(kuo)大(da)，

組成結(jie)構

1、血(xue)清：操(cao)作(zuo)過(guo)程中避免(mian)任何(he)細胞(bao)刺(ci)激。使(shi)用(yong)不(bu)含熱原和(he)內(nei)du素(su)的試(shi)管。收(shou)集血(xue)液後，1000×g離心(xin)10分(fen)鐘將血(xue)紅細(xi)胞迅(xun)速小心(xin)地(di)分(fen)離。

2、2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬suan鹽、肝素(su)血(xue)漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒(li)。

3、細胞(bao)上清液(ye)：1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚(ju)合物(wu)。

4、組織勻漿(jiang)：將組織加(jia)入適量生理(li)鹽水搗(dao)碎。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘，取上清液(ye)。

5、保(bao)存(cun)：如(ru)果樣品(pin)不(bu)立(li)即使(shi)用(yong)，應(ying)將其(qi)分(fen)成小部分(fen)-70℃保(bao)存(cun)，避免(mian)反(fan)復(fu)冷(leng)凍。盡可能(neng)的不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶(rong)血(xue)。如(ru)果血(xue)清中(zhong)大(da)量顆(ke)粒(li)，檢測前(qian)先離心(xin)或過(guo)濾。不(bu)要(yao)在37℃或更(geng)高的溫度加(jia)熱解凍。應(ying)在室(shi)溫下解凍並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻地(di)充(chong)分(fen)解凍。

雞(ji)尿素(su)(carbamide)elisa試(shi)劑盒

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)：

1、使(shi)用(yong)前(qian)，將所有(you)試(shi)劑充分(fen)混勻。不(bu)要(yao)使(shi)液(ye)體(ti)產(chan)生大量的泡沫(mo)，以(yi)免(mian)加(jia)樣時(shi)加(jia)入大(da)量的氣泡(pao)，產生加(jia)樣上的誤差。

2、根(gen)據待(dai)測(ce)樣品數(shu)量加(jia)上標(biao)準品(pin)的數(shu)量決定所需(xu)的板條(tiao)數(shu)。每個(ge)標準品(pin)和(he)空(kong)白孔建議(yi)做(zuo)復(fu)孔。每個(ge)樣品(pin)根(gen)據自(zi)己(ji)的數(shu)量來(lai)定，能使(shi)用(yong)復(fu)孔(kong)的盡量做(zuo)復(fu)孔。

3、加(jia)入稀(xi)釋(shi)好後的標準品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔、加(jia)入待(dai)測(ce)樣品50ul於(yu)反應(ying)孔內(nei)。立(li)即加(jia)入50ul標(biao)記的抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板，輕(qing)輕(qing)振蕩混(hun)勻，37℃溫育45分(fen)鐘。

4、甩(shuai)去孔內液體，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye)，振蕩30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌液(ye)，用吸水紙拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操(cao)作4次。如(ru)果用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次數(shu)增加(jia)壹次。

5、每孔(kong)加(jia)入100ul的親和(he)鏈(lian)酶(mei)素-HRP，輕(qing)輕振蕩混(hun)勻，37℃溫育30分(fen)鐘。

6、甩(shuai)去孔內液體，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye)，振蕩30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌液(ye)，用吸水紙拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操(cao)作4次。如(ru)果用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次數(shu)增加(jia)壹次。

7、每孔(kong)加(jia)入底(di)物A、B各50ul，輕輕(qing)振蕩混(hun)勻，37℃溫育5分(fen)鐘。避免(mian)光照(zhao)。

8、取出酶(mei)標板，迅(xun)速加(jia)入50ul終(zhong)止液，加(jia)入終(zhong)止液後應(ying)立(li)即測(ce)定結(jie)果。

9、在450nm波(bo)長處(chu)測定各孔的OD值(zhi)。

操(cao)作(zuo)註意事(shi)項(xiang)：

1、試(shi)劑應(ying)按標(biao)簽(qian)說明(ming)書儲存(cun)，使(shi)用(yong)前(qian)恢復到(dao)室溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後的標準品(pin)應(ying)丟棄(qi)，不(bu)可保(bao)存(cun)

2、實(shi)驗(yan)中(zhong)不(bu)用的板條(tiao)應(ying)立(li)即放(fang)回包裝袋中，密(mi)封保(bao)存(cun)，以(yi)免(mian)變(bian)質(zhi)。

3、不(bu)用的其(qi)它試(shi)劑應(ying)包裝好或蓋(gai)好。不(bu)同批號的試(shi)劑不(bu)要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。

4、使(shi)用(yong)壹(yi)次性的吸頭以(yi)免(mian)交叉(cha)汙(wu)染(ran)，吸取終(zhong)止液和(he)底(di)物(wu)A、B液(ye)時(shi)，避免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金(jin)屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣器(qi)。

5、使(shi)用(yong)幹凈(jing)的塑(su)料容器配(pei)置(zhi)洗(xi)滌液(ye)。使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)混勻試(shi)劑盒裏(li)的各種成份及樣(yang)品。

6、底(di)物(wu)A應(ying)揮發(fa)，避免(mian)長時間打開蓋子。底物(wu)B對光敏(min)感，避免(mian)長時間暴(bao)露(lu)於(yu)光下(xia)。避免(mian)用(yong)手(shou)接(jie)觸(chu)，有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完(wan)成後應(ying)立(li)即讀(du)取OD值(zhi)。

7、加(jia)入試(shi)劑的順序應(ying)壹致(zhi)，以(yi)保(bao)證(zheng)所有(you)反(fan)應(ying)板孔(kong)溫育的時間壹樣。按照(zhao)說(shuo)明(ming)書中標明的時間、加(jia)液的量及順(shun)序進行溫育操作。

壹(yi)般來(lai)講(jiang)，96T能(neng)檢測90個(ge)樣本(ben)，48T能(neng)檢測42個(ge)樣本(ben)，這(zhe)裏(li)面(mian)需(xu)要(yao)用(yong)標(biao)樣(yang)來(lai)做(zuo)標(biao)準曲(qu)線(xian)，所以(yi)各位需要(yao)做(zuo)實(shi)驗(yan)的老師們，請在購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑盒的時候註意，需(xu)要(yao)做(zuo)多(duo)少(shao)個樣本，在決定買(mai)多大規格的試(shi)劑盒，以(yi)免(mian)做(zuo)實(shi)驗(yan)時(shi)出現試(shi)劑盒不(bu)夠用或者(zhe)浪費！

原理(li)：將特異性(xing)抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)於(yu)固(gu)相(xiang)載體表(biao)面(mian)，經(jing)洗(xi)滌後分(fen)成兩(liang)組：壹(yi)組加(jia)酶(mei)標記(ji)抗(kang)原和(he)被(bei)測抗(kang)原的混合液(ye)，另(ling)壹組(zu)只(zhi)加(jia)酶(mei)標記(ji)抗(kang)原，經孵(fu)育洗(xi)滌後加(jia)底物(wu)顯(xian)色，這(zhe)兩(liang)組底(di)物降解量之(zhi)差，即為(wei)所要(yao)測(ce)定的未知(zhi)抗(kang)原的量。

大(da)豆(dou)脂(zhi)肪(fang)氧化(hua)酶(mei)3(LOX3)elisa檢測試(shi)劑盒

大豆(dou)β-乳(ru)球(qiu)蛋白(β-LG)elisa檢測試(shi)劑盒

大豆(dou)7S球(qiu)蛋(dan)白(GLB7s)elisa檢測試(shi)劑盒

對蝦肝腸孢蟲(EHP)elisa檢測試(shi)劑盒

對蝦白斑病(bing)毒(du)(WSSV)elisa檢測試(shi)劑盒

對蝦黃(huang)頭病(bing)毒(du)(YHV)elisa檢測試(shi)劑盒

對蝦甲(jia)殼(ke)動(dong)物高(gao)血(xue)糖激素(CHH)elisa檢測試(shi)劑盒

犬(quan)胸(xiong)苷(gan)激酶(mei)1TK1 ELISA試(shi)劑盒

犬(quan)血(xue)小板因(yin)子4PF-4；CXCL4 elisa試(shi)劑盒

犬(quan)可溶(rong)性(xing)補(bu)體(ti)激活(huo)產物(wu)SC5b9 elisa試(shi)劑盒

犬(quan)皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒(du)抗(kang)體(ti)V-Ab elisa試(shi)劑盒

犬(quan)線(xian)粒(li)體分(fen)裂蛋(dan)白Drp-1 elisa試(shi)劑盒

犬(quan)巴貝斯(si)抗(kang)體(ti)Babesia Ab elisa試(shi)劑盒

犬(quan)流(liu)感H3N2亞型(xing)抗(kang)體(ti)FLU-H3N2 Ab ELISA試(shi)劑盒

雞(ji)13,14二氫(qing)15-酮前(qian)列(lie)腺(xian)素F2α(PGFM)elisa試(shi)劑盒

雞(ji)MAX二聚(ju)化(hua)蛋(dan)白1(mxd1)elisa試(shi)劑盒

雞(ji)Mx基因(yin)(Mx Gene)elisa試(shi)劑盒