雞(ji)核(he)糖核(he)酸酶(mei)L(RNASEL)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

雞(ji)核(he)糖核(he)酸酶(mei)L(RNASEL)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

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ELISA法是免疫(yi)診(zhen)斷(duan)中(zhong)的壹項(xiang)新(xin)技術，現(xian)已(yi)成功(gong)地(di)應用於多(duo)種(zhong)病原(yuan)微生物(wu)所引(yin)起的傳染病、寄(ji)生蟲病及(ji)非(fei)傳(chuan)染病(bing)等方(fang)面的免疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也(ye)已(yi)應用於大(da)分子(zi)抗原和小(xiao)分子(zi)抗原的定量測定(ding)，根(gen)據(ju)已(yi)經(jing)使用(yong)的結果(guo)，認(ren)為ELISA法具有靈(ling)敏、特(te)異、簡單、快(kuai)速、穩(wen)定及易(yi)於自(zi)動化操作等特點(dian)。不(bu)僅適用(yong)於臨床(chuang)標(biao)本的檢(jian)查，而且(qie)由(you)於壹天之內可(ke)以檢(jian)查幾百(bai)甚至(zhi)上千份(fen)標(biao)本,因此(ci)，也適(shi)合(he)於血清(qing)流(liu)行病(bing)學調查。本法不(bu)僅可以(yi)用來測定(ding)抗ti，而且也(ye)可(ke)用於測定(ding)體(ti)液中(zhong)的循環(huan)抗原，所以(yi)也是(shi)壹種(zhong)早(zao)期(qi)診(zhen)斷(duan)的良(liang)好(hao)方(fang)法。因此(ci)ELISA法在(zai)生物(wu)醫學各領域的應用範圍日益擴(kuo)大(da)，

組成結構

1、血清(qing)：操(cao)作過程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激。使(shi)用不(bu)含熱(re)原和內du素(su)的試(shi)管(guan)。收集(ji)血(xue)液(ye)後(hou)，1000×g離(li)心10分鐘(zhong)將血(xue)紅(hong)細胞迅(xun)速小(xiao)心地(di)分離(li)。

2、2、血漿：EDTA、檸檬(meng)suan鹽、肝素(su)血(xue)漿可用於檢(jian)測。1000×g離(li)心30分鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)。

3、細胞(bao)上清液：1000×g離(li)心10分鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和聚合(he)物。

4、組織勻(yun)漿：將組織加入適量(liang)生理(li)鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。1000×g離(li)心10分鐘(zhong)，取(qu)上清液。

5、保存：如果(guo)樣(yang)品(pin)不(bu)立(li)即使用，應(ying)將其(qi)分成小(xiao)部(bu)分-70℃保存，避免反(fan)復(fu)冷(leng)凍(dong)。盡可能(neng)的不(bu)要使用(yong)溶血。如果(guo)血清(qing)中(zhong)大(da)量(liang)顆粒(li)，檢(jian)測前(qian)先(xian)離(li)心或過濾。不(bu)要在(zai)37℃或更(geng)高(gao)的溫度加熱解(jie)凍(dong)。應在(zai)室溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣(yang)品(pin)均勻地(di)充分解(jie)凍(dong)。

雞核(he)糖核(he)酸酶(mei)L(RNASEL)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

操(cao)作步(bu)驟：

1、使(shi)用(yong)前，將所有試(shi)劑(ji)充分混(hun)勻(yun)。不(bu)要使液(ye)體產(chan)生大(da)量(liang)的泡沫，以免加樣(yang)時加入大(da)量(liang)的氣(qi)泡，產(chan)生加樣(yang)上的誤(wu)差。

2、根(gen)據(ju)待(dai)測樣(yang)品(pin)數(shu)量加上標(biao)準(zhun)品(pin)的數(shu)量決定所需(xu)的板條數(shu)。每(mei)個標(biao)準(zhun)品(pin)和空白(bai)孔建(jian)議做復(fu)孔(kong)。每(mei)個樣(yang)品(pin)根(gen)據(ju)自(zi)己的數(shu)量來定，能使用(yong)復(fu)孔(kong)的盡量做復(fu)孔(kong)。

3、加入稀(xi)釋好(hao)後(hou)的標(biao)準(zhun)品(pin)50ul於反應孔、加入待(dai)測樣(yang)品(pin)50ul於反應孔內(nei)。立(li)即加入50ul標(biao)記(ji)的抗體。蓋(gai)上膜(mo)板，輕(qing)輕(qing)振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育45分鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌液(ye)，振蕩(dang)30秒(miao)，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液(ye)，用(yong)吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

5、每(mei)孔加入100ul的親和鏈酶(mei)素-HRP，輕(qing)輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育30分鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌液(ye)，振蕩(dang)30秒(miao)，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液(ye)，用(yong)吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復(fu)此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)滌，洗(xi)滌次(ci)數(shu)增(zeng)加壹次(ci)。

7、每(mei)孔加入底(di)物A、B各50ul，輕輕(qing)振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育5分鐘(zhong)。避免光(guang)照。

8、取(qu)出(chu)酶(mei)標(biao)板(ban)，迅(xun)速加入50ul終(zhong)止(zhi)液，加入終(zhong)止(zhi)液後(hou)應(ying)立(li)即測定(ding)結果(guo)。

9、在(zai)450nm波(bo)長(chang)處(chu)測定(ding)各孔的OD值。

操(cao)作註意事(shi)項(xiang)：

1、試(shi)劑(ji)應(ying)按標(biao)簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存，使(shi)用前(qian)恢(hui)復(fu)到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)丟(diu)棄(qi)，不(bu)可(ke)保存

2、實驗中(zhong)不(bu)用(yong)的板條應立即放回(hui)包裝(zhuang)袋中(zhong)，密(mi)封保存，以免變質。

3、不(bu)用(yong)的其(qi)它(ta)試(shi)劑(ji)應(ying)包裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋(gai)好(hao)。不(bu)同(tong)批號的試(shi)劑(ji)不(bu)要混(hun)用(yong)。保質前使(shi)用(yong)。

4、使(shi)用(yong)壹次(ci)性的吸頭(tou)以免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液和底(di)物A、B液(ye)時，避(bi)免使(shi)用帶(dai)金屬(shu)部分的加樣(yang)器(qi)。

5、使(shi)用(yong)幹凈(jing)的塑料容(rong)器配置洗(xi)滌液(ye)。使(shi)用(yong)前(qian)充分混(hun)勻(yun)試(shi)劑(ji)盒(he)裏的各種(zhong)成份(fen)及(ji)樣(yang)品(pin)。

6、底(di)物A應(ying)揮(hui)發，避免長(chang)時間打開蓋(gai)子(zi)。底(di)物B對(dui)光敏感(gan)，避免長(chang)時間暴露(lu)於光下(xia)。避免用(yong)手接觸(chu)，有毒(du)。實驗完成後(hou)應(ying)立(li)即讀取(qu)OD值。

7、加入試(shi)劑(ji)的順序應壹致(zhi)，以保證所有反(fan)應板孔溫(wen)育的時間壹樣(yang)。按(an)照說明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的時間、加液的量及順序進(jin)行溫(wen)育操(cao)作。

壹般(ban)來講，96T能(neng)檢(jian)測90個(ge)樣(yang)本，48T能檢(jian)測42個(ge)樣(yang)本，這裏面需(xu)要用標(biao)樣(yang)來做標(biao)準(zhun)曲(qu)線，所以(yi)各位需(xu)要做實驗的老師(shi)們(men)，請在(zai)購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的時候(hou)註意(yi)，需(xu)要做多(duo)少個樣(yang)本，在(zai)決定買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的試(shi)劑(ji)盒(he)，以免做(zuo)實驗時出(chu)現(xian)試(shi)劑(ji)盒(he)不(bu)夠用或(huo)者(zhe)浪(lang)費！

原(yuan)理(li)：將特異性抗體包(bao)被(bei)於固相載體表(biao)面，經(jing)洗(xi)滌後(hou)分成兩組：壹組加酶(mei)標(biao)記(ji)抗原和被(bei)測抗原的混(hun)合(he)液，另(ling)壹組只(zhi)加酶(mei)標(biao)記(ji)抗原，經(jing)孵育洗(xi)滌後(hou)加底(di)物顯(xian)色，這兩組底(di)物降(jiang)解(jie)量(liang)之差，即為所要測定(ding)的未知抗原的量。

大(da)豆脂(zhi)肪(fang)氧(yang)化酶(mei)3(LOX3)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)豆β-乳(ru)球(qiu)蛋(dan)白(bai)(β-LG)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

大(da)豆7S球(qiu)蛋(dan)白(bai)(GLB7s)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

對蝦(xia)肝腸(chang)孢(bao)蟲(EHP)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

對蝦(xia)白(bai)斑病(bing)毒(WSSV)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

犬胸(xiong)苷(gan)激(ji)酶(mei)1TK1 ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

犬血(xue)小(xiao)板(ban)因子(zi)4PF-4；CXCL4 elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

犬可(ke)溶性補體(ti)激(ji)活產物(wu)SC5b9 elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

犬皰(pao)疹(zhen)病毒(du)抗體V-Ab elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

犬線(xian)粒(li)體分裂(lie)蛋(dan)白(bai)Drp-1 elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

犬巴(ba)貝(bei)斯(si)抗體Babesia Ab elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

犬流(liu)感(gan)H3N2亞(ya)型(xing)抗體FLU-H3N2 Ab ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

雞13,14二(er)氫(qing)15-酮(tong)前列(lie)腺(xian)素F2α(PGFM)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

雞MAX二(er)聚(ju)化(hua)蛋(dan)白(bai)1(mxd1)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

雞Mx基(ji)因(Mx Gene)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)