雞鈣敏(min)感(gan)受(shou)體蛋(dan)白(bai)(CaSR)elisa試劑(ji)盒

雞鈣(gai)敏(min)感(gan)受(shou)體蛋(dan)白(bai)(CaSR)elisa試劑(ji)盒

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ELISA法是(shi)免(mian)疫診(zhen)斷中(zhong)的壹項新技術，現(xian)已(yi)成功(gong)地應用於多種病(bing)原微(wei)生物所(suo)引(yin)起(qi)的傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄(ji)生蟲病(bing)及非(fei)傳(chuan)染(ran)病(bing)等(deng)方面的免(mian)疫診(zhen)斷。也(ye)已(yi)應用於大分(fen)子抗原和小分(fen)子抗原的定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，根(gen)據已(yi)經使用的結果(guo)，認為ELISA法具(ju)有(you)靈敏(min)、特異、簡單、快(kuai)速、穩(wen)定(ding)及易(yi)於自動化操作等(deng)特點(dian)。不(bu)僅(jin)適用於臨(lin)床標(biao)本(ben)的檢(jian)查(zha)，而(er)且(qie)由(you)於壹天之內可以檢(jian)查(zha)幾(ji)百甚(shen)至上千(qian)份標(biao)本(ben),因(yin)此(ci)，也(ye)適合於血清(qing)流行病(bing)學(xue)調(tiao)查(zha)。本(ben)法(fa)不(bu)僅(jin)可以用來(lai)測(ce)定(ding)抗ti，而且(qie)也(ye)可用於測(ce)定(ding)體液中(zhong)的循(xun)環(huan)抗(kang)原，所以也(ye)是(shi)壹種早(zao)期(qi)診斷的良(liang)好方法(fa)。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物醫(yi)學(xue)各(ge)領域的應用範(fan)圍(wei)日益(yi)擴(kuo)大，

組成(cheng)結構

1、血清(qing)：操作(zuo)過程中(zhong)避免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞刺(ci)激(ji)。使用不(bu)含(han)熱原和內du素(su)的試(shi)管(guan)。收(shou)集(ji)血液後(hou)，1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)將血紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小心地分(fen)離。

2、2、血漿(jiang)：EDTA、檸檬suan鹽(yan)、肝素(su)血漿(jiang)可用於檢(jian)測(ce)。1000×g離心30分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆粒(li)。

3、細(xi)胞上清(qing)液：1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆粒(li)和(he)聚(ju)合物。

4、組(zu)織勻漿(jiang)：將組(zu)織加入(ru)適量(liang)生理鹽(yan)水搗(dao)碎。1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)，取上清(qing)液。

5、保(bao)存：如(ru)果(guo)樣(yang)品不(bu)立(li)即使用，應將其(qi)分(fen)成(cheng)小部分(fen)-70℃保(bao)存，避(bi)免反復(fu)冷(leng)凍。盡可能(neng)的不(bu)要(yao)使用溶(rong)血。如果(guo)血清(qing)中(zhong)大量(liang)顆粒(li)，檢(jian)測(ce)前先(xian)離心或過(guo)濾。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或更(geng)高(gao)的溫度加熱解(jie)凍。應在(zai)室溫下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣品均(jun)勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍。

雞鈣(gai)敏(min)感(gan)受(shou)體蛋(dan)白(bai)(CaSR)elisa試劑(ji)盒

操(cao)作步(bu)驟：

1、使用前，將所(suo)有(you)試劑(ji)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)。不(bu)要(yao)使液體產生大量(liang)的泡(pao)沫(mo)，以(yi)免(mian)加樣(yang)時(shi)加入(ru)大量(liang)的氣(qi)泡，產生加樣(yang)上的誤(wu)差。

2、根(gen)據待(dai)測(ce)樣(yang)品數量(liang)加上標(biao)準品的數(shu)量(liang)決(jue)定(ding)所需的板條數。每(mei)個標(biao)準品和空(kong)白(bai)孔建(jian)議做復孔(kong)。每(mei)個樣(yang)品根(gen)據自(zi)己的數(shu)量(liang)來定(ding)，能(neng)使用復(fu)孔(kong)的盡(jin)量(liang)做復孔(kong)。

3、加入(ru)稀(xi)釋好後的標(biao)準品50ul於反應孔、加入(ru)待(dai)測(ce)樣(yang)品50ul於反應孔內。立(li)即加入(ru)50ul標(biao)記的抗(kang)體。蓋上膜板，輕輕(qing)振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育45分(fen)鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去孔內液體，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌液，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌液，用吸(xi)水紙拍(pai)幹(gan)。重復此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機洗(xi)滌，洗(xi)滌次數增(zeng)加壹次。

5、每(mei)孔加入(ru)100ul的親(qin)和(he)鏈(lian)酶素(su)-HRP，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去孔內液體，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌液，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌液，用吸(xi)水紙拍(pai)幹(gan)。重復此(ci)操作4次(ci)。如果(guo)用洗(xi)板機洗(xi)滌，洗(xi)滌次數增(zeng)加壹次。

7、每(mei)孔加入(ru)底(di)物A、B各(ge)50ul，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育5分(fen)鐘(zhong)。避免(mian)光照。

8、取(qu)出酶標(biao)板，迅速(su)加入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液(ye)，加入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)後應立(li)即測(ce)定(ding)結果(guo)。

9、在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測(ce)定(ding)各(ge)孔的OD值(zhi)。

操(cao)作註意事項：

1、試(shi)劑(ji)應按標(biao)簽說明書(shu)儲(chu)存(cun)，使用前恢復(fu)到室溫。稀稀過後(hou)的標(biao)準品應丟棄(qi)，不(bu)可保(bao)存

2、實(shi)驗(yan)中(zhong)不(bu)用的板條應立(li)即放(fang)回包(bao)裝(zhuang)袋中(zhong)，密封保(bao)存，以(yi)免變(bian)質(zhi)。

3、不(bu)用的其(qi)它(ta)試劑(ji)應包(bao)裝(zhuang)好或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)不(bu)要(yao)混(hun)用。保(bao)質(zhi)前使用。

4、使用壹次性(xing)的吸(xi)頭(tou)以免交叉(cha)汙(wu)染(ran)，吸(xi)取終(zhong)止(zhi)液(ye)和底物A、B液(ye)時，避(bi)免使用帶(dai)金(jin)屬(shu)部分(fen)的加樣(yang)器。

5、使用幹(gan)凈(jing)的塑(su)料(liao)容器配(pei)置洗(xi)滌液。使用前充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)試(shi)劑(ji)盒裏(li)的各(ge)種成份(fen)及樣品。

6、底(di)物A應揮發(fa)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間打開蓋子。底物B對(dui)光(guang)敏(min)感(gan)，避免長(chang)時(shi)間暴(bao)露於光下(xia)。避免(mian)用手(shou)接(jie)觸，有(you)毒。實(shi)驗(yan)完成後(hou)應立(li)即讀(du)取(qu)OD值。

7、加入(ru)試(shi)劑(ji)的順(shun)序應壹致，以保(bao)證所(suo)有(you)反應板孔溫育的時(shi)間壹樣。按照說明書(shu)中(zhong)標(biao)明的時(shi)間、加液(ye)的量(liang)及順序進(jin)行溫育操作。

壹般來講(jiang)，96T能(neng)檢(jian)測(ce)90個(ge)樣(yang)本(ben)，48T能(neng)檢(jian)測(ce)42個(ge)樣(yang)本(ben)，這(zhe)裏(li)面需要(yao)用標(biao)樣來(lai)做標(biao)準曲(qu)線，所(suo)以(yi)各(ge)位需要(yao)做實驗(yan)的老(lao)師們，請(qing)在(zai)購買ELISA試(shi)劑(ji)盒的時(shi)候(hou)註意，需要(yao)做多少個(ge)樣(yang)本(ben)，在(zai)決(jue)定(ding)買多大規格的試(shi)劑(ji)盒，以(yi)免(mian)做實驗(yan)時(shi)出現(xian)試(shi)劑(ji)盒不(bu)夠(gou)用或(huo)者(zhe)浪(lang)費(fei)！

原理：將特異性(xing)抗(kang)體包(bao)被於固相(xiang)載(zai)體表(biao)面，經洗(xi)滌後分(fen)成(cheng)兩(liang)組(zu)：壹組加酶標(biao)記抗(kang)原和被測(ce)抗(kang)原的混(hun)合(he)液(ye)，另(ling)壹組只加酶標(biao)記抗(kang)原，經孵育(yu)洗(xi)滌後加底(di)物顯(xian)色(se)，這(zhe)兩(liang)組底物降(jiang)解(jie)量(liang)之差，即為(wei)所要(yao)測(ce)定(ding)的未(wei)知抗原的量(liang)。

大豆脂肪(fang)氧(yang)化(hua)酶3(LOX3)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

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雞(ji)13,14二氫(qing)15-酮(tong)前列腺(xian)素(su)F2α(PGFM)elisa試劑(ji)盒

雞(ji)MAX二聚(ju)化(hua)蛋(dan)白(bai)1(mxd1)elisa試劑(ji)盒

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