大鼠(shu)丙二(er)醇(chun)(SDA)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠(shu)丙二(er)醇(chun)(SDA)elisa試(shi)劑盒(he)

我(wo)司產(chan)品齊全，因(yin)上架數(shu)量有(you)限(xian)，未(wei)能全部(bu)上架，如(ru)需(xu)訂購(gou)或者產(chan)品詳情請直接聯系我司銷售！

規格：96T/48T

包(bao)裝：盒(he)

檢(jian)測原理：采用(yong)雙(shuang)抗(kang)夾(jia)心法(fa)

保質(zhi)期(qi)：六(liu)個月

產(chan)品保存(cun)條件(jian)：2-8°C

應用(yong)範(fan)圍：僅(jin)供(gong)科研(yan)研究(jiu)實(shi)驗(yan)使用(yong)

樣(yang)品形式：血(xue)清(qing)/血(xue)漿/組織(zhi)勻(yun)漿/細胞培養上清(qing)/其它(ta)生(sheng)物(wu)液(ye)體（具體情況(kuang)請咨(zi)詢）

標本(ben)的(de)采(cai)集及(ji)保存(cun)

1.血(xue)清(qing)：室(shi)溫(wen)血液(ye)自然(ran)凝(ning)固(gu)10-20分(fen)鐘後，離心(xin)20分鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細收集上清(qing)。保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次離心(xin)。

2.血(xue)漿：應根據標本(ben)的(de)要求選(xuan)擇(ze)EDTA、檸(ning)檬酸鈉或肝素作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)，混(hun)合(he)10-20分鐘後，離心(xin)20分鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細收集上清(qing)。保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次離心(xin)。

3.尿(niao)液(ye)：用(yong)無菌管收(shou)集(ji)。離心20分(fen)鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細收集上清(qing)。保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次離心(xin)。胸(xiong)腹(fu)水(shui)、腦(nao)脊(ji)液(ye)參(can)照此(ci)實(shi)行(xing)。

4.細胞培養上清(qing)：檢(jian)測分泌性(xing)的(de)成(cheng)份時(shi)，用(yong)無菌管收(shou)集(ji)。離心20分(fen)鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/ 分）。仔細收集上清(qing)。檢(jian)測細胞內(nei)的(de)成(cheng)份時(shi)，用(yong)PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸(xuan)液(ye)，細胞濃(nong)度(du)達(da)到100萬(wan)/ml左(zuo)右(you)。通(tong)過反(fan)復凍融，以(yi)使細胞破(po)壞並 放(fang)出細胞內(nei)成份。離心(xin)20分鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細收集上清(qing)。保存(cun)過程(cheng)中如(ru)有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應再(zai)次離心(xin)。

5.組織(zhi)標本(ben)：切(qie)割(ge)標本(ben)後，稱取(qu)重量。加(jia)入(ru)壹(yi)定量的(de)PBS，PH7.4。用(yong)液(ye)氮迅(xun)速(su)冷凍保存(cun)備用(yong)。標本(ben)融(rong)化後仍然保持2-8℃的(de)溫(wen)度。加(jia)入壹(yi)定量的(de)PBS（PH7.4），用(yong)手(shou)工(gong)或勻(yun)漿器將(jiang)標本(ben)勻(yun)漿充(chong)分。離(li)心20分鐘左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分）。仔細收集上清(qing)。分裝(zhuang)後壹份待檢(jian)測，其余冷(leng)凍備用(yong)。

標本(ben)要求：

1．標本(ben)采(cai)集後盡早(zao)進(jin)行(xing)提取(qu)，提取(qu)按(an)相(xiang)關文(wen)獻(xian)進(jin)行(xing)，提取(qu)後應盡快進(jin)行(xing)實驗(yan)。若(ruo)不(bu)能(neng)馬上進(jin)行(xing)試(shi)驗，可(ke)將(jiang)標本(ben)放(fang)於-20℃保存(cun)，但應避免反復(fu)凍融

2．不(bu)能(neng)檢(jian)測含NaN3的(de)樣(yang)品，因(yin)NaN3抑制辣根過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性(xing)。

試(shi)劑盒(he)組成(cheng)：

48孔(kong)配制：

1.說(shuo)明書:1份

2.封(feng)板膜:2片（48）

3.密(mi)封袋:1個

4.酶(mei)標包(bao)被板(ban):1×48 (2-8℃保存(cun))

5.標準品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

6.標準品稀釋液(ye):1.5ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

7.酶(mei)標試(shi)劑:3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

8.樣(yang)品稀釋液(ye):3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

9.顯色(se)劑A液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

10.顯色(se)劑B液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

11.終(zhong)止液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

12.濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)：（20ml×20倍(bei)）×1瓶(2-8℃保存(cun))

96孔(kong)配置(zhi)：

1.說(shuo)明書:1份

2.封(feng)板膜:2片（96）

3.密(mi)封袋: 1個

4.酶(mei)標包(bao)被板(ban):1×96 (2-8℃保存(cun))

5.標準品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

6.標準品稀釋液(ye):1.5ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

7.酶(mei)標試(shi)劑:3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

8.樣(yang)品稀釋液(ye):3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

9.顯色(se)劑A液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

10.顯色(se)劑B液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

11.終(zhong)止液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保存(cun))

12.濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)：（20ml×20倍(bei)）×1瓶(2-8℃保存(cun))

大鼠(shu)丙二(er)醇(chun)(SDA)elisa試(shi)劑盒(he)

需(xu)要自備(bei)的(de)試(shi)劑和(he)器材

1.37℃恒(heng)溫(wen)箱。

2.標準規格酶(mei)標儀(yi)。

3.精(jing)密(mi)移液(ye)器及壹次性(xing)吸頭(tou)

4.蒸餾水(shui)，

5.壹(yi)次性(xing)試(shi)管

6.吸(xi)水(shui)紙(zhi)

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1、標準品的(de)稀釋：在(zai)酶(mei)標包(bao)被板(ban)上設(she)標準品孔10孔，在第(di)壹(yi)、第(di)二孔(kong)中分(fen)別(bie)加標準品100μl，然後在第(di)壹、第(di)二(er)孔中(zhong)加標準品稀釋液(ye)50μl，混勻(yun)；然(ran)後從第(di)壹(yi)孔、第二(er)孔(kong)中各取(qu)100μl分(fen)別加(jia)到第(di)三(san)孔(kong)和(he)第四(si)孔(kong)，再(zai)在第(di)三(san)、第(di)四(si)孔(kong)分(fen)別加標準品稀釋液(ye)50μl，混勻(yun)；然(ran)後在第(di)三(san)孔(kong)和(he)第四(si)孔(kong)中(zhong)先(xian)各取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)，再(zai)各取(qu)50μl分(fen)別加(jia)到第(di)五、第六(liu)孔(kong)中，再(zai)在第(di)五、第六(liu)孔(kong)中分(fen)別(bie)加標準品稀釋液(ye)50ul，混勻(yun)；混(hun)勻(yun)後從第(di)五、第六(liu)孔(kong)中各取(qu)50μl分(fen)別加(jia)到第(di)七(qi)、第八(ba)孔中(zhong)，再(zai)在第(di)七、第(di)八(ba)孔中(zhong)分別(bie)加標準品稀釋液(ye)50μl，混勻(yun)後從第(di)七(qi)、第八(ba)孔中(zhong)分別(bie)取50μl加到第(di)九(jiu)、第十(shi)孔中，再(zai)在第(di)九第(di)十(shi)孔分別加標準品稀釋液(ye)50μl，混勻(yun)後從第(di)九(jiu)第十(shi)孔中各取(qu)50μl棄(qi)掉(diao)。（稀釋後各孔(kong)加(jia)樣量都(dou)為(wei)50μl，濃(nong)度(du)分別(bie)為(wei)9mmol/L，6 mmol/L，3 mmol/L，1.5mmol/L， 0.75 mmol/L）。

2、加(jia)樣：分別設空白孔（空白對照孔不(bu)加(jia)樣品及酶(mei)標試(shi)劑，其余各步(bu)操作(zuo)相(xiang)同(tong)）、待測樣(yang)品孔。在酶(mei)標包(bao)被板(ban)上待測樣(yang)品孔中先(xian)加(jia)樣(yang)品稀釋液(ye)40μl，然後再(zai)加待測樣(yang)品10μl（樣品最終稀釋度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加於酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。

3、溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板膜封板(ban)後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。

4、配(pei)液(ye)：將(jiang)30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸餾水(shui)30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)稀釋後備用(yong)。

5、洗(xi)滌：小(xiao)心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜，棄去(qu)液(ye)體，甩(shuai)幹，每(mei)孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒(miao)後棄去(qu)，如(ru)此(ci)重復(fu)5次，拍幹。

6、加(jia)酶(mei)：每(mei)孔(kong)加入(ru)酶(mei)標試(shi)劑50μl，空白孔除(chu)外(wai)。

7、溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。

8、洗(xi)滌：操作(zuo)同(tong)5。

9、顯色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入(ru)顯色(se)劑A50μl，再(zai)加入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯色(se)15分鐘.

10、終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加終(zhong)止液(ye)50μl，終止(zhi)反應（此(ci)時(shi)藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se)）。

11、測(ce)定：以(yi)空白空調(tiao)零，450nm波(bo)長依序(xu)測(ce)量各孔(kong)的(de)吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應在加終止(zhi)液(ye)後15分鐘以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。

洗(xi)板方(fang)法

手(shou)工(gong)洗(xi)板方(fang)法：甩(shuai)掉(diao)酶(mei)標板(ban)內(nei)的(de)液(ye)體；在(zai)實驗臺上鋪(pu)墊(dian)幾(ji)層吸(xi)水(shui)紙(zhi)，酶(mei)標板(ban)朝(chao)下用(yong)力拍幾次；將(jiang)稀釋後的(de)洗(xi)滌液(ye)至少(shao)0.35ml註(zhu)入孔內(nei)，浸泡1-2分鐘。根據(ju)需(xu)要，重復(fu)此(ci)過(guo)程(cheng)數(shu)次。

自動(dong)洗(xi)板：如(ru)果有(you)自動(dong)洗(xi)板機(ji)，應在熟練使用(yong)後再(zai)用(yong)到正(zheng)式(shi)實驗過程中(zhong)。

註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)：

試(shi)劑盒(he)從冷(leng)藏(zang)環境中(zhong)取(qu)出應在室(shi)溫(wen)平衡(heng)15-30分(fen)鐘後方(fang)可(ke)使用(yong)，酶(mei)標包(bao)被板(ban)開(kai)封(feng)後如(ru)未(wei)用(yong)完(wan)，板條(tiao)應裝入密封(feng)袋(dai)中(zhong)保存(cun)。

濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可(ke)能會(hui)有(you)結晶(jing)析出，稀釋時(shi)可(ke)在水(shui)浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助溶，洗(xi)滌時(shi)不(bu)影(ying)響(xiang)結果。

各步(bu)加(jia)樣均(jun)應使用(yong)加(jia)樣器，並經常校(xiao)對(dui)其準確(que)性(xing)，以(yi)避(bi)免(mian)試(shi)驗誤差(cha)。壹次加樣(yang)時(shi)間最好控(kong)制(zhi)在(zai)5分(fen)鐘內(nei)，如(ru)標本(ben)數(shu)量多(duo)，推(tui)薦(jian)使用(yong)排槍(qiang)加樣(yang)。

請每(mei)次測定的(de)同(tong)時(shi)做標準曲(qu)線(xian)，最好做復孔(kong)。如(ru)標本(ben)中(zhong)待測物(wu)質(zhi)含(han)量過(guo)高（樣本OD值(zhi)大於(yu)標準品孔第壹孔(kong)的(de)OD值(zhi)），請先(xian)用(yong)樣(yang)品稀釋液(ye)稀釋壹(yi)定倍(bei)數(shu)（n倍(bei)）後再(zai)測定，計算時(shi)請最後乘(cheng)以(yi)總(zong)稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

封(feng)板膜只限(xian)壹次性(xing)使用(yong)，以(yi)避(bi)免(mian)交叉(cha)汙(wu)染。

底(di)物(wu)請避(bi)光(guang)保存(cun)。

嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明書的(de)操作(zuo)進(jin)行(xing)，試(shi)驗結果判(pan)定必須(xu)以(yi)酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)為(wei)準.

所(suo)有(you)樣(yang)品，洗(xi)滌液(ye)和(he)各種(zhong)廢(fei)棄(qi)物(wu)都(dou)應按(an)傳染物(wu)處(chu)理。

本(ben)試(shi)劑不(bu)同(tong)批號(hao)組分(fen)不(bu)得混用(yong)。

如(ru)與(yu)英文(wen)說(shuo)明書有(you)異，以(yi)英(ying)文(wen)說(shuo)明書為(wei)準。

計(ji)算：

以(yi)標準物(wu)的(de)濃(nong)度為(wei)橫(heng)坐標，OD值(zhi)為(wei)縱坐標，    

在(zai)坐標紙(zhi)上繪(hui)出標準曲(qu)線(xian)，根據(ju)樣品的(de)OD      

值(zhi)由(you)標準曲(qu)線(xian)查出相(xiang)應的(de)濃(nong)度；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋      

倍(bei)數(shu)；或用(yong)標準物(wu)的(de)濃(nong)度與(yu)OD值(zhi)計(ji)算出標      

準曲(qu)線(xian)的(de)直線回(hui)歸方(fang)程式(shi)，將(jiang)樣(yang)品的(de)OD值(zhi)      

代(dai)入方(fang)程式(shi)，計算出樣品濃度，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋      

倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣(yang)品的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度。  

檢(jian)測範圍、 OD值(zhi)：

具體請咨(zi)詢在(zai)線(xian)客服，或者來(lai)電(dian)索(suo)要詳細說(shuo)明書！

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