大鼠苯胺羥化(hua)酶(ANH)elisa試劑(ji)盒(he)

大鼠苯胺羥化(hua)酶(ANH)elisa試劑(ji)盒(he)

我司(si)產(chan)品(pin)齊(qi)全(quan)，因上架數量有限，未能全(quan)部(bu)上架，如需訂(ding)購(gou)或(huo)者(zhe)產(chan)品(pin)詳情(qing)請直(zhi)接聯(lian)系我司(si)銷售(shou)！

規格：96T/48T

包裝(zhuang)：盒

檢測(ce)原(yuan)理(li)：采(cai)用雙抗(kang)夾(jia)心法(fa)

保(bao)質期：六(liu)個(ge)月(yue)

產(chan)品(pin)保(bao)存(cun)條件：2-8°C

應用(yong)範(fan)圍(wei)：僅供(gong)科(ke)研研(yan)究實驗(yan)使用

樣(yang)品(pin)形(xing)式：血清(qing)/血漿(jiang)/組織勻(yun)漿/細胞培養上清/其它生(sheng)物液(ye)體(ti)（具(ju)體(ti)情(qing)況請(qing)咨詢(xun)）

標本(ben)的(de)采(cai)集及(ji)保(bao)存(cun)

1.血清(qing)：室(shi)溫血(xue)液(ye)自(zi)然(ran)凝固10-20分鐘(zhong)後(hou)，離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有(you)沈(chen)澱形(xing)成(cheng)，應再(zai)次(ci)離(li)心。

2.血漿(jiang)：應根(gen)據標(biao)本(ben)的(de)要求選擇EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鈉(na)或(huo)肝(gan)素作(zuo)為(wei)抗(kang)凝劑(ji)，混(hun)合(he)10-20分鐘(zhong)後(hou)，離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有(you)沈(chen)澱形(xing)成(cheng)，應再(zai)次(ci)離(li)心。

3.尿液(ye)：用(yong)無菌管收(shou)集。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有(you)沈(chen)澱形(xing)成(cheng)，應再(zai)次(ci)離(li)心。胸(xiong)腹(fu)水、腦(nao)脊液(ye)參(can)照此實行。

4.細胞培養上清：檢測(ce)分(fen)泌性的(de)成(cheng)份時，用無菌管收(shou)集。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/ 分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。檢測(ce)細(xi)胞內(nei)的(de)成(cheng)份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀(xi)釋細胞懸液(ye)，細(xi)胞濃(nong)度(du)達到(dao)100萬(wan)/ml左右(you)。通(tong)過反(fan)復凍融，以(yi)使細胞破(po)壞並 放(fang)出(chu)細胞內(nei)成份。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。保(bao)存(cun)過程(cheng)中(zhong)如(ru)有(you)沈(chen)澱形(xing)成(cheng)，應再(zai)次(ci)離(li)心。

5.組織標(biao)本(ben)：切割(ge)標(biao)本(ben)後，稱(cheng)取(qu)重量。加入(ru)壹定量的(de)PBS，PH7.4。用(yong)液(ye)氮迅速(su)冷凍保(bao)存(cun)備(bei)用。標(biao)本(ben)融化(hua)後仍(reng)然(ran)保(bao)持2-8℃的(de)溫(wen)度(du)。加入(ru)壹定量的(de)PBS（PH7.4），用(yong)手工或(huo)勻(yun)漿器將(jiang)標本(ben)勻漿(jiang)充(chong)分。離(li)心20分(fen)鐘(zhong)左(zuo)右(you)（2000-3000轉(zhuan)/分(fen)）。仔(zai)細(xi)收(shou)集上清。分裝後(hou)壹份待(dai)檢測(ce)，其余冷(leng)凍備(bei)用。

標本(ben)要求：

1．標本(ben)采集後(hou)盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關文獻(xian)進(jin)行，提(ti)取(qu)後應(ying)盡(jin)快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能馬(ma)上進(jin)行試(shi)驗(yan)，可(ke)將標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存(cun)，但應(ying)避免反(fan)復凍融

2．不能檢(jian)測(ce)含(han)NaN3的(de)樣(yang)品(pin)，因NaN3抑制(zhi)辣(la)根過氧化(hua)物酶的(de)（HRP）活(huo)性(xing)。

試劑(ji)盒組成：

48孔配(pei)制(zhi)：

1.說明(ming)書:1份

2.封板膜:2片（48）

3.密(mi)封袋:1個(ge)

4.酶標包(bao)被板:1×48 (2-8℃保(bao)存(cun))

5.標準(zhun)品(pin):0.5ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

6.標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye):1.5ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

7.酶標試(shi)劑(ji):3ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

8.樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

9.顯色(se)劑A液(ye)：3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

10.顯色(se)劑B液(ye)：3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

11.終(zhong)止(zhi)液(ye)：3ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

12.濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)：（20ml×20倍(bei)）×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

96孔配(pei)置：

1.說明(ming)書:1份

2.封板膜:2片（96）

3.密(mi)封袋: 1個(ge)

4.酶標包(bao)被板:1×96 (2-8℃保(bao)存(cun))

5.標準(zhun)品(pin):0.5ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

6.標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye):1.5ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

7.酶標試(shi)劑(ji):3ml×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

8.樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye):3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

9.顯色(se)劑A液(ye)：3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

10.顯色(se)劑B液(ye)：3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

11.終(zhong)止(zhi)液(ye)：3ml×1瓶(ping)(2-8℃保(bao)存(cun))

12.濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)：（20ml×20倍(bei)）×1瓶(2-8℃保(bao)存(cun))

大鼠苯胺羥化(hua)酶(ANH)elisa試劑(ji)盒(he)

需要自(zi)備(bei)的(de)試(shi)劑(ji)和(he)器材(cai)

1.37℃恒溫(wen)箱。

2.標準(zhun)規格酶標儀(yi)。

3.精(jing)密(mi)移液(ye)器及(ji)壹次性吸頭

4.蒸餾水，

5.壹次性試管(guan)

6.吸水紙

操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1、標準(zhun)品(pin)的(de)稀(xi)釋：在酶標包(bao)被板上設標準(zhun)品(pin)孔10孔(kong)，在(zai)第(di)壹、第(di)二孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)100μl，然(ran)後在(zai)第(di)壹、第(di)二孔(kong)中(zhong)加(jia)標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl，混(hun)勻；然(ran)後從(cong)第(di)壹孔、第(di)二孔(kong)中(zhong)各取(qu)100μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)三孔(kong)和(he)第(di)四孔(kong)，再(zai)在(zai)第(di)三、第(di)四孔(kong)分別加(jia)標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl，混(hun)勻；然(ran)後在(zai)第(di)三孔(kong)和(he)第(di)四孔(kong)中(zhong)先各取(qu)50μl棄掉(diao)，再(zai)各取(qu)50μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong)，再(zai)在(zai)第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50ul，混(hun)勻；混(hun)勻後(hou)從第(di)五、第(di)六(liu)孔(kong)中(zhong)各取(qu)50μl分別(bie)加(jia)到(dao)第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong)，再(zai)在(zai)第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl，混(hun)勻後(hou)從第(di)七(qi)、第(di)八孔中(zhong)分(fen)別(bie)取(qu)50μl加到(dao)第(di)九、第(di)十孔(kong)中(zhong)，再(zai)在(zai)第(di)九第(di)十孔(kong)分別加(jia)標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液(ye)50μl，混(hun)勻後(hou)從第(di)九第(di)十孔(kong)中(zhong)各取(qu)50μl棄掉(diao)。（稀(xi)釋後各孔(kong)加樣(yang)量都為(wei)50μl，濃(nong)度(du)分別(bie)為(wei)9mmol/L，6 mmol/L，3 mmol/L，1.5mmol/L， 0.75 mmol/L）。

2、加樣(yang)：分別(bie)設空(kong)白(bai)孔(kong)（空白(bai)對照孔不加(jia)樣(yang)品(pin)及酶標試(shi)劑(ji)，其余各步(bu)操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在(zai)酶標包(bao)被板上待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye)40μl，然(ran)後再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)最終(zhong)稀(xi)釋度(du)為(wei)5倍(bei)）。加樣(yang)將樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標板孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量不觸及孔(kong)壁，輕輕晃動混(hun)勻。

3、溫育(yu)：用(yong)封(feng)板膜封板後(hou)置37℃溫育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

4、配液(ye)：將(jiang)30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾水30（48T的(de)20倍(bei)）倍(bei)稀(xi)釋後備(bei)用。

5、洗滌(di)：小(xiao)心揭(jie)掉封(feng)板膜，棄去(qu)液(ye)體(ti)，甩幹，每孔(kong)加滿(man)洗滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄去(qu)，如此重復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹。

6、加酶：每孔(kong)加入(ru)酶標試(shi)劑(ji)50μl，空白孔(kong)除(chu)外(wai)。

7、溫育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

8、洗滌(di)：操(cao)作同(tong)5。

9、顯色(se)：每孔(kong)先加入(ru)顯色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯色劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光顯色15分(fen)鐘(zhong).

10、終(zhong)止(zhi)：每孔(kong)加終(zhong)止(zhi)液(ye)50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應（此時藍色立轉(zhuan)黃(huang)色）。

11、測(ce)定：以(yi)空(kong)白(bai)空調零，450nm波(bo)長(chang)依序(xu)測(ce)量各孔(kong)的(de)吸光度(du)（OD值）。 測(ce)定應在(zai)加終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進(jin)行。

洗板方(fang)法

手工洗板方(fang)法：甩掉酶標板內(nei)的(de)液(ye)體(ti)；在實(shi)驗(yan)臺(tai)上鋪(pu)墊幾(ji)層吸水紙，酶標板朝(chao)下(xia)用(yong)力(li)拍(pai)幾(ji)次；將(jiang)稀(xi)釋後的(de)洗滌(di)液(ye)至(zhi)少0.35ml註入(ru)孔內(nei)，浸(jin)泡1-2分(fen)鐘(zhong)。根(gen)據需(xu)要，重復(fu)此過程(cheng)數(shu)次。

自(zi)動洗板：如(ru)果有(you)自(zi)動洗板機，應在(zai)熟(shu)練使用後再(zai)用(yong)到(dao)正(zheng)式實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)。

註意(yi)事(shi)項(xiang)：

試劑(ji)盒從(cong)冷(leng)藏(zang)環(huan)境(jing)中(zhong)取(qu)出(chu)應在室(shi)溫平(ping)衡(heng)15-30分鐘(zhong)後(hou)方(fang)可使用，酶標包(bao)被板開封後如未用完，板條應裝(zhuang)入(ru)密(mi)封袋中(zhong)保(bao)存(cun)。

濃(nong)洗滌(di)液(ye)可(ke)能會(hui)有(you)結晶(jing)析出(chu)，稀(xi)釋時可在水浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助溶(rong)，洗滌(di)時不影響結(jie)果。

各步(bu)加(jia)樣(yang)均應(ying)使用加樣(yang)器，並(bing)經(jing)常(chang)校對其準(zhun)確性(xing)，以(yi)避免試(shi)驗(yan)誤(wu)差。壹次加樣(yang)時間最(zui)好(hao)控制(zhi)在(zai)5分鐘(zhong)內(nei)，如標(biao)本(ben)數量多，推薦使用排槍加樣(yang)。

請每次(ci)測(ce)定的(de)同(tong)時做標準(zhun)曲線，最(zui)好(hao)做(zuo)復孔。如(ru)標(biao)本(ben)中(zhong)待(dai)測(ce)物質(zhi)含(han)量過高（樣(yang)本(ben)OD值大於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)孔第(di)壹孔的(de)OD值(zhi)），請(qing)先用樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋壹定倍數(shu)（n倍）後(hou)再(zai)測(ce)定，計算(suan)時請最後乘(cheng)以(yi)總(zong)稀(xi)釋倍數（×n×5）。

封板膜只限壹次性使用，以(yi)避免交(jiao)叉汙染(ran)。

底物請(qing)避光保(bao)存(cun)。

嚴(yan)格按照說明(ming)書的(de)操(cao)作(zuo)進(jin)行，試(shi)驗(yan)結(jie)果判(pan)定必須(xu)以(yi)酶標儀(yi)讀(du)數為(wei)準(zhun).

所(suo)有(you)樣(yang)品(pin)，洗滌(di)液(ye)和(he)各種(zhong)廢(fei)棄物都應(ying)按(an)傳(chuan)染物處(chu)理。

本(ben)試劑(ji)不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組分不(bu)得(de)混(hun)用。

如與(yu)英文說明(ming)書有異，以(yi)英(ying)文說明(ming)書為(wei)準(zhun)。

計算(suan)：

以(yi)標(biao)準(zhun)物的(de)濃(nong)度(du)為(wei)橫(heng)坐標，OD值為(wei)縱(zong)坐標，    

在坐標紙上繪出(chu)標準(zhun)曲線，根(gen)據樣(yang)品(pin)的(de)OD      

值由(you)標(biao)準(zhun)曲線查出(chu)相應的(de)濃(nong)度(du)；再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋      

倍數(shu)；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度(du)與OD值計算(suan)出(chu)標      

準(zhun)曲線的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸方(fang)程(cheng)式，將樣(yang)品(pin)的(de)OD值      

代入(ru)方(fang)程(cheng)式，計算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋      

倍數(shu)，即(ji)為(wei)樣(yang)品(pin)的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。  

檢測(ce)範(fan)圍(wei)、 OD值：

具(ju)體(ti)請咨(zi)詢在(zai)線(xian)客服，或(huo)者(zhe)來電(dian)索要詳細說明(ming)書！

人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑(ji)盒(he)

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人白細(xi)胞介素受體(ti)相關激酶(IRAK)ELISA試劑(ji)盒(he)

人磷酸烯(xi)醇式丙酮(tong)酸羧激酶(PCK)ELISA試劑(ji)盒(he)

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