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          大(da)鼠(shu)胞漿型磷脂酶(mei)A2(cPLA2)elisa試劑(ji)盒(he)

          大(da)鼠胞漿型磷脂酶(mei)A2(cPLA2)elisa試劑(ji)盒(he)
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          大(da)鼠(shu)胞漿型磷脂酶(mei)A2(cPLA2)elisa試劑(ji)盒(he)

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          ELISA法是免(mian)疫(yi)診斷(duan)中(zhong)的壹項新(xin)技術(shu),現已成功地應用(yong)於多(duo)種病(bing)原微(wei)生(sheng)物(wu)所(suo)引(yin)起(qi)的傳染病(bing)、寄生蟲病(bing)及(ji)非(fei)傳(chuan)染病(bing)等方面的免(mian)疫(yi)診斷(duan)。也(ye)已應用於大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原和小分(fen)子(zi)抗(kang)原的定量測定(ding),根據(ju)已經(jing)使用的結果,認(ren)為ELISA法具有(you)靈(ling)敏、特異(yi)、簡單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定(ding)及(ji)易(yi)於自(zi)動化操(cao)作等特點(dian)。不(bu)僅適(shi)用於臨(lin)床(chuang)標本的檢(jian)查(zha),而(er)且(qie)由(you)於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可(ke)以(yi)檢(jian)查(zha)幾(ji)百甚至上千(qian)份標本,因此,也(ye)適(shi)合於血清(qing)流(liu)行病(bing)學調(tiao)查(zha)。本(ben)法不僅(jin)可(ke)以(yi)用(yong)來(lai)測定(ding)ti,而(er)且(qie)也可(ke)用(yong)於測定(ding)體(ti)液中的循環(huan)抗(kang)原,所(suo)以(yi)也(ye)是(shi)壹種早期(qi)診斷(duan)的良好(hao)方法。因此(ci)ELISA法在生(sheng)物(wu)醫(yi)學各(ge)領域(yu)的應用範圍日(ri)益(yi)擴大,

          組成(cheng)結(jie)構

          1、血清(qing):操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞刺激。使用(yong)不(bu)含(han)熱原(yuan)和內du素(su)的試管(guan)。收集血液後(hou),1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將血紅細胞迅速小心(xin)地分(fen)離(li)。

          2、2、血漿:EDTA、檸檬(meng)suan鹽、肝(gan)素(su)血漿可(ke)用(yong)於檢(jian)測。1000×g離(li)心(xin)30分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)。

          3、細(xi)胞上清(qing)液:1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物(wu)。

          4、組織(zhi)勻漿(jiang):將組織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分(fen)鐘(zhong),取上清(qing)液。

          5、保存(cun):如果樣(yang)品(pin)不立(li)即使(shi)用,應(ying)將其分(fen)成(cheng)小部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存,避(bi)免(mian)反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可(ke)能(neng)的不要使用溶(rong)血。如果血清(qing)中(zhong)大(da)量顆粒(li),檢(jian)測前(qian)先(xian)離(li)心(xin)或(huo)過(guo)濾(lv)。不(bu)要(yao)在37℃或(huo)更(geng)高的溫(wen)度加(jia)熱(re)解凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫(wen)下(xia)解凍(dong)並確(que)保樣(yang)品(pin)均勻地充分(fen)解凍(dong)。

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          大(da)鼠(shu)胞漿型磷脂酶(mei)A2(cPLA2)elisa試劑(ji)盒(he)

          操(cao)作步驟:

          1、使(shi)用前,將所(suo)有試劑(ji)充分(fen)混(hun)勻。不(bu)要(yao)使液體(ti)產(chan)生大量的泡沫,以(yi)免(mian)加(jia)樣(yang)時加(jia)入(ru)大(da)量的氣泡(pao),產(chan)生加(jia)樣(yang)上的誤差。

          2、根據(ju)待(dai)測樣(yang)品(pin)數量加(jia)上標準(zhun)品的數量決定(ding)所(suo)需(xu)的板(ban)條數。每(mei)個(ge)標準(zhun)品和(he)空白孔建(jian)議(yi)做復(fu)孔。每(mei)個(ge)樣(yang)品(pin)根據(ju)自(zi)己的數量來定(ding),能(neng)使用復(fu)孔的盡量做復(fu)孔。

          3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好(hao)後(hou)的標準(zhun)品50ul於反應(ying)孔(kong)、加(jia)入(ru)待(dai)測樣(yang)品(pin)50ul於反應(ying)孔(kong)內。立(li)即加(jia)入(ru)50ul標記的抗體(ti)。蓋上膜(mo)板(ban),輕輕振(zhen)蕩混(hun)勻,37℃溫(wen)育(yu)45分(fen)鐘(zhong)。

          4、甩去孔內液體(ti),每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌液,振(zhen)蕩30秒,甩去洗(xi)滌液,用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操(cao)作4次。如果用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌,洗(xi)滌次數增加(jia)壹(yi)次(ci)。

          5、每(mei)孔加(jia)入(ru)100ul的親和鏈酶(mei)素-HRP,輕輕振(zhen)蕩混(hun)勻,37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

          6、甩去孔內液體(ti),每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌液,振(zhen)蕩30秒,甩去洗(xi)滌液,用吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操(cao)作4次。如果用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌,洗(xi)滌次數增加(jia)壹(yi)次(ci)。

          7、每(mei)孔加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A、B各(ge)50ul,輕輕振(zhen)蕩混(hun)勻,37℃溫(wen)育(yu)5分(fen)鐘(zhong)。避(bi)免(mian)光(guang)照(zhao)。

          8、取出酶(mei)標板(ban),迅速(su)加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止液,加(jia)入(ru)終(zhong)止液後(hou)應(ying)立(li)即測定(ding)結(jie)果。

          9、在(zai)450nm波長處測定(ding)各(ge)孔(kong)的OD值。

          操(cao)作註意事(shi)項:

          1、試劑(ji)應(ying)按(an)標簽說(shuo)明(ming)書(shu)儲(chu)存(cun),使(shi)用(yong)前(qian)恢復(fu)到(dao)室溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過(guo)後(hou)的標準(zhun)品應(ying)丟棄,不可(ke)保(bao)存(cun)

          2、實驗(yan)中(zhong)不用的板(ban)條應(ying)立(li)即放(fang)回包(bao)裝袋(dai)中(zhong),密(mi)封保(bao)存(cun),以(yi)免(mian)變(bian)質。

          3、不(bu)用的其它試劑(ji)應(ying)包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋好(hao)。不(bu)同批號的試劑(ji)不(bu)要(yao)混用。保(bao)質前使(shi)用。

          4、使(shi)用壹次(ci)性(xing)的吸頭以(yi)免(mian)交叉(cha)汙染,吸取終(zhong)止液和底(di)物(wu)A、B液時,避(bi)免(mian)使(shi)用(yong)帶(dai)金(jin)屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣(yang)器(qi)。

          5、使(shi)用幹凈的塑料(liao)容(rong)器配置洗(xi)滌液。使用(yong)前(qian)充分(fen)混(hun)勻試劑(ji)盒(he)裏(li)的各種成份及(ji)樣(yang)品(pin)。

          6、底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發(fa),避(bi)免(mian)長時間(jian)打開(kai)蓋子(zi)。底(di)物(wu)B對(dui)光敏(min)感,避(bi)免(mian)長時間(jian)暴露(lu)於光(guang)下。避(bi)免(mian)用(yong)手(shou)接觸,有(you)毒(du)。實驗(yan)完(wan)成(cheng)後(hou)應(ying)立(li)即讀(du)取OD值。

          7、加(jia)入(ru)試劑(ji)的順(shun)序應壹致(zhi),以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有反應(ying)板(ban)孔溫(wen)育(yu)的時間(jian)壹樣(yang)。按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的時間(jian)、加(jia)液的量及(ji)順(shun)序進行溫(wen)育(yu)操作。

          壹(yi)般(ban)來(lai)講,96T能(neng)檢(jian)測90個(ge)樣(yang)本(ben),48T能檢(jian)測42個(ge)樣(yang)本(ben),這裏(li)面需(xu)要用(yong)標樣(yang)來(lai)做標準(zhun)曲線(xian),所(suo)以(yi)各(ge)位(wei)需(xu)要做(zuo)實驗(yan)的老(lao)師(shi)們,請在購買ELISA試劑(ji)盒(he)的時候(hou)註意,需(xu)要做(zuo)多(duo)少(shao)個(ge)樣(yang)本(ben),在決定(ding)買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的試劑(ji)盒(he),以(yi)免(mian)做(zuo)實驗(yan)時出現試劑(ji)盒(he)不(bu)夠(gou)用(yong)或(huo)者(zhe)浪(lang)費(fei)!

          原(yuan)理:將特異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)包被於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)面,經(jing)洗(xi)滌後(hou)分(fen)成(cheng)兩組:壹(yi)組加(jia)酶(mei)標記抗(kang)原和被測抗(kang)原(yuan)的混合液,另壹組只(zhi)加(jia)酶(mei)標記抗(kang)原,經(jing)孵(fu)育(yu)洗(xi)滌後(hou)加(jia)底(di)物(wu)顯色(se),這兩(liang)組底(di)物(wu)降(jiang)解量之(zhi)差,即為所(suo)要測定(ding)的未知(zhi)抗(kang)原(yuan)的量。

          貓(mao)巴(ba)爾通(tong)體(ti)(Haemobartonella)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          貓(mao)皰(pao)疹(zhen)病(bing)毒I型(HV-I)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          貓(mao)免(mian)疫(yi)缺(que)陷(xian)病(bing)毒抗(kang)體(ti)(IV-Ab)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          貓(mao)傳(chuan)染性鼻氣管(guan)炎(yan)(FVR)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          貓(mao)牛(niu)磺酸(suan)(Taurine)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          貓(mao)病(bing)毒性(xing)鼻(bi)氣管(guan)炎(yan)(VRH)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)

          牡蠣(li)糞(fen)卟(bu)啉(lin)原(yuan)氧(yang)化酶(mei)(CPOX)elisa檢(jian)測試劑(ji)盒(he)





































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