土壤蔗糖酶(mei)(invertase)elisa試(shi)劑盒

土(tu)壤(rang)蔗糖酶(mei)(invertase)elisa試(shi)劑盒

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檢測原理(li)

試(shi)劑盒采(cai)用雙(shuang)抗(kang)ti壹(yi)步夾心(xin)法(fa)酶(mei)聯(lian)免疫吸附試(shi)驗(yan)（ELISA）。往(wang)預先(xian)包(bao)被(bei)5α還(hai)原酶(mei)（5AR）抗(kang)ti的(de)包(bao)被(bei)微(wei)孔中(zhong)，依次(ci)加入(ru)標本(ben)、標準品(pin)、HRP標記的(de)檢測抗(kang)ti，經(jing)過溫(wen)育(yu)並洗滌(di)。用(yong)底(di)物TMB顯色，TMB在(zai)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸的作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)最(zui)終的黃(huang)色(se)。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和樣(yang)品(pin)中(zhong)的5α還(hai)原酶(mei)（5AR）呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用(yong)酶(mei)標儀在(zai)450nm 波(bo)長(chang)下(xia)測定(ding)吸光(guang)度（OD 值），計算樣(yang)品(pin)活(huo)性。

樣(yang)品(pin)收(shou)集(ji)、處理(li)及(ji)保存方法(fa)

1.血(xue)清：使用不(bu)含熱原和內毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何(he)細胞(bao)刺(ci)激，收集(ji)血(xue)液後，3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清和紅細胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心(xin)地分(fen)離(li)。

2.血(xue)漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000轉(zhuan)離心(xin)30分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。

3.細胞(bao)上清液(ye)：3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和聚合物。

4.組織勻(yun)漿(jiang)：將組織加(jia)入(ru)適(shi)量生理(li)鹽(yan)水搗碎。3000轉(zhuan)離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)取(qu)上清。

5.保存：如果(guo)樣(yang)本(ben)收集(ji)後不(bu)及(ji)時檢測，請(qing)按壹次(ci)用量分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融，在(zai)室溫下(xia)解(jie)凍(dong)並確(que)保樣(yang)品(pin)均勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

自(zi)備(bei)物(wu)品(pin)

酶(mei)標儀（450nm）

高精度加(jia)樣(yang)器(qi)及(ji)槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒(heng)溫箱(xiang)

操作(zuo)註意事(shi)項

試(shi)劑盒保存在(zai)2-8℃，使用前(qian)室溫(wen)平(ping)衡(heng)20分(fen)鐘(zhong)。從(cong)冰(bing)箱取(qu)出的濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)會有結晶(jing)，這(zhe)屬(shu)於正(zheng)常現(xian)象(xiang)，水浴(yu)加熱(re)使結晶(jing)wan全(quan)溶(rong)解(jie)後再使用。

實(shi)驗中(zhong)不用(yong)的(de)板(ban)條應立即放(fang)回(hui)自封(feng)袋中(zhong)，密封(feng)（低(di)溫幹燥(zao)）保存。

濃(nong)度為0的(de)S0號(hao)標準品(pin)即可視(shi)為陰(yin)性對(dui)照(zhao)或者空(kong)白；按照(zhao)說明書(shu)操作(zuo)時樣(yang)本(ben)已經(jing)稀(xi)釋5倍(bei)，最(zui)終結果(guo)乘以(yi)5才(cai)是樣(yang)本(ben)實際濃度。

嚴(yan)格按照(zhao)說明書(shu)中(zhong)標明(ming)的時間(jian)、加(jia)液(ye)量及(ji)順(shun)序(xu)進行溫(wen)育(yu)操作(zuo)。

所有液(ye)體(ti)組分(fen)使用前(qian)充分(fen)搖勻(yun)。

土(tu)壤蔗糖酶(mei)(invertase)elisa試(shi)劑盒

試(shi)劑的(de)準備(bei)

 20×洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液(ye)的稀釋：蒸(zheng)餾(liu)水按1：20稀(xi)釋，即1份(fen)的(de)20×洗(xi)滌(di)緩(huan)沖(chong)液(ye)加19份(fen)的(de)蒸(zheng)餾水(shui)。

洗(xi)板方(fang)法(fa)

手(shou)工(gong)洗(xi)板(ban)：甩(shuai)盡孔(kong)內液(ye)體(ti)，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi)1min後甩(shuai)盡孔(kong)內液(ye)體(ti)，在(zai)吸水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如此(ci)洗板(ban)5次(ci)。

自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji)：每(mei)孔註入洗(xi)液(ye)350μL，浸(jin)泡1min，洗(xi)板5次(ci)。

操作(zuo)步驟(zhou)

從(cong)室溫(wen)平(ping)衡(heng)20min後的(de)鋁(lv)箔(bo)袋中(zhong)取出(chu)所需板(ban)條，剩余(yu)板(ban)條用自封(feng)袋密封(feng)放(fang)回(hui)4℃。

設置標準品(pin)孔(kong)和樣(yang)本(ben)孔，標準品(pin)孔(kong)各加不同濃(nong)度的(de)標準品(pin)50μL；

樣(yang)本(ben)孔先加(jia)待(dai)測樣(yang)本(ben)10μL，再加(jia)樣(yang)ben稀(xi)釋ye40μL；空(kong)白孔不加。

除空白孔外(wai)，標準品(pin)孔(kong)和樣(yang)本(ben)孔中(zhong)每孔(kong)加(jia)入(ru)辣根(gen)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)（HRP）標記的(de)檢測抗(kang)ti100μL，用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)住(zhu)反(fan)應(ying)孔，37℃水(shui)浴鍋(guo)或恒溫(wen)箱溫(wen)育(yu)60min。

棄(qi)去液體(ti)，吸水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi)1min，甩(shuai)去洗滌(di)液(ye)，吸水紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板(ban)5次(ci)（也可用(yong)洗(xi)板機洗(xi)板）。

每(mei)孔加(jia)入(ru)底(di)物A、B各50μL，37℃避(bi)光(guang)孵育(yu)15min。

每(mei)孔加(jia)入(ru)終止液(ye)50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波(bo)長(chang)處(chu)測定(ding)各孔的OD值。

試(shi)劑盒性能

準確(que)性：標準品(pin)線性回(hui)歸與預(yu)期濃度相(xiang)關(guan)系(xi)數R值，大(da)於等於(yu)0.9900。

靈(ling)敏(min)度：最(zui)di檢測濃(nong)度小(xiao)於0.1 U/mL。

特(te)異性(xing)：不(bu)與(yu)其(qi)它可(ke)溶(rong)性(xing)結構類(lei)似(si)物交叉(cha)反應(ying)。

重(zhong)復(fu)性(xing)：板(ban)內、板間(jian)變(bian)異(yi)系(xi)數均小(xiao)於15%。

貯(zhu)藏：2-8℃，避(bi)光(guang)防潮(chao)保存。

有效(xiao)期：6個月(yue)

免責聲(sheng)明

試(shi)劑盒僅供研(yan)究使用，不(bu)得用於臨(lin)床實(shi)驗(yan)或人(ren)體(ti)實驗(yan)，否(fou)則所產(chan)生(sheng)的壹(yi)切(qie)後果(guo)，由實驗者(zhe)承擔，本公(gong)司概不負責(ze)。

嚴(yan)格按照(zhao)說明書(shu)操作(zuo)，實驗者違(wei)反說明書(shu)操作(zuo)，後果(guo)由實驗者(zhe)承擔。

公(gong)司其(qi)他產(chan)品(pin)：

小(xiao)鼠受磷(lin)蛋白(PLN)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠肌(ji)質(zhi)網鈣泵(beng)2α亞(ya)型(SERCA2α)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠和精胺(Spm)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠CpG寡(gua)脫氧核(he)苷酸(suan)(CpG-ODN)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠乳(ru)清蛋白特異性IgE(La-sIgE)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠抗(kang)大(da)豆(dou)蛋白抗(kang)體(ti)(Anti-soy protein-Ab)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠骨織素(su)(OSTN)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠鈉;鉀離子轉(zhuan)運(yun)ATP酶(mei)β1肽(ATP1β1)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠Ⅴ型利鈉鈦(Ⅴ Nesiritide)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠長(chang)鏈(lian)脂肪酸(LCTs)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠Dystonin蛋白(DST)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠含(han)幹擾(rao)素誘(you)導解(jie)旋酶(mei)C域蛋白1(IFIH1)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠精(jing)脒精(jing)胺乙(yi)酰(xian)轉(zhuan)移酶(mei)(SSAT)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠早期應答基因3(IER3)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠牙(ya)骨質(zhi)蛋白1(CEMP1)elisa試(shi)劑盒

小(xiao)鼠染(ran)色(se)盒同源物3(CBX3)elisa試(shi)劑盒