人(ren)肝(gan)素(su)輔因(yin)子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑(ji)盒(he)

檢測原(yuan)理

試劑(ji)盒(he)采用雙抗(kang)原(yuan)壹-步夾(jia)心法(fa)酶聯免疫吸(xi)附(fu)試(shi)驗(yan)(ELISA) 。往(wang)預(yu)先(xian)包(bao)被病毒(du)性腹(fu)瀉(xie)病(bing)毒(du)抗(kang)ti的包被微孔(kong)中，依次(ci)加入標(biao)本、HRP標(biao)記(ji)的檢(jian)測抗(kang)原(yuan)，經過溫(wen)育(yu)並(bing)徹(che)di洗(xi)滌。用底(di)物(wu)TMB顯色，TMB在過氧化物(wu)酶的催化下(xia)轉(zhuan)化(hua)成藍色(se)，並(bing)在suan的作(zuo)用(yong)下(xia)轉化(hua)成最終的黃(huang)色(se)。用(yong)酶標(biao)儀在(zai)450NM波(bo)長(chang)下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(du)(OD值(zhi)) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相(xiang)比較，從而判(pan)定(ding)標(biao)本中(zhong)豬病毒(du)性腹(fu)瀉(xie)病(bing)毒(du)(BVDV) 的存在(zai)與(yu)否(fou)。

樣(yang)品收(shou)集、處(chu)理及保(bao)存方法(fa)

1.血清:使用不含(han)熱(re)原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的試(shi)管(guan)，操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免任何(he)細胞刺激(ji)，收(shou)集血液(ye)後，3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)將(jiang)血清和紅細胞迅(xun)速小心地(di)分離(li)。

2.血漿: EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽或(huo)肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000轉離(li)心(xin)30分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。

3.細胞上清(qing)液(ye): 3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)去(qu)除顆粒和聚(ju)合(he)物(wu)。

4.組(zu)織(zhi)勻漿(jiang):將組(zu)織(zhi)加入適(shi)量生理鹽水(shui)搗(dao)碎。3000轉 離(li)心(xin)10分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。

5.保存:如果樣(yang)本收(shou)集後(hou)不及(ji)時檢測，請按(an)壹次用量分裝，凍存於(yu)-20°C， 避免反

復(fu)凍(dong)融(rong)，在室溫(wen)下(xia)解凍(dong)並確(que)保樣(yang)品均勻(yun)地(di)充分(fen)解凍。

自備物(wu)品

1.酶標(biao)儀(450NM)

2.高(gao)精(jing)度(du)加樣(yang)器及槍頭(tou): 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫(wen)箱(xiang)

操作(zuo)註意事項(xiang)

1.試劑(ji)盒(he)保(bao)存在(zai)2-8°C，使用前(qian)室(shi)溫(wen)平衡(heng)20分鐘(zhong)。從冰(bing)箱(xiang)取出(chu)的(de)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)會(hui)有結(jie)晶，這屬於(yu)正(zheng)常現(xian)象，水(shui)浴(yu)加熱(re)使結(jie)晶完quan溶解後(hou)再(zai)使(shi)用(yong)。

2.實驗中(zhong)不用(yong)的板條(tiao)應立即放(fang)回自封(feng)袋中(zhong)，密(mi)封(feng)(低溫幹(gan)燥(zao))保存。

3.預處(chu)理後的(de)樣(yang)本請按(an)照(zhao)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)用(yong)樣(yang)ben稀釋(shi)ye適當(dang)稀釋(shi)以達(da)到試劑(ji)盒(he)的(de)的(de)最jia檢測效果。.

4.嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明書中(zhong)標(biao)明的時(shi)間、加液(ye)量及順(shun)序進(jin)行溫(wen)育(yu)操作(zuo)。

5.所有液(ye)體(ti)組(zu)分使(shi)用前(qian)充(chong)分(fen)搖勻。

人肝素(su)輔因(yin)子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑(ji)盒(he)

常用方法(fa)：

1. 夾(jia)心法(fa)：

夾(jia)心法(fa)常(chang)用於檢(jian)測大分子抗(kang)原(yuan)，壹般的(de)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為(wei):

a. 將具有專壹性的(de)抗(kang)ti固著（coating）於塑膠(jiao)孔(kong)盤上，完成後洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)抗(kang)ti

b. 加入待(dai)測檢(jian)體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含(han)有待測的(de)抗(kang)原(yuan)，則其(qi)會(hui)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專壹性鍵(jian)結(jie)

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加入另(ling)壹種對抗(kang)原(yuan)專壹的壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測抗(kang)原(yuan)進(jin)行鍵(jian)結(jie)

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未鍵(jian)結(jie)壹(yi)次抗(kang)ti，加入帶(dai)有酶的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti鍵結

e. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加入酶底(di)物(wu)使酵素(su)呈(cheng)色(se)，以肉(rou)眼(yan)或(huo)儀器讀取呈(cheng)色(se)結(jie)果

原(yuan)理：針對(dui)抗(kang)原(yuan)分子上2個不同(tong)抗(kang)原(yuan)決定(ding)簇(cu)的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)ti分別(bie)作(zuo)為(wei)固相抗(kang)ti和酶標(biao)抗(kang)ti，將大分子抗(kang)原(yuan)分別(bie)制(zhi)備(bei)固相抗(kang)原(yuan)和酶標(biao)抗(kang)原(yuan)結合(he)物(wu)。

2. 間接法(fa)

間接法(fa)常(chang)用於檢(jian)測抗(kang)ti，壹般的(de)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將已(yi)知的(de)抗(kang)原(yuan)固著於(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上，完成後洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)的抗(kang)原(yuan)。

b. 加入待(dai)測檢(jian)體(ti)，檢體(ti)中若(ruo)含(han)有待測的(de)壹次抗(kang)ti，則其(qi)會(hui)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上的(de)抗(kang)原(yuan)進(jin)行專壹性鍵(jian)結(jie)。

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)待測檢(jian)體(ti)，加入帶(dai)有酶的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待(dai)測的(de)壹次抗(kang)ti鍵結。

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)未鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加入酶底(di)物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，藉(ji)儀器（ELISA reader）測定(ding)塑膠(jiao)盤中(zhong)的吸(xi)光值(zhi)（OD值(zhi)），以評(ping)估(gu)有(you)色(se)終產物(wu)的含量即可(ke)測量待測抗(kang)ti的含量。

原(yuan)理：利用(yong)酶標(biao)記(ji)的抗(kang)抗(kang)ti以檢(jian)測已(yi)與(yu)固相結(jie)合(he)的(de)受檢抗(kang)ti。

3. 競爭(zheng)法(fa)

競爭(zheng)法(fa)是壹種較少(shao)用(yong)到的ELISA檢測機(ji)制(zhi)，壹(yi)般用(yong)於檢測小分子抗(kang)原(yuan)，其(qi)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將具有專壹性的(de)抗(kang)ti固著於(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上，完成後洗(xi)去(qu)多(duo)余(yu)抗(kang)ti

b. 加入待(dai)測檢(jian)體(ti)，使檢體(ti)中的待(dai)測抗(kang)原(yuan)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專壹性鍵(jian)結(jie)

c. 加入帶(dai)有酶的抗(kang)原(yuan)，此抗(kang)原(yuan)也可與(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專壹性鍵(jian)結(jie)，由(you)於(yu)塑膠孔(kong)盤上固著的(de)抗(kang)ti數量有限，因(yin)此當(dang)檢體(ti)中抗(kang)原(yuan)的量越(yue)多(duo)，則(ze)帶有酶的抗(kang)原(yuan)可鍵結的固著抗(kang)ti就越(yue)少(shao)，亦(yi)即，兩(liang)種抗(kang)原(yuan)皆(jie)競相(xiang)與(yu)塑(su)膠(jiao)孔(kong)盤上抗(kang)ti鍵結，即所(suo)謂競爭(zheng)法(fa)之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗(xi)去(qu)檢體(ti)與(yu)帶(dai)有(you)酶的抗(kang)原(yuan)，加入酶底(di)物(wu)使酶呈(cheng)色(se)，當(dang)檢體(ti)中抗(kang)原(yuan)量越(yue)多(duo)，代(dai)表(biao)塑膠孔(kong)盤內(nei)留下(xia)之(zhi)帶有酶的抗(kang)原(yuan)越(yue)少(shao)，顯(xian)色也(ye)就越(yue)淺(qian)。

e. 當(dang)需要偵測無(wu)法(fa)獲(huo)得(de)兩(liang)種以上(shang)單(dan)壹(yi)性(xing)抗(kang)ti的抗(kang)原(yuan)，或(huo)是不易(yi)得(de)到足夠(gou)的(de)純化(hua)抗(kang)ti以固著於(yu)孔(kong)盤上時(shi)，壹(yi)般會(hui)考慮(lv)使(shi)用(yong)競爭(zheng)法(fa)ELISA。

標(biao)本要求 :

1．不能檢(jian)測含(han)NaN3的樣(yang)品，因(yin)NaN3辣根過氧化物(wu)酶的（HRP）活性。

2．標(biao)本采集後盡(jin)早(zao)進(jin)行提(ti)取，提(ti)取按(an)相關文(wen)獻(xian)進(jin)行，提(ti)取後應盡快進(jin)行實(shi)驗(yan)。若(ruo)不能馬上(shang)進(jin)行試(shi)驗(yan)，可將(jiang)標(biao)本放(fang)於(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避免反復(fu)凍(dong)融(rong)。

3.各步加樣(yang)均應(ying)使(shi)用加樣(yang)器，並經常校(xiao)對(dui)其(qi)準確(que)性，以避免試驗(yan)誤(wu)差。壹次(ci)加樣(yang)時間控

制(zhi)在(zai)5分(fen)鐘(zhong)內(nei)，如標(biao)本數量多(duo)，推(tui)薦使用排槍加樣(yang)。

4.請每次(ci)測定(ding)的同(tong)時做(zuo)標(biao)準曲(qu)線(xian)，做復(fu)孔(kong)。如標(biao)本中(zhong)待(dai)測物(wu)質含量過高(gao)(樣(yang)本OD值(zhi)大於

標(biao)準品孔(kong)孔(kong)的OD值(zhi))，請先(xian)用(yong)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹定(ding)倍數(n倍(bei)) 後(hou)再(zai)測定(ding)，計(ji)算時請

後乘以總(zong)稀釋(shi)倍數(xnx5)

5.封(feng)板膜只限壹(yi)次性使用，以避免交叉(cha)汙染(ran)。

6.底(di)物(wu)請避光保存。

7.嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明書的(de)操作(zuo)進(jin)行，試(shi)驗(yan)結果判(pan)定(ding)必(bi)須(xu)以酶標(biao)儀讀(du)數為(wei)準.

8.所有樣(yang)品，洗(xi)滌液(ye)和各種廢棄(qi)物(wu)都應按(an)傳染(ran)物(wu)處(chu)理。

9.本試劑(ji)不同(tong)批號組(zu)分不得(de)混用(yong)。

訂購說(shuo)明:

※關於(yu)產品售(shou)價,由(you)於(yu)市場(chang)的(de)不穩(wen)定(ding)性,價(jia)格(ge)變動是必(bi)然的,但(dan)是我(wo)們可(ke)以提(ti)供當(dang)下公允的市場(chang)價(jia)格(ge),批量訂購(gou)還可享(xiang)受相應的優(you)惠活(huo)動;

※關於(yu)產品的(de)具體(ti)信(xin)息,本頁面(mian)展示的內(nei)容(rong)僅供參(can)考(kao),而(er)詳(xiang)細的(de)產品信(xin)息,可以咨(zi)詢(xun)我(wo)們;

※關於(yu)運費問(wen)題,批量訂購(gou)可(ke)免郵,本(ben)品采用低溫(wen)箱(xiang)冷凍(dong)保存;

※關於(yu)服(fu)務,我(wo)們提(ti)供完整的(de)售(shou)前(qian)售(shou)後服(fu)務,並(bing)貫穿(chuan)妳(ni)的整個(ge)實(shi)驗過(guo)程,如遇技(ji)術(shu)問(wen)題,可隨時聯系我(wo)們,我(wo)們真(zhen)誠(cheng)地(di)為(wei)您答(da)疑(yi)解惑(huo)。

豬白細胞介(jie)素(su)4(IL-4)ELISA試劑(ji)盒(he)

山(shan)羊(yang)表(biao)面活性蛋白A(SP-A)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

豬心肌(ji)肌(ji)鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

豬血管(guan)緊張(zhang)素(su)Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑(ji)盒(he)