人肝(gan)脂酶(mei)(HL)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

人肝(gan)脂酶(mei)(HL)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

ELISA法是免疫(yi)診(zhen)斷中(zhong)的壹項(xiang)新(xin)技術(shu)，現已成(cheng)功(gong)地(di)應(ying)用於多(duo)種(zhong)病原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起(qi)的傳染病、寄(ji)生蟲病及(ji)非(fei)傳(chuan)染病等方面(mian)的免疫(yi)診(zhen)斷。也已應(ying)用於大分(fen)子抗(kang)原(yuan)和小(xiao)分(fen)子抗(kang)原(yuan)的定量測定，根據已(yi)經使用(yong)的結(jie)果(guo)，認為ELISA法具有(you)靈(ling)敏、特(te)異、簡單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定及(ji)易(yi)於自動(dong)化操作(zuo)等特(te)點(dian)。不僅(jin)適用於臨(lin)床(chuang)標(biao)本(ben)的(de)檢查(zha)，而且(qie)由於壹天(tian)之內可(ke)以(yi)檢查(zha)幾(ji)百甚(shen)至(zhi)上千(qian)份標(biao)本(ben),因(yin)此，也適合(he)於血(xue)清流(liu)行(xing)病學調(tiao)查(zha)。本(ben)法不僅(jin)可(ke)以(yi)用來測定抗(kang)ti，而(er)且(qie)也可(ke)用(yong)於測定體(ti)液(ye)中(zhong)的循(xun)環(huan)抗(kang)原，所以(yi)也是壹種(zhong)早期診(zhen)斷的良(liang)好方法。因此ELISA法在生物醫學各(ge)領(ling)域的應(ying)用範(fan)圍日益擴(kuo)大(da)，

免責聲明

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)僅(jin)供研究使用(yong)，不得用於臨(lin)床(chuang)實(shi)驗或(huo)人體(ti)實(shi)驗，否(fou)則所(suo)產(chan)生的壹切(qie)後(hou)果(guo)，由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔，本(ben)公(gong)司(si)概不(bu)負(fu)責(ze)。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說明書操作(zuo)，實(shi)驗者(zhe)違(wei)反說明書操作(zuo)，後果(guo)由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔。

3. 產(chan)品特(te)點(dian)

壹、高(gao)效、靈(ling)敏、特(te)異的抗ti；

二(er)、穩定的重(zhong)復性和(he)可(ke)靠(kao)性；

三(san)、吸(xi)附(fu)性能(neng)好(hao)，空白值低，孔(kong)底透明度(du)高(gao)的(de)固(gu)相(xiang)載體(ti)；

四(si)、適用血(xue)清、血(xue)漿、組織(zhi)勻漿液(ye)、細(xi)胞(bao)培養(yang)上清液(ye)、尿液(ye)等等多(duo)種(zhong)標(biao)本(ben)類(lei)型；

五(wu)、節省(sheng)實(shi)驗經(jing)費。

elisa試(shi)劑(ji)盒(he)回收(shou)率(lv)是反應(ying)待測物(wu)在樣品分(fen)析過程(cheng)中(zhong)的損失(shi)的(de)程(cheng)度(du)，損失(shi)越(yue)少(shao)，回收(shou)率(lv)越(yue)高，如果(guo)作(zuo)標(biao)液(ye)1PPM，就(jiu)是1毫克(ke)/升，而(er)作(zuo)出(chu)標(biao)準(zhun)數(shu)據為0.99毫克(ke)/升，就(jiu)是說妳的(de)回收(shou)率(lv)是99%，這(zhe)個(ge)與真實(shi)成(cheng)分(fen)有(you)密切(qie)的(de)關(guan)系，說明方法的準(zhun)確(que)度(du)。比(bi)如水(shui)中(zhong)總無機(ji)氯(lv)含量測定，樣品水(shui)中(zhong)含有無機(ji)氯(lv)20mg/L，取(qu)100mL被測水(shui)樣品，加(jia)入0.1mL濃度(du)為10mg/mL的含無機(ji)氯(lv)標(biao)準(zhun)樣(yang)品，測定時(shi)忽(hu)略體(ti)積(ji)變化，如果(guo)測定出樣(yang)品中(zhong)無機(ji)氯(lv)為29.8mg/L，則認為回收(shou)率(lv)為99%。

人肝(gan)脂酶(mei)(HL)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

組(zu)成(cheng)結(jie)構(gou)

1、血(xue)清：操作(zuo)過程中(zhong)避(bi)免任(ren)何細(xi)胞(bao)刺激(ji)。使用(yong)不含熱原和(he)內du素的(de)試(shi)管。收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後，1000×g離(li)心10分鐘(zhong)將血(xue)紅細(xi)胞(bao)迅速(su)小(xiao)心地(di)分(fen)離(li)。

2、血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素血(xue)漿可(ke)用(yong)於檢測。1000×g離(li)心30分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)。

3、細(xi)胞(bao)上清液(ye)：1000×g離(li)心10分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)和(he)聚合(he)物。

4、組織(zhi)勻漿：將組(zu)織(zhi)加入適量生理鹽(yan)水搗(dao)碎。1000×g離(li)心10分鐘(zhong)，取(qu)上清液(ye)。

5、保(bao)存(cun)：如果(guo)樣(yang)品不(bu)立即(ji)使用(yong)，應(ying)將其分成(cheng)小(xiao)部分-70℃保(bao)存(cun)，避(bi)免反復冷凍。盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)不要(yao)使用(yong)溶血(xue)或高(gao)血(xue)脂血(xue)。如果(guo)血(xue)清中(zhong)大量(liang)顆粒(li)，檢(jian)測前(qian)先(xian)離(li)心或過(guo)濾。不(bu)要(yao)在37℃或更(geng)高的(de)溫度(du)加(jia)熱解(jie)凍。應(ying)在室溫下解(jie)凍並(bing)確保(bao)樣(yang)品均勻地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍。

試(shi)劑(ji)盒(he)成(cheng)分(fen)

1 預(yu)包(bao)被板: 抗小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素-6兔子IgG,親(qin)合(he)純化 96T

2 酶(mei)標(biao)記(ji)抗ti: (30倍濃(nong)縮(suo))HRP標(biao)記(ji)抗小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素-6兔子IgG,親(qin)合(he)純化 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品: 重(zhong)組小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖(chong)液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫(wen)20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記(ji)抗ti稀(xi)釋液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫(wen)20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色(se)劑(ji): TMB底物液(ye) 15mL x 1

7 終(zhong)止液(ye): 1N硫suan 12mL x 1

8 濃縮(suo)洗滌(di)液(ye): (40倍濃(nong)縮(suo)) 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫(wen)20 BPS 50mL x 1 操作(zuo)說明 1實(shi)驗所(suo)需器材(但(dan)試(shi)劑(ji)盒(he)沒有提供) 酶(mei)標(biao)儀(yi)(450nm) 微移(yi)液(ye)管及(ji)其吸(xi)嘴(zui) 量(liang)筒及(ji)燒杯(bei) 去(qu)離(li)子水(shui) 冰箱(xiang)(4°C) 坐(zuo)標(biao)紙(zhi)(log/log) 吸(xi)水紙(zhi) 試(shi)管(用(yong)於標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)) 溫育(yu)箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用於洗板(ban)) 壹次(ci)性試(shi)劑(ji)管(guan)(用於濃縮(suo)酶(mei)標(biao)記(ji)抗ti和(he)顯(xian)色(se)劑(ji))

常(chang)用方法及(ji)原(yuan)理(li)如(ru)下：

1. 夾(jia)心法：

夾(jia)心法常(chang)用於檢測大(da)分子抗(kang)原(yuan)，壹般的(de)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為:

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹性的(de)抗(kang)ti固(gu)著（coating）於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗(xi)去(qu)多(duo)余抗(kang)ti

b. 加(jia)入待測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含有待(dai)測的(de)抗原，則其會與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗(kang)ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵(jian)結(jie)

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入另壹種(zhong)對(dui)抗(kang)原(yuan)專(zhuan)壹的(de)壹次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待測抗(kang)原進行(xing)鍵(jian)結(jie)

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)壹次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入帶有酶(mei)的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)壹次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)

e. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入酶(mei)底物使酵(jiao)素呈色(se)，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀(yi)器讀取(qu)呈色(se)結(jie)果(guo)

原(yuan)理：針對抗(kang)原分子上(shang)2個(ge)不同(tong)抗(kang)原(yuan)決(jue)定簇(cu)的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)ti分(fen)別(bie)作(zuo)為固(gu)相(xiang)抗(kang)ti和(he)酶(mei)標(biao)抗(kang)ti，將(jiang)大分子抗(kang)原(yuan)分別(bie)制(zhi)備(bei)固(gu)相(xiang)抗(kang)原(yuan)和(he)酶(mei)標(biao)抗(kang)原結(jie)合(he)物。

2. 間(jian)接(jie)法

間(jian)接(jie)法常(chang)用於檢測抗(kang)ti，壹般的(de)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為：

a. 將(jiang)已知的抗(kang)原固(gu)著於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗(xi)去(qu)多(duo)余的抗原。

b. 加(jia)入待測檢(jian)體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含有待(dai)測的(de)壹次(ci)抗(kang)ti，則其會與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗(kang)原進行(xing)專(zhuan)壹性鍵(jian)結(jie)。

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余待測檢(jian)體(ti)，加(jia)入帶有酶(mei)的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待測的(de)壹次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)。

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入酶(mei)底物使酶(mei)呈色(se)，藉儀(yi)器（ELISA reader）測定塑(su)膠盤中(zhong)的吸(xi)光(guang)值（OD值），以(yi)評估(gu)有色(se)終(zhong)產(chan)物的含量即(ji)可(ke)測量(liang)待測抗(kang)ti的(de)含量。

原(yuan)理：利(li)用酶(mei)標(biao)記(ji)的抗(kang)抗(kang)ti以(yi)檢測已(yi)與固(gu)相(xiang)結(jie)合(he)的受檢抗(kang)ti。

3. 競(jing)爭法

競(jing)爭法是壹種(zhong)較(jiao)少(shao)用(yong)到(dao)的ELISA檢(jian)測機(ji)制(zhi)，壹般用(yong)於檢測小(xiao)分(fen)子抗(kang)原(yuan)，其操作(zuo)步(bu)驟(zhou)為：

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹性的(de)抗(kang)ti固(gu)著於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後(hou)洗(xi)去(qu)多(duo)余抗(kang)ti

b. 加(jia)入待測檢(jian)體(ti)，使檢(jian)體(ti)中(zhong)的待(dai)測抗(kang)原與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗(kang)ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵(jian)結(jie)

c. 加(jia)入帶有酶(mei)的抗原(yuan)，此抗(kang)原(yuan)也可(ke)與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗(kang)ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵(jian)結(jie)，由於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)固(gu)著的抗(kang)ti數(shu)量有限，因(yin)此當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原(yuan)的(de)量(liang)越多(duo)，則帶有酶(mei)的抗原(yuan)可(ke)鍵(jian)結(jie)的(de)固(gu)著抗(kang)ti就(jiu)越少(shao)，亦(yi)即(ji)，兩種(zhong)抗(kang)原(yuan)皆競(jing)相(xiang)與(yu)塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)，即(ji)所(suo)謂(wei)競爭法之由來。

d. 洗(xi)去(qu)檢(jian)體(ti)與(yu)帶有酶(mei)的抗原(yuan)，加入酶(mei)底物使酶(mei)呈色(se)，當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗原(yuan)量(liang)越(yue)多(duo)，代表(biao)塑(su)膠孔(kong)盤內(nei)留(liu)下(xia)之帶有酶(mei)的抗原(yuan)越少，顯(xian)色(se)也就(jiu)越淺(qian)。

e. 當需(xu)要(yao)偵(zhen)測無法獲得兩種(zhong)以(yi)上單(dan)壹性抗(kang)ti的(de)抗原，或是不易(yi)得到(dao)足夠(gou)的純化抗(kang)ti以(yi)固(gu)著於孔盤上(shang)時(shi)，壹般會(hui)考(kao)慮使用(yong)競爭法ELISA。

常(chang)見問(wen)題(ti)解(jie)析：

1、試(shi)劑(ji)的(de)選擇(ze)：選擇(ze)優良(liang)試(shi)劑(ji)大(da)家都是知道的(de)，但(dan)是在檢測之前還應(ying)該提前半個小(xiao)時(shi)將(jiang)試(shi)劑(ji)拿到(dao)常(chang)溫下(xia)進行(xing)解(jie)凍。

2、加(jia)樣中(zhong)可(ke)能(neng)遇(yu)到(dao)的問(wen)題(ti)。

3、洗(xi)板時(shi)容易(yi)造成(cheng)誤差(cha)。

4、顯(xian)色(se)問(wen)題(ti)：使用(yong)了過期的顯(xian)色(se)劑(ji)或(huo)者(zhe)是顯(xian)色(se)劑(ji)用(yong)過後放置時(shi)間(jian)太(tai)長，都有(you)可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)顯(xian)色(se)劑(ji)不(bu)顯(xian)色(se)。

5、終(zhong)止反應(ying)：在加終(zhong)止劑(ji)的(de)時(shi)候(hou)由於傾倒(dao)速(su)度(du)快(kuai)，產(chan)生氣(qi)泡(pao)，造成(cheng)假(jia)陽(yang)性結(jie)果(guo)，所(suo)以(yi)在倒終(zhong)止劑(ji)的(de)時(shi)候(hou)要(yao)緩(huan)慢(man)倒(dao)。

6、讀板(ban)：讀板(ban)的(de)時(shi)候(hou)首先(xian)應(ying)該保(bao)證(zheng)板的(de)清潔幹凈。

訂(ding)購(gou)說明:

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