人(ren)血(xue)管生長(chang)素(su)(ANG)ELISA試(shi)劑盒(he)

人(ren)血(xue)管生長(chang)素(su)(ANG)ELISA試(shi)劑盒(he)

檢測(ce)原理

試(shi)劑盒(he)采用(yong)雙抗原壹-步夾(jia)心(xin)法酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(ELISA) 。往(wang)預(yu)先(xian)包被病(bing)毒性腹(fu)瀉病(bing)毒抗ti的(de)包(bao)被微孔中(zhong)，依次(ci)加入標(biao)本(ben)、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗原，經(jing)過(guo)溫(wen)育(yu)並徹(che)di洗滌(di)。用底(di)物TMB顯(xian)色，TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(mei)的催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍(lan)色，並在(zai)suan的(de)作用(yong)下轉化(hua)成(cheng)最終的黃(huang)色。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450NM波長下測(ce)定吸(xi)光度(du)(OD值) ，與(yu)CUTOFF值(zhi)相比(bi)較(jiao)，從(cong)而判(pan)定(ding)標(biao)本(ben)中(zhong)豬病(bing)毒性腹(fu)瀉病(bing)毒(BVDV) 的存在(zai)與(yu)否。

樣品(pin)收集、處理及保存方(fang)法(fa)

1.血(xue)清:使用不含熱(re)原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的試(shi)管，操作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避免(mian)任何細(xi)胞刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液後，3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和(he)紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地(di)分離(li)。

2.血(xue)漿(jiang): EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽(yan)或(huo)肝素(su)抗凝。3000轉離(li)心(xin)30分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。

3.細(xi)胞上(shang)清(qing)液: 3000轉離(li)心(xin)10分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物。

4.組(zu)織勻(yun)漿(jiang):將(jiang)組(zu)織加入適量生(sheng)理鹽水搗(dao)碎。3000轉 離(li)心(xin)10分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。

5.保存(cun):如果(guo)樣本(ben)收集後不及時檢測(ce)，請按(an)壹次(ci)用(yong)量(liang)分裝，凍(dong)存(cun)於-20°C， 避免(mian)反(fan)

復凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫下解凍(dong)並確(que)保樣品(pin)均勻(yun)地(di)充分解凍(dong)。

自(zi)備物品(pin)

1.酶(mei)標(biao)儀(yi)(450NM)

2.高(gao)精(jing)度(du)加樣器及(ji)槍(qiang)頭(tou): 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL

3.37℃恒(heng)溫(wen)箱(xiang)

操作(zuo)註(zhu)意(yi)事項

1.試(shi)劑盒(he)保存在(zai)2-8°C，使(shi)用(yong)前室(shi)溫(wen)平衡(heng)20分鐘(zhong)。從(cong)冰(bing)箱(xiang)取(qu)出的(de)濃縮洗滌(di)液會(hui)有結晶，這屬(shu)於正(zheng)常現象，水(shui)浴(yu)加熱(re)使(shi)結晶完quan溶(rong)解後再使用(yong)。

2.實(shi)驗中(zhong)不用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立(li)即放回(hui)自封(feng)袋(dai)中(zhong)，密封(feng)(低溫(wen)幹(gan)燥(zao))保存(cun)。

3.預(yu)處理後的樣本(ben)請按(an)照操作(zuo)步驟用(yong)樣ben稀釋ye適(shi)當稀釋以(yi)達到試(shi)劑盒(he)的的最jia檢(jian)測(ce)效果(guo)。.

4.嚴格按(an)照說明書中(zhong)標(biao)明的時間(jian)、加液量(liang)及順序(xu)進(jin)行(xing)溫育(yu)操作(zuo)。

5.所(suo)有液體(ti)組(zu)分使用(yong)前充分搖(yao)勻(yun)。

人(ren)血(xue)管生長(chang)素(su)(ANG)ELISA試(shi)劑盒(he)

常用(yong)方(fang)法：

1. 夾(jia)心(xin)法：

夾(jia)心(xin)法常(chang)用於檢(jian)測(ce)大(da)分子抗原，壹般(ban)的(de)操(cao)作步驟為(wei):

a. 將具(ju)有專壹性的(de)抗ti固(gu)著(zhu)（coating）於塑膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗去(qu)多余抗ti

b. 加入待測(ce)檢體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含有待測(ce)的抗原，則(ze)其會(hui)與塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專壹性鍵(jian)結(jie)

c. 洗去(qu)多余待測(ce)檢體(ti)，加入另壹種對(dui)抗原專壹的壹次抗ti，與(yu)待測(ce)抗原進(jin)行(xing)鍵(jian)結(jie)

d. 洗去(qu)多余未(wei)鍵(jian)結(jie)壹次抗ti，加入帶有酶(mei)的二(er)次抗ti，與(yu)壹次抗ti鍵(jian)結(jie)

e. 洗去(qu)多余未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗ti，加入酶(mei)底物使(shi)酵(jiao)素(su)呈(cheng)色，以(yi)肉眼(yan)或(huo)儀器(qi)讀取(qu)呈(cheng)色結(jie)果

原(yuan)理：針對抗原分子上(shang)2個不(bu)同(tong)抗原決(jue)定(ding)簇的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗ti分別作(zuo)為(wei)固(gu)相抗ti和(he)酶(mei)標(biao)抗ti，將(jiang)大分子抗原分別制(zhi)備(bei)固(gu)相抗原和酶(mei)標(biao)抗原結(jie)合物。

2. 間(jian)接(jie)法

間(jian)接(jie)法常用於檢(jian)測(ce)抗ti，壹般(ban)的(de)操(cao)作步驟為(wei)：

a. 將已知的(de)抗原固(gu)著(zhu)於塑膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗去(qu)多余的抗原。

b. 加入待測(ce)檢體(ti)，檢(jian)體(ti)中(zhong)若含有待測(ce)的壹次抗ti，則(ze)其會(hui)與塑膠(jiao)孔盤上的抗原進(jin)行(xing)專壹性鍵(jian)結(jie)。

c. 洗去(qu)多余待測(ce)檢體(ti)，加入帶有酶(mei)的二(er)次抗ti，與(yu)待測(ce)的壹次抗ti鍵(jian)結(jie)。

d. 洗去(qu)多余未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗ti，加入酶(mei)底物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色，藉儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測(ce)定塑膠(jiao)盤中(zhong)的吸(xi)光值(zhi)（OD值），以評估(gu)有色終產物的(de)含量(liang)即(ji)可(ke)測(ce)量待測(ce)抗ti的(de)含量(liang)。

原理：利用(yong)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗抗ti以(yi)檢測(ce)已與固(gu)相結(jie)合的(de)受檢(jian)抗ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法(fa)

競(jing)爭(zheng)法(fa)是(shi)壹種較(jiao)少用(yong)到(dao)的ELISA檢測(ce)機(ji)制，壹般(ban)用(yong)於檢(jian)測(ce)小(xiao)分子抗原，其(qi)操(cao)作步驟為(wei)：

a. 將具(ju)有專壹性的(de)抗ti固(gu)著(zhu)於塑膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗去(qu)多余抗ti

b. 加入待測(ce)檢體(ti)，使(shi)檢(jian)體中(zhong)的待測(ce)抗原與(yu)塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專壹性鍵(jian)結(jie)

c. 加入帶有酶(mei)的抗原，此(ci)抗原也(ye)可(ke)與(yu)塑膠(jiao)孔盤上的抗ti進(jin)行(xing)專壹性鍵(jian)結(jie)，由(you)於塑膠(jiao)孔盤上固著(zhu)的(de)抗ti數量有限，因此當檢體中(zhong)抗原的(de)量(liang)越多，則(ze)帶有酶(mei)的抗原可(ke)鍵(jian)結(jie)的(de)固(gu)著(zhu)抗ti就(jiu)越少，亦即(ji)，兩種抗原皆競(jing)相與(yu)塑膠(jiao)孔盤上抗ti鍵(jian)結(jie)，即(ji)所(suo)謂競(jing)爭(zheng)法(fa)之(zhi)由(you)來(lai)。

d. 洗去(qu)檢體與帶有酶(mei)的抗原，加入酶(mei)底物使(shi)酶(mei)呈(cheng)色，當檢體中(zhong)抗原量(liang)越多，代(dai)表(biao)塑膠(jiao)孔盤內(nei)留下(xia)之(zhi)帶(dai)有酶(mei)的抗原越少，顯(xian)色也(ye)就(jiu)越淺(qian)。

e. 當需要(yao)偵(zhen)測(ce)無法獲得兩(liang)種(zhong)以上單(dan)壹性抗ti的(de)抗原，或(huo)是不(bu)易(yi)得到(dao)足夠(gou)的純化(hua)抗ti以(yi)固著(zhu)於孔盤上時，壹般(ban)會(hui)考(kao)慮(lv)使(shi)用(yong)競(jing)爭(zheng)法(fa)ELISA。

免(mian)責(ze)聲(sheng)明：

1. 試(shi)劑盒(he)僅供研究使用(yong)，不得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)實(shi)驗或(huo)人(ren)體實(shi)驗，否(fou)則(ze)所產(chan)生的壹切(qie)後果，由(you)實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔，本(ben)公司(si)概不(bu)負責(ze)。

2. 嚴格按(an)照說明書操作，實(shi)驗者(zhe)違反(fan)說明書操作，後果由(you)實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔。

公司(si)其他(ta)產(chan)品(pin)：

人(ren)β-神(shen)經生(sheng)長(chang)因(yin)子(β-NGF)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)鈣聯(lian)接(jie)蛋(dan)白(bai)(CLGN)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)基質(zhi)蛋(dan)白(bai)Del-1(Del-1)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)轉錄因子SOX5(SOX5)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)抑制(zhi)素(su)β-B(Inhbb)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)6-磷(lin)酸(suan)葡萄(tao)糖脫(tuo)氫酶(mei)(6PGD)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)鈣粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白(bai)(H-Cad)elisa試(shi)劑盒(he)

人(ren)鎂離(li)子(zi)轉運(yun)蛋(dan)白(bai)1(MAGT1)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠抗紅(hong)細(xi)胞抗體(RBC)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠9型(xing)腺(xian)相關病(bing)毒(AAV9)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠硒蛋(dan)白(bai)P(Se-P)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠B-細(xi)胞激(ji)活因子(zi)受(shou)體(BAFFR)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠血(xue)清反(fan)應(ying)因(yin)子(zi)(SRF)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠視紫質(zhi)(RHO)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠乳腺(xian)癌(ai)標(biao)誌(zhi)物-CA153(CA153)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠克(ke)拉(la)拉(la)細(xi)胞蛋(dan)白(bai)(CC16)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠支鏈(lian)氨(an)基酸(suan)轉氨酶(mei)(BCAT)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠支鏈(lian)α-酮酸(suan)脫(tuo)氨酶(mei)(BCKD)elisa試(shi)劑盒(he)

大鼠蛋(dan)氨(an)酸(suan)腺(xian)苷(gan)轉移酶(mei)(MAT)elisa試(shi)劑盒(he)