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          類(lei)黃(huang)酮糖基(ji)轉移酶(UFGT)測試盒

          類(lei)黃(huang)酮糖基(ji)轉移酶(UFGT)測試盒
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          類黃酮糖基(ji)轉移酶(UFGT)測試盒

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          測定意義(yi):
          類(lei)黃(huang)酮是(shi)植物(wu)次(ci)生(sheng)代謝(xie)產(chan)物(wu),糖基(ji)化是(shi)類黃(huang)酮基(ji)本結(jie)構(gou)形(xing)成的最主(zhu)要的修(xiu)飾反(fan)應之壹(yi),提(ti)高(gao)了(le)類(lei)黃酮苷(gan)元的化學穩定性(xing),這壹(yi)過程主(zhu)要由(you)類(lei)黃酮糖基(ji)轉移酶催化的,使(shi)類(lei)黃酮-OH與UDPG反(fan)應,是(shi)黃酮合成途(tu)徑中的關鍵(jian)酶。

          操作(zuo)流程:

          1.從室溫平(ping)衡20min後的鋁(lv)箔袋(dai)中取出所(suo)需板(ban)條(tiao),剩余(yu)板(ban)條(tiao)用(yong)自(zi)封袋(dai)密(mi)封放(fang)回(hui)4℃。

          2. 設置(zhi)標準(zhun)品(pin)孔和樣(yang)本孔,標準(zhun)品(pin)孔各(ge)加不同(tong)濃(nong)度的標(biao)準(zhun)品(pin)50μL;

          3. 樣本(ben)孔中加入(ru)待測樣本(ben)50μL;空(kong)白(bai)孔不加(jia)。

          4. 除空(kong)白孔外,標(biao)準(zhun)品(pin)孔和樣(yang)本孔中每孔加入(ru)辣根過氧化物(wu)酶(HRP)標記的檢(jian)測抗(kang)體100μL,用封板(ban)膜(mo)封住反(fan)應孔,37℃水(shui)浴鍋(guo)或恒溫箱溫育60min。

          5. 棄(qi)去(qu)液體,吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹,每(mei)孔加滿洗(xi)滌液(ye)(350μL),靜置(zhi)1min,甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液(ye),吸(xi)水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹,如此(ci)重(zhong)復洗(xi)板(ban)5次(ci)(也(ye)可(ke)用洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)板(ban))。

          6. 每孔加入(ru)底物(wu)A、B各(ge)50μL,37℃避光孵(fu)育15min。

          7. 每孔加入(ru)終止(zhi)液(ye)50μL,15min內(nei),在(zai)450nm波長處(chu)測定各(ge)孔的OD值(zhi)。

          優點(dian)如下(xia):

          1、快速(su)簡便:操作(zuo)時間短,48-50T,可(ke)測40例樣(yang)本(ben)左(zuo)右,96-100T,可(ke)測80例樣(yang)本(ben)左(zuo)右;

          2、取樣量微:常(chang)規操作(zuo)取樣量50l, 酶標儀操作(zuo)僅(jin)需5l即可(ke)檢(jian)測,部(bu)分試(shi)劑(ji)盒取樣多(duo)少(shao)請;

          3、穩定性(xing)好:試劑(ji)盒2~8℃存放(fang)3個(ge)月有(you)效;

          4、再現性(xing)好:20倍稀釋(shi)線(xian)性(xing)仍(reng)然良好;

          5、回(hui)收(shou)試驗(yan): X =99%;

          6、受外界(jie)影響因(yin)素小:幹擾因(yin)素少(shao),重(zhong)復性(xing)強;

          7、測試面(mian)廣(guang):可(ke)測動物(wu)血清(漿(jiang))、組(zu)織(zhi)、各(ge)種體液、灌(guan)流(liu)液(ye)、各(ge)種培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)以(yi)及(ji)細胞(bao)培(pei)養上清液(ye)等,部(bu)分試(shi)劑(ji)盒適(shi)用(yong)於檢(jian)測植物(wu),歡(huan)迎(ying)

          儀器:

          1、分光光度計/酶標儀/生(sheng)化分析(xi)儀(比(bi)色測定波長為(wei)550nm)

          2、恒溫水(shui)浴箱或氣浴箱 (孵(fu)育溫度為(wei)37℃)

          3、臺式(shi)離(li)心(xin)機

          4、漩(xuan)渦(wo)混勻器

          5、微量(liang)移液器

          使用(yong)須知:

          (1)請參(can)照相關法規、文獻、MSDs等信(xin)息,理(li)解並掌(zhang)握(wo)好試(shi)劑(ji)的特(te)性(xing),再進行安(an)全操作(zuo)。

          (2)通(tong)常(chang)購(gou)買試劑(ji)時壹(yi)定要想(xiang)到(dao)--次(ci)性(xing)用完。若(ruo)估算(suan)不足有(you)剩余(yu)的話(hua),更(geng)加註(zhu)意其(qi)他保管(guan)和(he)管(guan)理(li)。

          (3)萬壹(yi)-試劑(ji)操作(zuo)者(zhe)並非(fei)專業技術人(ren)員。必(bi)須在(zai)專業人(ren)士的指(zhi)導監(jian)督(du)下進(jin)行操作(zuo)。對於(yu)使用(yong)後的廢(fei)棄(qi)物(wu),不要或者(zhe)舊(jiu)的試(shi)劑(ji),應按照相關法律(lv)法規正當(dang)處理(li)。

          (4)購(gou)買後,請務(wu)必(bi)確認(ren)標簽(qian)上的註(zhu)意事(shi)項;做好(hao)預防顛(dian)倒,摔壞(huai)的措(cuo)施和管(guan)理(li)體制;在(zai)使用前(qian)再次(ci)確(que)認(ren)標(biao)簽上的註(zhu)意事(shi)項,做(zuo)好必(bi)要的安(an)全對(dui)策;對沒(mei)有(you)標明其危(wei)害(hai)特(te)性(xing)、有(you)害(hai)特(te)性(xing)的,也(ye)要慎(shen)重(zhong)地進行操作(zuo);必(bi)須帶好(hao)防(fang)護用具(ju),小心(xin)翼翼(yi)進(jin)行操作(zuo)。

          生(sheng)化試劑(ji)的種(zhong)類(lei)與等級說明:

          (1)免(mian)疫(yi)試劑(ji)包(bao)括抗(kang)體及抗(kang)血清(qing)、正常(chang)血清及補(bu)體、抗(kang)原、免(mian)疫(yi)組(zu)織(zhi)化學研究用(yong)試(shi)劑(ji)、細胞(bao)培(pei)養用試劑(ji)、細胞(bao)分(fen)離(li)試(shi)劑(ji)、凝(ning)膠(jiao)內擴(kuo)散法及電泳(yong)試劑(ji)等。

          (2)基(ji)因(yin)工(gong)程用(yong)試劑(ji)包(bao)括基(ji)因(yin)表(biao)達(da)與(yu)基(ji)因(yin)重(zhong)組(zu)、人(ren)工(gong)合成(cheng)蛋(dan)白(bai)、激(ji)素、核酸(suan)合(he)成(cheng)試劑(ji)、內切(qie)酶等。

          (3)誘(you)變(bian)劑(ji)和主(zhu)要供測定工(gong)作場所(suo)與生(sheng)活(huo)環(huan)境(jing)中的毒(du)物(wu)質的致(zhi)癌性(xing)與化學毒物(wu)的致(zhi)突(tu)變性(xing)。

          (4)工(gong)業用化學品(pin)包(bao)括試制開發(fa)的工(gong)業用化學品(pin),有(you)四(si)千(qian)種以(yi)上(shang),還(hai)在(zai)不斷(duan)增加。

          樣本(ben)收集與(yu)前(qian)處理(li):

          血清(qing)(漿(jiang))可(ke)直接測定。

          紅細胞(bao):需按照試劑(ji)盒中說明書上(shang)紅細胞(bao)的測定方(fang)法進行提(ti)取後測定。

          動物(wu)組(zu)織(zhi)樣(yang)本:可(ke)用生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)按重(zhong)量體積比(bi)制備(bei)成(cheng)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)液(ye),離(li)心(xin)取上清測定。

          培養(yang)細胞(bao)、細(xi)菌(jun)、植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi):常(chang)用PBS作為(wei)勻(yun)漿(jiang)介質破碎(sui)後離(li)心(xin)取上清測定。

          具(ju)體的樣(yang)本(ben)前(qian)處理(li):參考(kao)我(wo)們隨貨(huo)發(fa)送的《實驗(yan)方(fang)法學》以(yi)及(ji)試劑(ji)盒中詳細(xi)說明書。

          實驗(yan)結(jie)果(guo)判斷(duan)我(wo)有(you)妙招(zhao):

          1、定量測定結果(guo)根據標(biao)準(zhun)曲線計算樣(yang)品(pin)中待測物(wu)的含(han)量。

          2、以(yi)樣(yang)品(pin)孔的OD值(zhi)大(da)於陰(yin)性(xing)對照OD值+2~3SD,作(zuo)為(wei)陽性(xing)結果(guo)的閾值。

          3、以(yi)P/N值(zhi)(陽性(xing)孔OD值/陰(yin)性(xing)孔OD值)大(da)於或等於2.1為(wei)陽性(xing),P/N值小於2.1,但大(da)於1.5為(wei)可(ke)疑,P/N小於(yu)1.5為(wei)陰(yin)性(xing)。

          4、ELISA試劑(ji)盒目(mu)測定性(xing)法:加入底物(wu)經(jing)酶解和終止(zhi)反(fan)應後(hou),肉眼(yan)觀(guan)察(cha)陽性(xing)孔顏(yan)色明顯(xian)深(shen)於(競(jing)爭(zheng)法則淺(qian)於(yu))陰(yin)性(xing)對照,與陰(yin)性(xing)對照的顏(yan)色接(jie)近(jin)者(zhe),判定為(wei)陰(yin)性(xing)。

          為(wei)了(le)達(da)到(dao)準(zhun)確(que)的實驗(yan)結(jie)果(guo),取用試劑(ji)時應(ying)遵(zun)守(shou)以(yi)下(xia)規則,以(yi)保證(zheng)試(shi)劑(ji)不受汙染(ran)和(he)不變(bian)質:

          (1)試劑(ji)不能與手接(jie)觸(chu)。

          (2)要用(yong)潔(jie)凈(jing)的藥(yao)勺(shao),量筒(tong)或滴管(guan)取用試劑(ji),*不準(zhun)用(yong)同(tong)壹(yi)種工(gong)具(ju)同時(shi)連續取用多(duo)種(zhong)試劑(ji)。取完壹(yi)種試(shi)劑(ji)後,應將(jiang)工(gong)具(ju)洗(xi)凈(jing)(藥(yao)勺(shao)要擦幹)後(hou),方(fang)可(ke)取用另(ling)壹(yi)種試(shi)劑(ji)。

          (3)試劑(ji)取用後壹(yi)定要將(jiang)瓶(ping)塞蓋(gai)緊(jin),不可(ke)放(fang)錯瓶蓋(gai)和滴(di)管,絕不允(yun)許張(zhang)冠(guan)李(li)戴,用完後(hou)將瓶(ping)放(fang)回(hui)原(yuan)處。

          (4)已取出的試(shi)劑(ji)不能再放(fang)回(hui)原(yuan)試劑(ji)瓶內(nei)。

          另(ling)外(wai)取用試劑(ji)時應(ying)本著(zhe)節(jie)約(yue)精(jing)神(shen),盡可(ke)能少(shao)用(yong),這樣(yang)既(ji)便(bian)於(yu)操作(zuo)和仔細觀(guan)察(cha)現象,又能得(de)到(dao)較(jiao)好的實驗(yan)結(jie)果(guo)。

          類黃(huang)酮糖基(ji)轉移酶(UFGT)測試盒




















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