葡(pu)萄糖(tang)含量測(ce)試(shi)盒

葡萄糖(tang)含量測(ce)試(shi)盒

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測定意義：
葡(pu)萄糖(tang)不(bu)僅(jin)是細胞能(neng)量代(dai)謝(xie)的主(zhu)要(yao)底物，而(er)且其(qi)代謝(xie)中(zhong)間(jian)產物(wu)是生(sheng)物合成的(de)重(zhong)要(yao)底物。植(zhi)物可通(tong)過(guo)光(guang)合作用(yong)產生(sheng)葡萄糖(tang)。就哺(bu)乳動物(wu)而(er)言，葡萄糖(tang)不(bu)僅(jin)是大(da)腦神經系(xi)統(tong)、肌(ji)肉、脂(zhi)肪(fang)組(zu)織(zhi)等(deng)能(neng)源，而(er)且與(yu)還原(yuan)性輔(fu)酶(mei)、乳糖(tang)和乳脂的(de)合成密(mi)切相關。

操作流(liu)程：

1.從室(shi)溫平(ping)衡20min後的鋁(lv)箔袋(dai)中(zhong)取(qu)出(chu)所需板(ban)條(tiao)，剩余(yu)板(ban)條(tiao)用(yong)自(zi)封(feng)袋(dai)密封(feng)放(fang)回(hui)4℃。

2. 設置(zhi)標準(zhun)品孔(kong)和樣本孔(kong)，標準(zhun)品孔(kong)各加不(bu)同(tong)濃度的(de)標準(zhun)品50μL；

3. 樣本孔(kong)中(zhong)加入待測(ce)樣本50μL；空白孔(kong)不(bu)加。

4. 除空白孔(kong)外，標準(zhun)品孔(kong)和樣本孔(kong)中(zhong)每(mei)孔(kong)加入辣根過(guo)氧化物(wu)酶(mei)（HRP）標記的檢(jian)測(ce)抗體(ti)100μL，用封板(ban)膜(mo)封住(zhu)反(fan)應孔(kong)，37℃水浴(yu)鍋或恒溫(wen)箱(xiang)溫育60min。

5. 棄去(qu)液體(ti)，吸水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜(jing)置(zhi)1min，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌(di)液(ye)，吸水(shui)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan)，如此(ci)重(zhong)復(fu)洗(xi)板(ban)5次（也(ye)可用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)板(ban)）。

6. 每孔(kong)加入底物A、B各(ge)50μL，37℃避(bi)光(guang)孵育15min。

7. 每孔(kong)加入終(zhong)止液50μL，15min內(nei)，在(zai)450nm波(bo)長處測(ce)定各孔(kong)的OD值(zhi)。

優點(dian)如下:

1、快速(su)簡便(bian):操作時(shi)間(jian)短,48-50T,可測(ce)40例(li)樣本左右(you),96-100T,可測(ce)80例(li)樣本左右(you);

2、取樣量微(wei):常(chang)規(gui)操(cao)作取(qu)樣(yang)量50l, 酶(mei)標儀操作僅(jin)需5l即可檢(jian)測(ce),部(bu)分試(shi)劑盒取(qu)樣多(duo)少(shao)請;

3、穩定性(xing)好:試劑盒2~8℃存(cun)放(fang)3個(ge)月(yue)有(you)效;

4、再現性好:20倍稀釋線(xian)性(xing)仍(reng)然(ran)良好;

5、回(hui)收試驗(yan): X =99%;

6、受外界影響因素小(xiao):幹擾(rao)因素少(shao),重(zhong)復(fu)性(xing)強(qiang);

7、測試面(mian)廣(guang):可測(ce)動物(wu)血(xue)清(漿)、組(zu)織(zhi)、各(ge)種體(ti)液、灌(guan)流液(ye)、各種培養細胞(bao)以及(ji)細(xi)胞培養上清(qing)液(ye)等,部(bu)分試(shi)劑盒適(shi)用於檢測(ce)植物(wu),歡迎(ying)

儀器:

1、分光(guang)光(guang)度計(ji)/酶(mei)標儀/生化分析儀(yi)(比(bi)色(se)測(ce)定波(bo)長為550nm)

2、恒溫(wen)水(shui)浴(yu)箱(xiang)或氣浴(yu)箱(xiang) (孵育溫(wen)度為37℃)

3、臺式(shi)離心機(ji)

4、漩渦混(hun)勻器(qi)

5、微(wei)量移(yi)液(ye)器

使用須(xu)知(zhi):

(1)請參照相關法規(gui)、文(wen)獻(xian)、MSDs等信息,理(li)解(jie)並(bing)掌(zhang)握(wo)好試劑的特(te)性(xing),再進(jin)行(xing)安全操作。

(2)通常(chang)購(gou)買(mai)試(shi)劑時壹定要想(xiang)到--次性(xing)用(yong)完。若(ruo)估算不(bu)足(zu)有(you)剩余(yu)的(de)話，更加註意其(qi)他保管和管理(li)。

(3)萬(wan)壹-試劑操作者並(bing)非專(zhuan)業技術(shu)人(ren)員(yuan)。必須(xu)在(zai)專(zhuan)業人(ren)士(shi)的指(zhi)導監督下進(jin)行(xing)操作。對(dui)於使用後的廢(fei)棄物(wu),不(bu)要(yao)或者舊(jiu)的試(shi)劑，應按照相關法律(lv)法規(gui)正(zheng)當處(chu)理(li)。

(4)購買後，請務(wu)必確(que)認標簽(qian)上的(de)註意事項(xiang);做好預(yu)防顛倒(dao),摔壞的措(cuo)施和管理(li)體(ti)制;在使用前(qian)再(zai)次確(que)認標簽(qian)上的(de)註意事項(xiang)，做(zuo)好必要(yao)的(de)安全(quan)對(dui)策;對沒(mei)有(you)標明(ming)其(qi)危害特(te)性(xing)、有(you)害特(te)性(xing)的，也(ye)要慎(shen)重(zhong)地(di)進(jin)行(xing)操作;必須(xu)帶好防護用具，小心翼(yi)翼(yi)進(jin)行(xing)操作。

生化試(shi)劑的種類與(yu)等(deng)級(ji)說明(ming):

(1)免疫試(shi)劑包括抗體(ti)及(ji)抗血(xue)清(qing)、正(zheng)常(chang)血(xue)清(qing)及(ji)補體(ti)、抗原(yuan)、免疫組(zu)織(zhi)化學(xue)研(yan)究(jiu)用試(shi)劑、細胞(bao)培養用試(shi)劑、細胞(bao)分離(li)試(shi)劑、凝(ning)膠(jiao)內(nei)擴(kuo)散法及(ji)電(dian)泳試劑等。

(2)基因工(gong)程用試劑包括基因表(biao)達(da)與基(ji)因重(zhong)組(zu)、人(ren)工(gong)合成蛋(dan)白、激(ji)素、核(he)酸合成試(shi)劑、內(nei)切酶(mei)等(deng)。

(3)誘(you)變(bian)劑和主要(yao)供(gong)測(ce)定(ding)工(gong)作場(chang)所與(yu)生(sheng)活(huo)環(huan)境(jing)中(zhong)的(de)毒物質(zhi)的致癌(ai)性(xing)與化學(xue)毒物的(de)致突(tu)變(bian)性。

(4)工(gong)業用化學(xue)品(pin)包括試制開發(fa)的工(gong)業用化學(xue)品(pin),有(you)四千種以上,還在不(bu)斷(duan)增加。

樣本收集與(yu)前(qian)處理(li):

血清(漿)可直接測(ce)定。

紅細(xi)胞:需按照試(shi)劑盒中(zhong)說明(ming)書(shu)上紅細(xi)胞的(de)測定方(fang)法進(jin)行(xing)提取後測定(ding)。

動物(wu)組(zu)織(zhi)樣(yang)本:可用(yong)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)按重(zhong)量體(ti)積比(bi)制備成組(zu)織(zhi)勻(yun)漿液(ye),離心取(qu)上清(qing)測(ce)定。

培養細胞(bao)、細菌(jun)、植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi):常(chang)用(yong)PBS作為勻(yun)漿介(jie)質破(po)碎後離心取(qu)上清(qing)測(ce)定。

具體(ti)的樣本前處(chu)理(li):參考我們隨貨(huo)發(fa)送的(de)《實(shi)驗(yan)方(fang)法學(xue)》以及(ji)試(shi)劑盒中(zhong)詳(xiang)細(xi)說明(ming)書(shu)。

實(shi)驗(yan)結果(guo)判(pan)斷(duan)我(wo)有(you)妙招(zhao):

1、定量測(ce)定(ding)結果(guo)根(gen)據(ju)標準(zhun)曲線(xian)計(ji)算樣(yang)品中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)的(de)含量。

2、以樣(yang)品(pin)孔(kong)的OD值(zhi)大(da)於陰性(xing)對照(zhao)OD值(zhi)+2~3SD,作為陽(yang)性結果(guo)的(de)閾值(zhi)。

3、以P/N值(zhi)(陽性(xing)孔(kong)OD值(zhi)/陰性(xing)孔(kong)OD值(zhi))大(da)於或等(deng)於2.1為陽(yang)性,P/N值(zhi)小於2.1,但大(da)於1.5為可疑(yi),P/N小於1.5為陰(yin)性。

4、ELISA試劑盒目(mu)測定性(xing)法:加入底物經酶(mei)解(jie)和終(zhong)止反應(ying)後,肉眼(yan)觀(guan)察陽性(xing)孔(kong)顏(yan)色(se)明(ming)顯(xian)深(shen)於(競爭(zheng)法則(ze)淺於)陰性(xing)對照(zhao),與(yu)陰(yin)性(xing)對照的顏(yan)色(se)接(jie)近(jin)者,判(pan)定(ding)為陰(yin)性。

為了達(da)到準(zhun)確的(de)實(shi)驗(yan)結果(guo),取用試(shi)劑時應(ying)遵守以下規則(ze),以保證試劑不(bu)受汙染(ran)和不(bu)變(bian)質:

(1)試劑不(bu)能(neng)與(yu)手接(jie)觸。

(2)要用潔(jie)凈的(de)藥(yao)勺(shao),量筒(tong)或(huo)滴管取(qu)用試(shi)劑,*不(bu)準(zhun)用同(tong)壹種工(gong)具同時連續(xu)取用(yong)多(duo)種試劑。取完壹種試劑後,應將(jiang)工(gong)具洗(xi)凈(藥(yao)勺(shao)要擦幹)後,方(fang)可取(qu)用(yong)另壹種試劑。

(3)試劑取用(yong)後壹定要將(jiang)瓶塞(sai)蓋緊,不(bu)可放(fang)錯瓶(ping)蓋和滴管,絕(jue)不(bu)允許張冠(guan)李(li)戴,用完後將(jiang)瓶放(fang)回(hui)原處(chu)。

(4)已取(qu)出的(de)試劑不(bu)能(neng)再(zai)放(fang)回(hui)原試(shi)劑瓶內(nei)。

另外取(qu)用(yong)試劑時應(ying)本著節約(yue)精神,盡可能(neng)少(shao)用,這樣(yang)既便(bian)於操作和仔(zai)細觀(guan)察現象,又(you)能(neng)得(de)到(dao)較好的實(shi)驗(yan)結果(guo)。

葡萄糖(tang)含量測(ce)試(shi)盒