雞腺病(bing)毒抗原(yuan)(ADV-Ag)elisa試劑盒

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ELISA法是免疫診(zhen)斷(duan)中的(de)壹項(xiang)新(xin)技(ji)術，現已(yi)成(cheng)功(gong)地應(ying)用(yong)於(yu)多(duo)種(zhong)病(bing)原微(wei)生物(wu)所(suo)引起(qi)的(de)傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄生蟲(chong)病(bing)及非傳(chuan)染(ran)病(bing)等方面(mian)的(de)免疫診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大分(fen)子(zi)抗(kang)原和(he)小分子(zi)抗(kang)原(yuan)的(de)定量測定，根據已(yi)經使(shi)用(yong)的(de)結果(guo)，認為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏、特異、簡(jian)單、快速(su)、穩(wen)定及易(yi)於(yu)自(zi)動化操作(zuo)等特點(dian)。不(bu)僅適用(yong)於(yu)臨(lin)床標本(ben)的(de)檢查，而(er)且由(you)於(yu)壹天之內可(ke)以(yi)檢查(zha)幾(ji)百(bai)甚至(zhi)上(shang)千份標本(ben),因(yin)此(ci)，也適合於(yu)血清(qing)流(liu)行病(bing)學(xue)調(tiao)查。本法不僅可(ke)以(yi)用(yong)來測定抗(kang)ti，而(er)且也(ye)可(ke)用(yong)於(yu)測定體(ti)液(ye)中的(de)循(xun)環(huan)抗原(yuan)，所以(yi)也是壹種(zhong)早期診(zhen)斷(duan)的(de)良好(hao)方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物(wu)醫(yi)學(xue)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應(ying)用(yong)範(fan)圍日(ri)益(yi)擴大，

組(zu)成(cheng)結構(gou)

1、血清(qing)：操作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免任何細(xi)胞刺激。使用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內du素的(de)試管(guan)。收集血液(ye)後，1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血紅(hong)細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分離(li)。

2、2、血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬suan鹽(yan)、肝素血漿(jiang)可(ke)用(yong)於(yu)檢測(ce)。1000×g離(li)心(xin)30分鐘(zhong)去除(chu)顆粒(li)。

3、細(xi)胞上(shang)清(qing)液：1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒(li)和(he)聚合物(wu)。

4、組(zu)織勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入適量生理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分鐘，取(qu)上(shang)清(qing)液。

5、保(bao)存：如(ru)果(guo)樣品不立即使(shi)用(yong)，應(ying)將(jiang)其(qi)分(fen)成(cheng)小部(bu)分(fen)-70℃保存，避免反復冷(leng)凍(dong)。盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)不要使用(yong)溶(rong)血。如(ru)果(guo)血清(qing)中大量(liang)顆粒(li)，檢(jian)測前(qian)先離心或過(guo)濾(lv)。不要在(zai)37℃或(huo)更(geng)高的(de)溫度加(jia)熱(re)解(jie)凍(dong)。應(ying)在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保樣品均勻(yun)地充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

雞(ji)腺病(bing)毒抗原(yuan)(ADV-Ag)elisa試劑盒

操作(zuo)步驟(zhou)：

1、使(shi)用(yong)前(qian)，將(jiang)所有試劑充(chong)分(fen)混勻(yun)。不要使液(ye)體(ti)產生大量(liang)的(de)泡沫，以(yi)免加樣時加(jia)入大量(liang)的(de)氣(qi)泡，產生加(jia)樣(yang)上(shang)的(de)誤(wu)差(cha)。

2、根據待(dai)測樣(yang)品數量(liang)加(jia)上(shang)標準(zhun)品的(de)數量(liang)決定所需的(de)板(ban)條(tiao)數。每個(ge)標準(zhun)品和(he)空(kong)白孔(kong)建(jian)議(yi)做復孔。每個(ge)樣(yang)品根據自己(ji)的(de)數量(liang)來定，能使用(yong)復(fu)孔的(de)盡量做復孔。

3、加(jia)入(ru)稀釋好(hao)後的(de)標準(zhun)品50ul於反(fan)應(ying)孔、加(jia)入(ru)待(dai)測樣(yang)品50ul於反(fan)應(ying)孔內(nei)。立即加(jia)入(ru)50ul標記(ji)的(de)抗體(ti)。蓋上(shang)膜(mo)板(ban)，輕輕振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育(yu)45分(fen)鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體(ti)，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液(ye)，用(yong)吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復此(ci)操作(zuo)4次。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次。

5、每孔加(jia)入100ul的(de)親(qin)和(he)鏈酶素-HRP，輕輕振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體(ti)，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液(ye)，用(yong)吸水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復此(ci)操作(zuo)4次。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次。

7、每孔加(jia)入底物(wu)A、B各(ge)50ul，輕輕振蕩(dang)混勻(yun)，37℃溫育(yu)5分(fen)鐘(zhong)。避(bi)免光照(zhao)。

8、取(qu)出(chu)酶標板(ban)，迅(xun)速(su)加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液，加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液後(hou)應(ying)立即測(ce)定結果(guo)。

9、在(zai)450nm波(bo)長(chang)處測(ce)定各(ge)孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

操作(zuo)註意(yi)事項(xiang)：

1、試劑應(ying)按標簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲存，使用(yong)前(qian)恢復到(dao)室溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後(hou)的(de)標準(zhun)品應(ying)丟棄(qi)，不(bu)可(ke)保(bao)存

2、實(shi)驗中(zhong)不用(yong)的(de)板(ban)條(tiao)應(ying)立即放回包(bao)裝袋(dai)中，密封保(bao)存，以(yi)免變質。

3、不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它試劑應(ying)包裝好(hao)或蓋好(hao)。不同批號(hao)的(de)試劑不要混用(yong)。保(bao)質前(qian)使(shi)用(yong)。

4、使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)吸頭(tou)以(yi)免交叉汙染(ran)，吸取(qu)終(zhong)止(zhi)液和(he)底物(wu)A、B液(ye)時，避(bi)免使用(yong)帶(dai)金屬(shu)部(bu)分(fen)的(de)加樣器(qi)。

5、使(shi)用(yong)幹(gan)凈的(de)塑料(liao)容(rong)器(qi)配置洗(xi)滌(di)液(ye)。使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)混勻(yun)試劑盒裏(li)的(de)各(ge)種(zhong)成(cheng)份及樣品。

6、底物(wu)A應(ying)揮(hui)發，避免長(chang)時間(jian)打(da)開(kai)蓋子。底物(wu)B對(dui)光敏感，避(bi)免長(chang)時間(jian)暴(bao)露於(yu)光下。避(bi)免用(yong)手接觸(chu)，有毒。實(shi)驗完成(cheng)後應(ying)立即讀(du)取(qu)OD值(zhi)。

7、加(jia)入(ru)試劑的(de)順序應(ying)壹致(zhi)，以(yi)保證(zheng)所有反應(ying)板(ban)孔溫育(yu)的(de)時間(jian)壹樣(yang)。按照(zhao)說明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時間(jian)、加液(ye)的(de)量及順序進(jin)行(xing)溫育(yu)操作(zuo)。

壹(yi)般(ban)來講(jiang)，96T能(neng)檢(jian)測90個(ge)樣(yang)本，48T能(neng)檢(jian)測(ce)42個(ge)樣(yang)本，這裏(li)面(mian)需(xu)要用(yong)標樣(yang)來做標準(zhun)曲(qu)線，所(suo)以(yi)各(ge)位(wei)需要做實(shi)驗的(de)老(lao)師(shi)們(men)，請(qing)在(zai)購買ELISA試劑盒的(de)時候(hou)註(zhu)意，需(xu)要做多(duo)少個(ge)樣(yang)本，在(zai)決定買多(duo)大規格(ge)的(de)試劑盒，以(yi)免做實(shi)驗時出(chu)現試劑盒不(bu)夠(gou)用(yong)或(huo)者浪費(fei)！

原(yuan)理(li)：將(jiang)特異性抗(kang)體(ti)包(bao)被於(yu)固相(xiang)載體(ti)表面，經洗(xi)滌(di)後(hou)分(fen)成(cheng)兩組(zu)：壹組(zu)加酶標記(ji)抗原和(he)被測(ce)抗原的(de)混合液，另(ling)壹(yi)組(zu)只加酶標記(ji)抗原，經孵(fu)育(yu)洗(xi)滌(di)後(hou)加(jia)底物(wu)顯(xian)色，這兩組(zu)底物(wu)降(jiang)解(jie)量之差(cha)，即為所要測定的(de)未(wei)知抗原的(de)量。

大豆(dou)脂肪(fang)氧化(hua)酶3(LOX3)elisa檢(jian)測(ce)試劑盒

大豆(dou)β-乳球蛋(dan)白(bai)(β-LG)elisa檢測試劑盒

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對(dui)蝦(xia)肝腸孢(bao)蟲(chong)(EHP)elisa檢測試劑盒

對(dui)蝦(xia)白(bai)斑病(bing)毒(WSSV)elisa檢測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)黃(huang)頭(tou)病(bing)毒(YHV)elisa檢測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)甲殼動物(wu)高(gao)血糖(tang)激素(CHH)elisa檢測試劑盒

對(dui)蝦(xia)法尼酸甲基(ji)轉移酶(FA-O-MeT)elisa檢(jian)測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)多(duo)巴脫(tuo)羧酶(DOPA)elisa檢(jian)測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)中(zhong)過(guo)敏原原(yuan)肌球(qiu)蛋(dan)白(bai)(AIA)elisa檢測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)鳥(niao)苷酸(GMP)elisa檢測試劑盒

對(dui)蝦(xia)白(bai)斑癥(zheng)病(bing)毒(WSV)elisa檢測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)白(bai)斑病(bing)毒VP28(WSSVVP28)elisa檢測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)錨蛋白(ankyrin)elisa檢(jian)測(ce)試劑盒

對(dui)蝦(xia)氨基(ji)吡(bi)啉-N-脫(tuo)甲基(ji)酶(ARND)elisa檢(jian)測(ce)試劑盒

蜂(feng)蜜甘(gan)露糖(tang)(Mannose)elisa檢測(ce)試劑盒