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        1. 產(chan)品中(zhong)心/ products

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          ELISA法是(shi)免疫(yi)診(zhen)斷中(zhong)的壹項(xiang)新技(ji)術(shu),現已(yi)成(cheng)功地應(ying)用(yong)於多(duo)種(zhong)病(bing)原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起的傳染(ran)病、寄(ji)生蟲病及非(fei)傳染(ran)病等方(fang)面的免疫(yi)診(zhen)斷。也(ye)已應(ying)用(yong)於大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)和(he)小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)的定(ding)量測(ce)定(ding),根(gen)據(ju)已(yi)經使用(yong)的結果,認為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏(min)、特異(yi)、簡單(dan)、快(kuai)速(su)、穩(wen)定(ding)及易(yi)於自動(dong)化操作等特點(dian)。不僅(jin)適用(yong)於臨床(chuang)標本的檢查(zha),而(er)且(qie)由於壹天之內可(ke)以檢查(zha)幾百(bai)甚(shen)至上千(qian)份(fen)標(biao)本,因此,也適合於血(xue)清流行病學(xue)調查(zha)。本法不(bu)僅可(ke)以用(yong)來(lai)測(ce)定(ding)ti,而(er)且(qie)也可(ke)用(yong)於測(ce)定(ding)體(ti)液中(zhong)的循(xun)環抗原,所以(yi)也(ye)是(shi)壹種(zhong)早(zao)期診(zhen)斷的良(liang)好方法。因此ELISA法在(zai)生物醫(yi)學(xue)各領(ling)域的應(ying)用(yong)範(fan)圍日益擴(kuo)大(da),

          組(zu)成(cheng)結構(gou)

          1、血(xue)清:操作過程中避(bi)免任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺激。使用(yong)不含(han)熱(re)原和(he)內du素(su)的試(shi)管(guan)。收集血(xue)液(ye)後(hou),1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小心地分(fen)離(li)。

          2、2、血(xue)漿:EDTA、檸檬suan鹽、肝(gan)素(su)血(xue)漿可(ke)用(yong)於檢測(ce)。1000×g離(li)心30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)。

          3、細(xi)胞(bao)上清液:1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合(he)物。

          4、組(zu)織(zhi)勻漿:將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適量生理鹽水搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong),取(qu)上(shang)清液。

          5、保(bao)存:如(ru)果樣品不(bu)立即(ji)使用(yong),應(ying)將(jiang)其(qi)分(fen)成(cheng)小部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存,避(bi)免反復(fu)冷(leng)凍(dong)。盡(jin)可能(neng)的不(bu)要(yao)使用(yong)溶血(xue)。如(ru)果(guo)血(xue)清中大(da)量顆粒(li),檢測(ce)前(qian)先(xian)離心或過濾。不要(yao)在(zai)37℃或更高的溫(wen)度(du)加(jia)熱(re)解凍。應(ying)在(zai)室溫(wen)下解凍並確保(bao)樣品均(jun)勻地充分(fen)解(jie)凍(dong)。

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          土(tu)壤(rang)水(shui)解(jie)脫(tuo)氫(qing)酶(HDHO)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          操作步驟(zhou):

          1、使用(yong)前(qian),將(jiang)所有試(shi)劑(ji)充分(fen)混勻。不要(yao)使液體(ti)產(chan)生大(da)量的泡沫,以免加(jia)樣(yang)時加(jia)入(ru)大(da)量的氣泡,產(chan)生加(jia)樣(yang)上的誤差(cha)。

          2、根據(ju)待(dai)測(ce)樣(yang)品數(shu)量加(jia)上(shang)標準品的數(shu)量決(jue)定所(suo)需(xu)的板(ban)條數。每(mei)個(ge)標準品和(he)空(kong)白(bai)孔建(jian)議做復(fu)孔(kong)。每(mei)個(ge)樣品根(gen)據(ju)自己(ji)的數(shu)量來(lai)定(ding),能(neng)使用(yong)復(fu)孔(kong)的盡(jin)量做復(fu)孔(kong)。

          3、加(jia)入(ru)稀釋好後的標(biao)準品50ul於反應(ying)孔、加(jia)入(ru)待測(ce)樣(yang)品50ul於反應(ying)孔內。立即(ji)加(jia)入(ru)50ul標記的抗(kang)體(ti)。蓋上膜(mo)板(ban),輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分(fen)鐘(zhong)。

          4、甩去(qu)孔(kong)內液(ye)體(ti),每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗(xi)滌液(ye),用(yong)吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復(fu)此(ci)操作4次。如果(guo)用(yong)洗板機洗滌,洗(xi)滌次數增(zeng)加(jia)壹次。

          5、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100ul的親(qin)和(he)鏈(lian)酶素(su)-HRP,輕(qing)輕振蕩混勻,37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。

          6、甩去(qu)孔(kong)內液(ye)體(ti),每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye),振蕩30秒,甩去(qu)洗(xi)滌液(ye),用(yong)吸(xi)水(shui)紙(zhi)拍(pai)幹(gan)。重復(fu)此(ci)操作4次。如果(guo)用(yong)洗板機洗滌,洗(xi)滌次數增(zeng)加(jia)壹次。

          7、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)底物A、B各(ge)50ul,輕(qing)輕振蕩混勻,37℃溫育5分(fen)鐘(zhong)。避(bi)免光(guang)照(zhao)。

          8、取出(chu)酶(mei)標(biao)板,迅(xun)速(su)加(jia)入(ru)50ul終止液(ye),加(jia)入(ru)終止液(ye)後(hou)應(ying)立即(ji)測(ce)定(ding)結果。

          9、在(zai)450nm波(bo)長(chang)處測(ce)定(ding)各(ge)孔(kong)的OD值(zhi)。

          操作註(zhu)意(yi)事項(xiang):

          1、試劑(ji)應(ying)按標(biao)簽(qian)說明(ming)書(shu)儲存,使用(yong)前(qian)恢(hui)復(fu)到室溫(wen)。稀稀過後(hou)的標(biao)準品應(ying)丟棄,不可保(bao)存

          2、實驗(yan)中(zhong)不(bu)用(yong)的板(ban)條應(ying)立即(ji)放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋中,密封保(bao)存,以(yi)免變質。

          3、不用(yong)的其(qi)它(ta)試(shi)劑(ji)應(ying)包(bao)裝(zhuang)好或蓋好。不同(tong)批(pi)號的試(shi)劑(ji)不(bu)要(yao)混用(yong)。保(bao)質前(qian)使用(yong)。

          4、使用(yong)壹次性(xing)的吸(xi)頭(tou)以(yi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran),吸(xi)取(qu)終(zhong)止液(ye)和(he)底物A、B液時,避(bi)免使用(yong)帶金屬部(bu)分(fen)的加(jia)樣(yang)器。

          5、使用(yong)幹(gan)凈(jing)的塑(su)料(liao)容器(qi)配置(zhi)洗(xi)滌液(ye)。使用(yong)前(qian)充分(fen)混勻試劑(ji)盒(he)裏的各(ge)種成(cheng)份(fen)及樣(yang)品。

          6、底物A應(ying)揮(hui)發,避(bi)免長(chang)時間(jian)打開蓋子。底(di)物B對(dui)光(guang)敏感(gan),避(bi)免長(chang)時間(jian)暴露於光下。避(bi)免用(yong)手接觸,有毒(du)。實驗(yan)完(wan)成(cheng)後(hou)應(ying)立即(ji)讀(du)取OD值。

          7、加(jia)入(ru)試劑(ji)的順序(xu)應(ying)壹致,以保(bao)證(zheng)所(suo)有反應(ying)板孔(kong)溫(wen)育的時間(jian)壹樣(yang)。按照說明(ming)書(shu)中標(biao)明的時間(jian)、加(jia)液(ye)的量及順序(xu)進行溫(wen)育操作。

          壹般(ban)來(lai)講(jiang),96T能(neng)檢測(ce)90個(ge)樣本,48T能(neng)檢測(ce)42個(ge)樣本,這裏面需(xu)要(yao)用(yong)標樣來(lai)做標準(zhun)曲線,所以各(ge)位(wei)需(xu)要(yao)做實驗(yan)的老(lao)師們,請(qing)在(zai)購(gou)買ELISA試劑(ji)盒(he)的時候(hou)註(zhu)意(yi),需(xu)要(yao)做多(duo)少(shao)個(ge)樣本,在(zai)決(jue)定買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的試(shi)劑(ji)盒(he),以免做實驗(yan)時出(chu)現試(shi)劑(ji)盒(he)不夠用(yong)或者(zhe)浪費(fei)!

          原理(li):將(jiang)特異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)於固相(xiang)載(zai)體(ti)表面,經洗滌後(hou)分(fen)成(cheng)兩(liang)組(zu):壹組(zu)加(jia)酶(mei)標記抗原(yuan)和(he)被(bei)測(ce)抗(kang)原(yuan)的混合(he)液(ye),另(ling)壹組(zu)只(zhi)加(jia)酶(mei)標記抗原(yuan),經(jing)孵(fu)育洗(xi)滌後(hou)加(jia)底(di)物顯色(se),這兩(liang)組(zu)底(di)物降(jiang)解(jie)量之差(cha),即(ji)為所(suo)要(yao)測(ce)定(ding)的未(wei)知抗原(yuan)的量。

          大(da)豆脂肪(fang)氧化酶3(LOX3)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          大(da)豆β-乳球(qiu)蛋(dan)白(bai)(β-LG)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          大(da)豆7S球蛋(dan)白(bai)(GLB7s)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)肝(gan)腸(chang)孢(bao)蟲(chong)(EHP)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)白(bai)斑病(bing)毒(du)(WSSV)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)黃頭(tou)病(bing)毒(du)(YHV)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)甲殼(ke)動(dong)物高血(xue)糖(tang)激(ji)素(su)(CHH)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)法尼(ni)酸(suan)甲基(ji)轉移(yi)酶(FA-O-MeT)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)多(duo)巴(ba)脫羧(suo)酶(DOPA)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)中過(guo)敏原原肌球蛋(dan)白(bai)(AIA)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)鳥苷(gan)酸(suan)(GMP)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)白(bai)斑癥(zheng)病毒(du)(WSV)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)白(bai)斑病(bing)毒(du)VP28(WSSVVP28)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)錨(mao)蛋(dan)白(bai)(ankyrin)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          對蝦(xia)氨基(ji)吡啉-N-脫甲(jia)基(ji)酶(ARND)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

          蜂蜜甘露糖(Mannose)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)













































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