微(wei)生(sheng)物(wu)檸(ning)檬(meng)酸(suan)水解酶(ACL)elisa檢測(ce)試劑盒

微(wei)生(sheng)物(wu)檸(ning)檬(meng)酸(suan)水解酶(ACL)elisa檢測(ce)試劑盒

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ELISA法是(shi)免(mian)疫診斷中的(de)壹(yi)項(xiang)新(xin)技術(shu)，現(xian)已(yi)成功地應用(yong)於(yu)多種病(bing)原微(wei)生(sheng)物(wu)所(suo)引(yin)起的(de)傳染(ran)病(bing)、寄生蟲病(bing)及非傳染(ran)病(bing)等(deng)方面(mian)的(de)免(mian)疫診斷。也已應用(yong)於(yu)大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原和小分(fen)子(zi)抗(kang)原的(de)定量(liang)測(ce)定，根(gen)據(ju)已(yi)經使用(yong)的(de)結果，認為ELISA法具(ju)有(you)靈(ling)敏、特(te)異(yi)、簡(jian)單、快(kuai)速、穩定及易於(yu)自動化(hua)操作等(deng)特點。不(bu)僅適(shi)用(yong)於(yu)臨床標本的(de)檢查(zha)，而(er)且(qie)由(you)於(yu)壹(yi)天(tian)之內可以檢查(zha)幾百甚(shen)至(zhi)上千(qian)份(fen)標本(ben),因此(ci)，也適合(he)於血(xue)清流(liu)行病(bing)學(xue)調查。本法不(bu)僅可以用(yong)來(lai)測(ce)定抗(kang)ti，而(er)且(qie)也可用(yong)於(yu)測(ce)定體(ti)液中的(de)循環抗(kang)原，所以也是(shi)壹(yi)種(zhong)早期診斷的(de)良好方(fang)法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物(wu)醫(yi)學(xue)各領域(yu)的(de)應用(yong)範(fan)圍(wei)日(ri)益擴大(da)，

組成結構(gou)

1、血(xue)清：操作過程中避免(mian)任何細(xi)胞刺激。使用(yong)不(bu)含熱(re)原和內du素(su)的(de)試管。收(shou)集血(xue)液後，1000×g離(li)心10分鐘將(jiang)血(xue)紅細胞迅(xun)速小心地分離。

2、2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽、肝素血(xue)漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢測(ce)。1000×g離心30分鐘去(qu)除顆粒。

3、細(xi)胞上清液：1000×g離心10分鐘去(qu)除顆粒和聚合(he)物(wu)。

4、組織勻漿(jiang)：將(jiang)組織加(jia)入(ru)適量(liang)生(sheng)理(li)鹽水搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心10分鐘，取上清液。

5、保(bao)存(cun)：如果樣品不(bu)立(li)即使用(yong)，應將(jiang)其(qi)分(fen)成小部分(fen)-70℃保(bao)存(cun)，避免(mian)反復冷凍(dong)。盡可能的(de)不(bu)要使用(yong)溶(rong)血(xue)。如果血(xue)清中大(da)量(liang)顆(ke)粒(li)，檢測(ce)前先(xian)離(li)心或(huo)過(guo)濾(lv)。不(bu)要在37℃或(huo)更高的(de)溫度(du)加(jia)熱解(jie)凍(dong)。應在室(shi)溫下(xia)解凍並確(que)保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地充分解(jie)凍(dong)。

微(wei)生(sheng)物(wu)檸(ning)檬(meng)酸(suan)水解酶(ACL)elisa檢測(ce)試劑盒

操作步驟(zhou)：

1、使用(yong)前(qian)，將(jiang)所有(you)試劑充(chong)分(fen)混(hun)勻。不(bu)要使液體(ti)產生(sheng)大(da)量(liang)的(de)泡沫(mo)，以免(mian)加(jia)樣時加(jia)入(ru)大(da)量(liang)的(de)氣(qi)泡(pao)，產生加(jia)樣上的(de)誤差(cha)。

2、根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)樣品數(shu)量(liang)加(jia)上標準(zhun)品的(de)數(shu)量(liang)決(jue)定(ding)所(suo)需的(de)板(ban)條數(shu)。每個(ge)標準品和空白孔建議(yi)做(zuo)復孔。每個(ge)樣品根據(ju)自(zi)己的(de)數(shu)量(liang)來(lai)定(ding)，能使用(yong)復孔的(de)盡量(liang)做(zuo)復孔。

3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好後的(de)標準(zhun)品50ul於反應孔、加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)樣品50ul於反應孔內。立(li)即加(jia)入(ru)50ul標記(ji)的(de)抗(kang)體(ti)。蓋上膜(mo)板(ban)，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育45分鐘。

4、甩(shuai)去(qu)孔(kong)內液體(ti)，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液，振(zhen)蕩30秒(miao)，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液，用(yong)吸(xi)水(shui)紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復此(ci)操作4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌，洗滌次數(shu)增加(jia)壹(yi)次。

5、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100ul的(de)親和鏈酶(mei)素(su)-HRP，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育30分鐘。

6、甩(shuai)去(qu)孔(kong)內液體(ti)，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液，振(zhen)蕩30秒(miao)，甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液，用(yong)吸(xi)水(shui)紙拍(pai)幹(gan)。重(zhong)復此(ci)操作4次。如果用(yong)洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌，洗滌次數(shu)增加(jia)壹(yi)次。

7、每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)底物(wu)A、B各(ge)50ul，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混(hun)勻，37℃溫(wen)育5分鐘。避免(mian)光照。

8、取(qu)出(chu)酶標(biao)板(ban)，迅(xun)速加(jia)入(ru)50ul終止液，加(jia)入(ru)終止液後應立(li)即測(ce)定結果。

9、在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測(ce)定各(ge)孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

操作註意(yi)事項：

1、試劑應按標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲存(cun)，使用(yong)前(qian)恢復到室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後的(de)標準(zhun)品應丟棄(qi)，不(bu)可保(bao)存(cun)

2、實(shi)驗(yan)中不(bu)用(yong)的(de)板(ban)條應立(li)即放回包裝(zhuang)袋(dai)中，密封(feng)保(bao)存(cun)，以免(mian)變質(zhi)。

3、不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試劑應包裝(zhuang)好或(huo)蓋好。不(bu)同批號(hao)的(de)試劑不(bu)要混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前使用(yong)。

4、使用(yong)壹(yi)次性的(de)吸(xi)頭(tou)以免(mian)交叉(cha)汙(wu)染，吸(xi)取(qu)終止液和底物(wu)A、B液時，避(bi)免(mian)使用(yong)帶(dai)金屬部(bu)分(fen)的(de)加(jia)樣器(qi)。

5、使用(yong)幹(gan)凈的(de)塑(su)料容器(qi)配置洗滌液。使用(yong)前(qian)充分混(hun)勻試劑盒裏(li)的(de)各種(zhong)成份及樣品。

6、底物(wu)A應揮發(fa)，避(bi)免(mian)長(chang)時間打(da)開(kai)蓋子(zi)。底物(wu)B對(dui)光(guang)敏感，避(bi)免(mian)長(chang)時間暴露於(yu)光下(xia)。避免(mian)用(yong)手(shou)接觸，有(you)毒。實(shi)驗完成後應立(li)即讀取OD值(zhi)。

7、加(jia)入(ru)試劑的(de)順序(xu)應壹(yi)致(zhi)，以保(bao)證(zheng)所(suo)有(you)反(fan)應板(ban)孔溫(wen)育的(de)時間壹(yi)樣(yang)。按照說明(ming)書中標明(ming)的(de)時間、加(jia)液的(de)量(liang)及順序(xu)進(jin)行溫(wen)育操作。

壹(yi)般(ban)來(lai)講，96T能檢測(ce)90個(ge)樣本，48T能檢測(ce)42個(ge)樣本，這裏(li)面需要用(yong)標(biao)樣來(lai)做(zuo)標準曲(qu)線(xian)，所(suo)以各位(wei)需要做實(shi)驗的(de)老(lao)師們(men)，請在(zai)購(gou)買(mai)ELISA試劑盒的(de)時候註(zhu)意(yi)，需要做多(duo)少個(ge)樣本，在(zai)決(jue)定買(mai)多大(da)規(gui)格(ge)的(de)試劑盒，以免(mian)做實(shi)驗(yan)時出(chu)現試劑盒不(bu)夠用(yong)或(huo)者浪(lang)費！

原理：將(jiang)特異(yi)性抗(kang)體(ti)包被(bei)於固相載體(ti)表面(mian)，經洗(xi)滌後分(fen)成兩(liang)組：壹(yi)組加(jia)酶標(biao)記(ji)抗(kang)原和被(bei)測(ce)抗(kang)原的(de)混(hun)合(he)液，另壹(yi)組只(zhi)加(jia)酶標(biao)記(ji)抗(kang)原，經孵(fu)育洗滌後加(jia)底物(wu)顯(xian)色，這兩(liang)組底物(wu)降解(jie)量(liang)之(zhi)差(cha)，即為所(suo)要測(ce)定的(de)未知(zhi)抗(kang)原的(de)量(liang)。

蘋(ping)果花葉(ye)病(bing)毒(APMV)elisa檢測(ce)試劑盒

蘋(ping)果褪(tui)綠(lv)葉(ye)斑(ban)病(bing)毒(ACLSV)elisa檢測(ce)試劑盒

蘋(ping)果莖(jing)溝(gou)病(bing)毒(ASGV)elisa檢測(ce)試劑盒

蘋(ping)果銹果(guo)類(lei)病(bing)毒(ASSVd)elisa檢測(ce)試劑盒

蘋(ping)果莖(jing)痘病(bing)毒(ASPV)elisa檢測(ce)試劑盒

禽(qin)牛結核(Mycobacterium bovis)elisa檢測(ce)試劑盒

蛇蛇毒因(yin)子(zi)(CVF)elisa檢測(ce)試劑盒

樹鼩Ⅰ型(xing)膠原交聯(lian)羧基(ji)端(duan)肽(CTXI)elisa檢測(ce)試劑盒

樹鼩盤(pan)狀(zhuang)結構(gou)域(yu)受(shou)體(ti)家(jia)族成員2(DDR2)elisa檢測(ce)試劑盒

樹鼩乙型(xing)肝炎(yan)E抗(kang)原(HBeAg)elisa檢測(ce)試劑盒

水貂幹擾(rao)素(su)R(IFN-r)elisa檢測(ce)試劑盒

水牛乳(ru)糖(tang)酶(mei)(Lactase)elisa檢測(ce)試劑盒

水牛酪蛋(dan)白αs1(CSN1S1)elisa檢測(ce)試劑盒

梭子(zi)蟹(xie)卵(luan)黃(huang)蛋白(Vn)elisa檢測(ce)試劑盒

土壤脫(tuo)氫酶(mei)(DHO)elisa檢測(ce)試劑盒

土壤脲(niao)酶(UE)elisa檢測(ce)試劑盒

土壤核(he)酮(tong)糖(tang)-1,5-二(er)磷(lin)酸(suan)羧化(hua)酶(mei)(Rubisco)elisa檢測(ce)試劑盒

土壤GABA合(he)成酶(GABA-S)elisa檢測(ce)試劑盒

土壤水(shui)解脫(tuo)氫(qing)酶(mei)(HDHO)elisa檢測(ce)試劑盒