微生物果(guo)膠(jiao)酶(mei)(pectinase)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

微生物果(guo)膠(jiao)酶(mei)(pectinase)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

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ELISA法是(shi)免疫診(zhen)斷(duan)中(zhong)的(de)壹項新(xin)技(ji)術(shu)，現已(yi)成(cheng)功(gong)地應(ying)用於(yu)多種病(bing)原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起的傳染(ran)病(bing)、寄生蟲病(bing)及(ji)非(fei)傳染(ran)病(bing)等(deng)方面的(de)免疫診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應(ying)用於(yu)大(da)分子抗(kang)原(yuan)和小(xiao)分子抗(kang)原(yuan)的(de)定(ding)量測定(ding)，根(gen)據(ju)已(yi)經使用的(de)結(jie)果(guo)，認(ren)為ELISA法具(ju)有(you)靈敏、特(te)異、簡單(dan)、快速(su)、穩定(ding)及(ji)易於(yu)自動(dong)化(hua)操作(zuo)等(deng)特點(dian)。不僅(jin)適(shi)用於(yu)臨床(chuang)標本的(de)檢查(zha)，而(er)且由於(yu)壹天(tian)之內可以(yi)檢查(zha)幾百(bai)甚至上千(qian)份(fen)標本(ben),因(yin)此(ci)，也適(shi)合於(yu)血(xue)清流行病學(xue)調(tiao)查(zha)。本法(fa)不僅可以(yi)用來(lai)測定(ding)抗(kang)ti，而(er)且也(ye)可用於(yu)測定(ding)體(ti)液(ye)中(zhong)的(de)循(xun)環(huan)抗(kang)原(yuan)，所(suo)以(yi)也是(shi)壹種(zhong)早(zao)期診斷(duan)的良(liang)好(hao)方法。因(yin)此(ci)ELISA法在(zai)生物醫(yi)學(xue)各(ge)領(ling)域的應(ying)用範(fan)圍日益擴(kuo)大(da)，

組(zu)成(cheng)結(jie)構

1、血(xue)清：操作(zuo)過程中(zhong)避免任何細胞刺激。使用不(bu)含(han)熱原(yuan)和內du素(su)的(de)試(shi)管(guan)。收集血(xue)液(ye)後，1000×g離心(xin)10分鐘將血(xue)紅細胞迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地分離。

2、2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)suan鹽、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可用於(yu)檢測。1000×g離(li)心(xin)30分鐘去(qu)除(chu)顆粒。

3、細胞上清(qing)液(ye)：1000×g離心(xin)10分鐘去(qu)除(chu)顆粒和聚合物。

4、組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽水(shui)搗(dao)碎。1000×g離(li)心10分鐘，取(qu)上清(qing)液(ye)。

5、保存(cun)：如果(guo)樣(yang)品(pin)不(bu)立(li)即使用，應(ying)將其(qi)分成(cheng)小(xiao)部(bu)分-70℃保存(cun)，避免反(fan)復(fu)冷(leng)凍(dong)。盡可能的不(bu)要使用溶(rong)血(xue)。如果(guo)血(xue)清中(zhong)大(da)量顆粒，檢測前(qian)先離(li)心(xin)或過濾(lv)。不要在37℃或更(geng)高的溫度(du)加(jia)熱解(jie)凍(dong)。應在室(shi)溫下解(jie)凍(dong)並確(que)保樣品均勻地充(chong)分解(jie)凍(dong)。

微生物果(guo)膠(jiao)酶(mei)(pectinase)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)：

1、使(shi)用前(qian)，將所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)充分混勻。不要使液(ye)體(ti)產生大(da)量的泡(pao)沫(mo)，以(yi)免加(jia)樣時加(jia)入(ru)大(da)量的氣泡(pao)，產生加(jia)樣上的(de)誤差(cha)。

2、根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)樣(yang)品數量加(jia)上標(biao)準品(pin)的(de)數量決定(ding)所(suo)需(xu)的板(ban)條數。每(mei)個(ge)標準(zhun)品和空白(bai)孔建(jian)議做復(fu)孔。每(mei)個(ge)樣品(pin)根(gen)據(ju)自(zi)己的(de)數量來(lai)定(ding)，能使用復(fu)孔的(de)盡(jin)量做復(fu)孔。

3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋好(hao)後的標(biao)準品(pin)50ul於(yu)反(fan)應孔、加(jia)入(ru)待(dai)測(ce)樣品50ul於(yu)反(fan)應孔內。立(li)即加(jia)入(ru)50ul標(biao)記的(de)抗(kang)體(ti)。蓋上膜(mo)板，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩混勻，37℃溫育45分鐘。

4、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體(ti)，每孔加(jia)滿洗滌(di)液(ye)，振(zhen)蕩30秒，甩(shuai)去(qu)洗滌(di)液(ye)，用吸(xi)水紙(zhi)拍幹(gan)。重(zhong)復(fu)此(ci)操作(zuo)4次(ci)。如(ru)果(guo)用洗板(ban)機洗滌(di)，洗滌(di)次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次(ci)。

5、每(mei)孔加(jia)入(ru)100ul的(de)親(qin)和鏈酶(mei)素(su)-HRP，輕輕振(zhen)蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體(ti)，每孔加(jia)滿洗滌(di)液(ye)，振(zhen)蕩30秒，甩(shuai)去(qu)洗滌(di)液(ye)，用吸(xi)水紙(zhi)拍幹(gan)。重(zhong)復(fu)此(ci)操作(zuo)4次(ci)。如(ru)果(guo)用洗板(ban)機洗滌(di)，洗滌(di)次(ci)數增(zeng)加(jia)壹次(ci)。

7、每(mei)孔加(jia)入(ru)底物A、B各(ge)50ul，輕(qing)輕振(zhen)蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照(zhao)。

8、取(qu)出(chu)酶標(biao)板，迅(xun)速(su)加(jia)入(ru)50ul終止(zhi)液(ye)，加(jia)入(ru)終止(zhi)液(ye)後應立(li)即測定(ding)結(jie)果(guo)。

9、在(zai)450nm波(bo)長處測(ce)定(ding)各(ge)孔的(de)OD值(zhi)。

操(cao)作(zuo)註意(yi)事項：

1、試(shi)劑(ji)應按標(biao)簽(qian)說明書(shu)儲存(cun)，使用前(qian)恢復(fu)到(dao)室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後的標(biao)準品(pin)應(ying)丟(diu)棄，不(bu)可保存(cun)

2、實(shi)驗中(zhong)不(bu)用的(de)板(ban)條應立(li)即放回包(bao)裝袋(dai)中(zhong)，密(mi)封保存(cun)，以(yi)免變質(zhi)。

3、不(bu)用的(de)其(qi)它試(shi)劑(ji)應包(bao)裝好(hao)或蓋好。不(bu)同(tong)批號(hao)的試(shi)劑(ji)不要混用。保(bao)質(zhi)前(qian)使用。

4、使(shi)用壹次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭以(yi)免交叉(cha)汙(wu)染，吸(xi)取終止(zhi)液(ye)和底物A、B液(ye)時，避免使用帶(dai)金(jin)屬部分的加(jia)樣器。

5、使(shi)用幹(gan)凈(jing)的塑(su)料(liao)容器配置(zhi)洗滌(di)液(ye)。使用前(qian)充分混勻試(shi)劑(ji)盒裏的各(ge)種成(cheng)份(fen)及樣(yang)品。

6、底物A應(ying)揮(hui)發，避免長時(shi)間(jian)打開(kai)蓋子。底物B對光(guang)敏感(gan)，避免長時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光下。避免用手(shou)接(jie)觸，有(you)毒。實(shi)驗完(wan)成(cheng)後應立(li)即讀(du)取(qu)OD值(zhi)。

7、加(jia)入(ru)試(shi)劑(ji)的順(shun)序應(ying)壹致(zhi)，以(yi)保證所(suo)有(you)反(fan)應板(ban)孔溫育的時間(jian)壹樣(yang)。按(an)照(zhao)說明書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加(jia)液(ye)的量及順(shun)序進(jin)行溫育操作(zuo)。

壹般來(lai)講，96T能檢測(ce)90個(ge)樣本，48T能檢測(ce)42個(ge)樣本，這(zhe)裏面需(xu)要用標(biao)樣(yang)來(lai)做標準曲(qu)線(xian)，所(suo)以(yi)各位(wei)需(xu)要做實驗的老師們，請在購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒的時(shi)候(hou)註(zhu)意(yi)，需(xu)要做多少個(ge)樣(yang)本(ben)，在(zai)決定(ding)買(mai)多(duo)大(da)規(gui)格(ge)的(de)試(shi)劑(ji)盒，以(yi)免做實驗時出現試(shi)劑(ji)盒不夠(gou)用或者(zhe)浪(lang)費(fei)！

原(yuan)理(li)：將特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)包(bao)被於(yu)固相(xiang)載(zai)體(ti)表面，經洗滌(di)後分成(cheng)兩組(zu)：壹組(zu)加(jia)酶標記抗(kang)原(yuan)和被測抗(kang)原(yuan)的(de)混合液(ye)，另(ling)壹組(zu)只加(jia)酶標記抗(kang)原(yuan)，經孵育洗滌(di)後加(jia)底物顯(xian)色(se)，這(zhe)兩組(zu)底物降解(jie)量之差(cha)，即為所要測定(ding)的(de)未(wei)知抗(kang)原(yuan)的(de)量。

蘋果(guo)花(hua)葉(ye)病毒(APMV)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

蘋果(guo)褪綠(lv)葉(ye)斑病毒(ACLSV)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

蘋果(guo)莖(jing)溝(gou)病(bing)毒(ASGV)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

蘋果(guo)銹(xiu)果(guo)類病毒(ASSVd)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

蘋果(guo)莖(jing)痘(dou)病(bing)毒(ASPV)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

禽(qin)牛(niu)結(jie)核(Mycobacterium bovis)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

蛇蛇(she)毒因(yin)子(CVF)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

樹鼩Ⅰ型(xing)膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯羧(suo)基(ji)端肽(tai)(CTXI)elisa檢測試(shi)劑(ji)盒

樹鼩盤狀(zhuang)結(jie)構域受(shou)體(ti)家族(zu)成(cheng)員(yuan)2(DDR2)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

樹鼩乙型(xing)肝(gan)炎(yan)E抗(kang)原(yuan)(HBeAg)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

水貂(diao)幹擾素(su)R(IFN-r)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

水牛(niu)乳(ru)糖(tang)酶(mei)(Lactase)elisa檢測試(shi)劑(ji)盒

水牛(niu)酪(lao)蛋白(bai)αs1(CSN1S1)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

梭子蟹(xie)卵黃蛋白(bai)(Vn)elisa檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒

土(tu)壤脫(tuo)氫酶(mei)(DHO)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

土(tu)壤脲(niao)酶(mei)(UE)elisa檢測試(shi)劑(ji)盒

土(tu)壤核(he)酮(tong)糖(tang)-1,5-二(er)磷(lin)酸羧化酶(Rubisco)elisa檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒

土(tu)壤GABA合成(cheng)酶(mei)(GABA-S)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒

土(tu)壤水(shui)解(jie)脫(tuo)氫酶(mei)(HDHO)elisa檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒