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          微生物氨甲基轉移酶(mei)(AMT)elisa檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

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          ELISA法是(shi)免疫診斷(duan)中的壹(yi)項(xiang)新(xin)技(ji)術,現(xian)已(yi)成(cheng)功(gong)地應用(yong)於(yu)多種病(bing)原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起的(de)傳染病、寄生蟲病及(ji)非傳染病等(deng)方(fang)面的(de)免疫診斷(duan)。也(ye)已(yi)應用(yong)於(yu)大分子(zi)抗原(yuan)和小(xiao)分子(zi)抗原(yuan)的定(ding)量(liang)測定(ding),根據(ju)已(yi)經使(shi)用(yong)的結(jie)果(guo),認為ELISA法具(ju)有(you)靈(ling)敏、特異、簡單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定(ding)及(ji)易(yi)於(yu)自動化操(cao)作(zuo)等(deng)特(te)點(dian)。不(bu)僅適(shi)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)標本的(de)檢查(zha),而且(qie)由於(yu)壹(yi)天之內(nei)可以(yi)檢查(zha)幾百(bai)甚(shen)至(zhi)上千份(fen)標本,因此(ci),也(ye)適(shi)合於(yu)血(xue)清(qing)流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查(zha)。本法(fa)不(bu)僅可(ke)以(yi)用(yong)來(lai)測定(ding)ti,而且(qie)也(ye)可(ke)用(yong)於(yu)測定(ding)體液中(zhong)的循環抗原(yuan),所(suo)以(yi)也(ye)是(shi)壹(yi)種早期診斷(duan)的良(liang)好方(fang)法。因(yin)此ELISA法在(zai)生物醫(yi)學(xue)各領域的應用(yong)範圍日(ri)益(yi)擴(kuo)大,

          組(zu)成(cheng)結(jie)構

          1、血(xue)清(qing):操(cao)作(zuo)過(guo)程中避(bi)免任何(he)細胞(bao)刺激(ji)。使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱原(yuan)和內(nei)du素(su)的試管(guan)。收集血(xue)液後(hou),1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)紅細(xi)胞迅速小(xiao)心(xin)地(di)分離(li)。

          2、2、血(xue)漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可(ke)用(yong)於(yu)檢測。1000×g離(li)心(xin)30分鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒(li)。

          3、細胞上清液:1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物。

          4、組(zu)織(zhi)勻漿(jiang):將(jiang)組(zu)織(zhi)加入適量(liang)生理鹽(yan)水(shui)搗碎。1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong),取上清液。

          5、保(bao)存:如果(guo)樣品不(bu)立(li)即使(shi)用(yong),應將(jiang)其分成(cheng)小部(bu)分-70℃保存,避免反復(fu)冷凍(dong)。盡(jin)可能的(de)不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶血(xue)。如(ru)果(guo)血(xue)清(qing)中(zhong)大量(liang)顆(ke)粒(li),檢測前先(xian)離(li)心(xin)或(huo)過(guo)濾。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或(huo)更高的溫度加(jia)熱解凍。應在(zai)室(shi)溫下解凍(dong)並確保(bao)樣(yang)品均勻(yun)地(di)充(chong)分解凍。

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          微(wei)生物氨甲基轉移酶(mei)(AMT)elisa檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

          操(cao)作(zuo)步驟:

          1、使(shi)用(yong)前,將(jiang)所(suo)有(you)試劑(ji)充(chong)分混勻(yun)。不(bu)要(yao)使(shi)液體(ti)產生大量(liang)的泡沫(mo),以免加樣時加(jia)入(ru)大量(liang)的氣(qi)泡,產(chan)生加樣上的誤(wu)差(cha)。

          2、根(gen)據待測(ce)樣(yang)品數(shu)量(liang)加上標準品的數(shu)量(liang)決(jue)定(ding)所(suo)需(xu)的(de)板(ban)條(tiao)數(shu)。每個標準品和空(kong)白(bai)孔(kong)建議(yi)做復(fu)孔(kong)。每個樣品根據(ju)自己的(de)數(shu)量(liang)來(lai)定(ding),能使(shi)用(yong)復(fu)孔(kong)的盡(jin)量(liang)做復(fu)孔(kong)。

          3、加(jia)入稀釋好(hao)後(hou)的(de)標準品50ul於(yu)反應孔(kong)、加入待測(ce)樣(yang)品50ul於(yu)反應孔(kong)內。立(li)即加(jia)入50ul標記(ji)的(de)抗體。蓋上膜(mo)板(ban),輕(qing)輕(qing)振蕩混勻(yun),37℃溫育(yu)45分鐘(zhong)。

          4、甩(shuai)去孔(kong)內液體(ti),每孔(kong)加滿洗(xi)滌液,振蕩30秒,甩去洗(xi)滌液,用(yong)吸水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操(cao)作(zuo)4次。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌,洗(xi)滌次數(shu)增加壹(yi)次。

          5、每(mei)孔(kong)加入100ul的親(qin)和鏈(lian)酶(mei)素(su)-HRP,輕(qing)輕振蕩混勻(yun),37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。

          6、甩(shuai)去孔(kong)內液體(ti),每孔(kong)加滿洗(xi)滌液,振蕩30秒,甩去洗(xi)滌液,用(yong)吸水(shui)紙(zhi)拍幹。重(zhong)復(fu)此操(cao)作(zuo)4次。如(ru)果(guo)用(yong)洗(xi)板(ban)機(ji)洗(xi)滌,洗(xi)滌次數(shu)增加壹(yi)次。

          7、每(mei)孔(kong)加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻(yun),37℃溫育(yu)5分鐘(zhong)。避免光照(zhao)。

          8、取出(chu)酶標板(ban),迅速加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液,加(jia)入終止(zhi)液後(hou)應立(li)即測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)。

          9、在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測(ce)定(ding)各孔(kong)的OD值。

          操(cao)作(zuo)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang):

          1、試劑(ji)應按(an)標簽(qian)說明書(shu)儲(chu)存,使(shi)用(yong)前恢復(fu)到室(shi)溫。稀稀過(guo)後的標準品應丟棄,不(bu)可保(bao)存

          2、實(shi)驗(yan)中不(bu)用(yong)的板(ban)條(tiao)應立(li)即放(fang)回(hui)包(bao)裝(zhuang)袋(dai)中(zhong),密封(feng)保(bao)存,以免變質(zhi)。

          3、不(bu)用(yong)的其(qi)它(ta)試劑(ji)應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋好。不(bu)同批(pi)號的(de)試劑(ji)不(bu)要(yao)混用(yong)。保質(zhi)前(qian)使(shi)用(yong)。

          4、使(shi)用(yong)壹(yi)次性的(de)吸頭(tou)以免交叉汙(wu)染,吸取終止(zhi)液和底物A、B液時,避(bi)免使(shi)用(yong)帶金(jin)屬(shu)部(bu)分的加樣(yang)器。

          5、使(shi)用(yong)幹凈(jing)的(de)塑料容器配(pei)置(zhi)洗(xi)滌液。使(shi)用(yong)前充(chong)分混勻(yun)試劑(ji)盒(he)裏的各種成(cheng)份(fen)及(ji)樣品。

          6、底物A應揮(hui)發,避免長(chang)時間打開蓋子(zi)。底物B對(dui)光(guang)敏感,避免長(chang)時間暴露於(yu)光下。避免用(yong)手接觸,有(you)毒。實驗(yan)完成(cheng)後應立(li)即讀取OD值。

          7、加(jia)入試劑(ji)的(de)順(shun)序(xu)應壹(yi)致,以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)有(you)反應板(ban)孔(kong)溫育(yu)的(de)時間壹(yi)樣(yang)。按(an)照(zhao)說明書(shu)中(zhong)標明的(de)時間、加液的(de)量(liang)及(ji)順(shun)序(xu)進行溫育(yu)操(cao)作(zuo)。

          壹(yi)般來(lai)講,96T能(neng)檢測90個樣本,48T能(neng)檢測42個樣本,這(zhe)裏面需(xu)要(yao)用(yong)標樣(yang)來(lai)做標準曲(qu)線,所(suo)以(yi)各位需(xu)要(yao)做實(shi)驗(yan)的老師們(men),請(qing)在(zai)購買ELISA試劑(ji)盒(he)的時候註(zhu)意(yi),需(xu)要(yao)做多(duo)少(shao)個樣本,在(zai)決(jue)定(ding)買多(duo)大規(gui)格(ge)的(de)試劑(ji)盒(he),以免做實驗(yan)時出(chu)現(xian)試劑(ji)盒(he)不(bu)夠用(yong)或者(zhe)浪(lang)費(fei)!

          原(yuan)理:將(jiang)特異(yi)性抗體包(bao)被於(yu)固(gu)相(xiang)載體(ti)表面,經洗(xi)滌後(hou)分成(cheng)兩組(zu):壹(yi)組(zu)加(jia)酶標記(ji)抗原(yuan)和被(bei)測(ce)抗原(yuan)的混合液,另壹(yi)組(zu)只(zhi)加酶(mei)標記(ji)抗原(yuan),經孵(fu)育(yu)洗(xi)滌後(hou)加(jia)底物顯色(se),這(zhe)兩組(zu)底物降解量(liang)之差(cha),即為所(suo)要(yao)測定(ding)的未(wei)知抗原(yuan)的量(liang)。

          小(xiao)鼠繁(fan)殖(zhi)與呼(hu)吸綜(zong)合征(zheng)病毒抗體(PRRSV-Ab)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠甘油三(san)酯(zhi)水(shui)解(jie)酶(TGH)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠幹擾(rao)素(su)誘(you)導鳥苷酸(suan)結(jie)合蛋白1(GBP1)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠黑(hei)素(su)皮質(zhi)素(su)受體4(MC4R)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠角化細(xi)胞內(nei)分泌(mi)因子(zi)(KAF)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠抗L型鈣通(tong)道(dao)蛋白(bai)抗體(Anti-CACH2)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠美(mei)金(jin)剛(gang)胺(Memantine)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠生長(chang)激(ji)素抑制(zhi)激(ji)素(GHIH)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠嗜(shi)酸(suan)粒細胞(bao)趨(qu)化蛋(dan)白Eotaxin 1(Eotaxin 1)elisa試劑(ji)盒(he)

          小鼠鼠泰(tai)澤(ze)病(bing)原(yuan)體(Tyzzer's Organism)elisa試劑(ji)盒(he)










































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