小鼠(shu)脂肪(fang)酸合成酶抑(yi)制劑(ji)(FASI)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)脂肪(fang)酸合成酶抑(yi)制劑(ji)(FASI)elisa試劑(ji)盒(he)

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ELISA法是(shi)免疫診(zhen)斷(duan)中的壹(yi)項(xiang)新技(ji)術(shu)，現(xian)已(yi)成(cheng)功地(di)應用於多(duo)種(zhong)病原(yuan)微生物(wu)所引起的傳(chuan)染(ran)病(bing)、寄(ji)生(sheng)蟲(chong)病及(ji)非(fei)傳染(ran)病(bing)等(deng)方(fang)面的免疫診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應用於大分子抗(kang)原(yuan)和小分(fen)子抗原(yuan)的定(ding)量(liang)測定(ding)，根(gen)據已(yi)經(jing)使用(yong)的結(jie)果，認(ren)為ELISA法具(ju)有靈(ling)敏(min)、特(te)異、簡(jian)單、快速(su)、穩定及易(yi)於自動化(hua)操作等特(te)點(dian)。不(bu)僅(jin)適用於臨床標(biao)本(ben)的檢(jian)查(zha)，而(er)且(qie)由於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可以檢查(zha)幾百甚至(zhi)上千份標本(ben),因此，也適合於血清(qing)流(liu)行病學調查(zha)。本(ben)法不(bu)僅(jin)可(ke)以(yi)用(yong)來(lai)測(ce)定抗ti，而(er)且(qie)也可用於測定(ding)體(ti)液(ye)中的循(xun)環抗原，所以也是壹(yi)種早期(qi)診(zhen)斷(duan)的良好方法(fa)。因(yin)此ELISA法在(zai)生(sheng)物(wu)醫學各(ge)領(ling)域(yu)的應用範圍日益(yi)擴(kuo)大，

組成(cheng)結(jie)構

1、血清(qing)：操作過程(cheng)中避免任何細(xi)胞(bao)刺激(ji)。使用(yong)不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內du素的試管(guan)。收集(ji)血液(ye)後(hou)，1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血紅細(xi)胞(bao)迅速(su)小心(xin)地(di)分離(li)。

2、2、血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血漿可(ke)用(yong)於檢測(ce)。1000×g離(li)心30分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒。

3、細(xi)胞(bao)上清(qing)液(ye)：1000×g離心10分鐘去(qu)除(chu)顆粒和聚合物。

4、組織勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織加入適量生(sheng)理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong)，取上清(qing)液(ye)。

5、保存(cun)：如果樣(yang)品(pin)不(bu)立即(ji)使用(yong)，應將(jiang)其(qi)分(fen)成(cheng)小部分-70℃保(bao)存(cun)，避(bi)免反復冷凍(dong)。盡可(ke)能的不(bu)要(yao)使用(yong)溶(rong)血。如果血清(qing)中大量顆粒，檢測前(qian)先(xian)離(li)心或(huo)過(guo)濾(lv)。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或(huo)更高(gao)的溫(wen)度(du)加熱(re)解凍(dong)。應在室(shi)溫(wen)下解凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

小鼠(shu)脂肪(fang)酸合成酶抑(yi)制劑(ji)(FASI)elisa試劑(ji)盒(he)

操作步驟(zhou)：

1、使用(yong)前(qian)，將(jiang)所有試劑(ji)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)。不(bu)要(yao)使液(ye)體產(chan)生大量的泡沫，以(yi)免加樣(yang)時(shi)加入大量的氣(qi)泡，產(chan)生加樣(yang)上的誤差。

2、根(gen)據待(dai)測樣(yang)品(pin)數(shu)量(liang)加上標準(zhun)品的數(shu)量(liang)決(jue)定所需的板(ban)條(tiao)數。每(mei)個(ge)標(biao)準(zhun)品和空白孔(kong)建議(yi)做(zuo)復孔(kong)。每(mei)個(ge)樣(yang)品(pin)根(gen)據自己的數(shu)量(liang)來(lai)定(ding)，能使用(yong)復(fu)孔的盡(jin)量(liang)做(zuo)復孔(kong)。

3、加入稀釋(shi)好後(hou)的標(biao)準(zhun)品50ul於反應孔、加入待(dai)測樣(yang)品(pin)50ul於反應孔內。立即(ji)加入50ul標(biao)記的抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜(mo)板(ban)，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育45分鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體，每(mei)孔(kong)加滿洗滌液(ye)，振蕩30秒，甩去(qu)洗滌液(ye)，用吸水(shui)紙拍幹(gan)。重(zhong)復此操作4次(ci)。如果用(yong)洗板機洗滌，洗滌次(ci)數(shu)增加壹(yi)次(ci)。

5、每(mei)孔(kong)加入100ul的親(qin)和鏈酶(mei)素-HRP，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育30分鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去(qu)孔內液(ye)體，每(mei)孔(kong)加滿洗滌液(ye)，振蕩30秒，甩去(qu)洗滌液(ye)，用吸水(shui)紙拍幹(gan)。重(zhong)復此操作4次(ci)。如果用(yong)洗板機洗滌，洗滌次(ci)數(shu)增加壹(yi)次(ci)。

7、每(mei)孔(kong)加入底(di)物A、B各(ge)50ul，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃溫育5分鐘(zhong)。避免光照。

8、取(qu)出(chu)酶標(biao)板(ban)，迅(xun)速(su)加入50ul終(zhong)止(zhi)液(ye)，加入終(zhong)止(zhi)液(ye)後(hou)應立即(ji)測定(ding)結(jie)果。

9、在(zai)450nm波長(chang)處(chu)測定各(ge)孔(kong)的OD值(zhi)。

操作註意(yi)事項(xiang)：

1、試劑(ji)應按標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲(chu)存(cun)，使用(yong)前(qian)恢(hui)復到室(shi)溫(wen)。稀稀過(guo)後(hou)的標(biao)準(zhun)品應丟棄(qi)，不(bu)可(ke)保(bao)存(cun)

2、實驗(yan)中不(bu)用(yong)的板(ban)條(tiao)應立即(ji)放回(hui)包裝(zhuang)袋中，密封(feng)保存(cun)，以(yi)免變質(zhi)。

3、不(bu)用(yong)的其(qi)它(ta)試劑(ji)應包裝(zhuang)好或(huo)蓋(gai)好(hao)。不(bu)同批(pi)號的試劑(ji)不(bu)要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前使用(yong)。

4、使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的吸(xi)頭以(yi)免交(jiao)叉汙染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和底(di)物A、B液(ye)時，避免使用(yong)帶金屬(shu)部分的加樣(yang)器(qi)。

5、使用(yong)幹(gan)凈(jing)的塑(su)料(liao)容(rong)器配置洗滌液(ye)。使用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)試劑(ji)盒(he)裏(li)的各(ge)種(zhong)成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品(pin)。

6、底(di)物A應揮(hui)發(fa)，避免長(chang)時間(jian)打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。底(di)物B對光敏(min)感，避免長(chang)時間(jian)暴露(lu)於光下(xia)。避(bi)免用手接觸，有(you)毒(du)。實驗(yan)完成後(hou)應立即(ji)讀取OD值(zhi)。

7、加入試劑(ji)的順(shun)序應壹(yi)致(zhi)，以保(bao)證(zheng)所有反(fan)應板孔(kong)溫育(yu)的時(shi)間(jian)壹(yi)樣(yang)。按照(zhao)說(shuo)明(ming)書中標明(ming)的時(shi)間(jian)、加液(ye)的量(liang)及(ji)順序進(jin)行溫(wen)育(yu)操作。

壹(yi)般來(lai)講(jiang)，96T能檢(jian)測90個(ge)樣(yang)本(ben)，48T能檢(jian)測42個(ge)樣(yang)本(ben)，這(zhe)裏(li)面需(xu)要用(yong)標樣(yang)來(lai)做(zuo)標準(zhun)曲(qu)線，所以各(ge)位需(xu)要(yao)做(zuo)實驗(yan)的老(lao)師(shi)們，請在(zai)購(gou)買ELISA試劑(ji)盒(he)的時(shi)候(hou)註意，需要(yao)做(zuo)多(duo)少個(ge)樣(yang)本(ben)，在決(jue)定買多(duo)大規格(ge)的試劑(ji)盒(he)，以(yi)免做(zuo)實驗(yan)時出(chu)現試劑(ji)盒(he)不(bu)夠(gou)用(yong)或(huo)者(zhe)浪費(fei)！

原(yuan)理：將(jiang)特(te)異性(xing)抗(kang)體包被於固相載(zai)體表(biao)面(mian)，經(jing)洗滌後(hou)分成(cheng)兩(liang)組：壹(yi)組加酶(mei)標記抗原(yuan)和被(bei)測(ce)抗原(yuan)的混(hun)合液(ye)，另(ling)壹(yi)組只(zhi)加酶(mei)標記抗原(yuan)，經(jing)孵(fu)育洗滌後(hou)加底(di)物顯(xian)色，這(zhe)兩(liang)組底(di)物降解(jie)量(liang)之(zhi)差，即(ji)為所要測(ce)定(ding)的未(wei)知(zhi)抗原(yuan)的量(liang)。

小鼠(shu)繁殖與呼(hu)吸綜合征(zheng)病毒(du)抗(kang)體(PRRSV-Ab)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)甘油三(san)酯水(shui)解酶(mei)(TGH)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)幹擾素誘(you)導鳥(niao)苷(gan)酸結(jie)合蛋(dan)白(bai)1(GBP1)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)黑素(su)皮質(zhi)素受(shou)體4(MC4R)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)角化(hua)細(xi)胞(bao)內分泌因子(zi)(KAF)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)抗L型鈣通(tong)道蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(Anti-CACH2)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)美(mei)金(jin)剛胺(Memantine)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)生長(chang)激素抑(yi)制激(ji)素(su)(GHIH)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)嗜酸粒細(xi)胞(bao)趨化(hua)蛋(dan)白(bai)Eotaxin 1(Eotaxin 1)elisa試劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)鼠(shu)泰澤病(bing)原體(ti)(Tyzzer's Organism)elisa試劑(ji)盒(he)