小鼠(shu)單胺類神(shen)經(jing)遞質(zhi)(Mnt)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

小鼠(shu)單胺類神(shen)經(jing)遞質(zhi)(Mnt)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

我司產(chan)品齊(qi)全(quan)，因上架(jia)數(shu)量有(you)限(xian)，未(wei)能全(quan)部(bu)上架(jia)，如需訂(ding)購或者(zhe)產(chan)品詳(xiang)情請直(zhi)接聯(lian)系我司銷(xiao)售！

ELISA法是免(mian)疫診(zhen)斷(duan)中的壹項新技術(shu)，現(xian)已(yi)成(cheng)功(gong)地應(ying)用於多種(zhong)病(bing)原(yuan)微生(sheng)物(wu)所(suo)引起的(de)傳染病(bing)、寄(ji)生蟲(chong)病(bing)及(ji)非(fei)傳染病(bing)等方面的(de)免(mian)疫診(zhen)斷(duan)。也(ye)已(yi)應(ying)用於大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根(gen)據已(yi)經(jing)使(shi)用的結(jie)果(guo)，認(ren)為ELISA法具有(you)靈敏(min)、特異(yi)、簡單、快(kuai)速、穩(wen)定及易於自(zi)動(dong)化(hua)操(cao)作(zuo)等特點。不僅(jin)適(shi)用於臨床標(biao)本的檢查(zha)，而且(qie)由於壹天之內(nei)可以(yi)檢查(zha)幾百(bai)甚至上(shang)千份(fen)標(biao)本,因此，也(ye)適合於血清流行(xing)病(bing)學(xue)調(tiao)查(zha)。本(ben)法不僅(jin)可以(yi)用來測定抗ti，而且(qie)也(ye)可用於測定體(ti)液(ye)中的循(xun)環抗原，所以(yi)也(ye)是壹種(zhong)早期診(zhen)斷(duan)的(de)良(liang)好方法。因此ELISA法在生物醫學各(ge)領(ling)域(yu)的應用範圍(wei)日(ri)益(yi)擴大，

組(zu)成結構(gou)

1、血清：操作(zuo)過(guo)程(cheng)中避免(mian)任何細胞(bao)刺(ci)激(ji)。使(shi)用不含(han)熱(re)原和內(nei)du素(su)的(de)試(shi)管(guan)。收集(ji)血液(ye)後，1000×g離(li)心(xin)10分鐘(zhong)將血紅(hong)細胞迅(xun)速小心地分離。

2、2、血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血漿(jiang)可用於檢測。1000×g離心(xin)30分鐘(zhong)去除顆粒。

3、細胞上(shang)清(qing)液(ye)：1000×g離(li)心10分鐘(zhong)去除顆粒和聚合物(wu)。

4、組(zu)織勻漿(jiang)：將組織加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)，取上清液(ye)。

5、保存(cun)：如果(guo)樣品不立(li)即(ji)使(shi)用，應將其分成小部分-70℃保存(cun)，避(bi)免(mian)反(fan)復冷凍(dong)。盡(jin)可能的不要(yao)使(shi)用溶(rong)血。如果(guo)血清中大量顆粒，檢測前先(xian)離(li)心或過濾(lv)。不要(yao)在37℃或更高的溫度加(jia)熱(re)解(jie)凍(dong)。應(ying)在室溫下解凍(dong)並確(que)保樣品均(jun)勻(yun)地(di)充分解凍。

小鼠(shu)單胺類神(shen)經(jing)遞質(zhi)(Mnt)elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)：

1、使(shi)用前，將所有(you)試(shi)劑(ji)充分混勻。不要(yao)使(shi)液(ye)體(ti)產(chan)生大(da)量的泡沫，以(yi)免(mian)加(jia)樣時(shi)加(jia)入(ru)大(da)量的氣泡，產(chan)生加(jia)樣上的(de)誤差。

2、根(gen)據待(dai)測樣品數(shu)量加(jia)上(shang)標(biao)準(zhun)品(pin)的數(shu)量決(jue)定所需的(de)板條數(shu)。每個標(biao)準(zhun)品(pin)和空(kong)白孔建(jian)議做(zuo)復孔。每個樣品根(gen)據自(zi)己(ji)的(de)數(shu)量來定，能使(shi)用復孔的(de)盡(jin)量做復孔。

3、加(jia)入(ru)稀(xi)釋(shi)好後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)50ul於反(fan)應孔(kong)、加(jia)入(ru)待(dai)測樣品50ul於反(fan)應孔(kong)內(nei)。立(li)即(ji)加(jia)入(ru)50ul標(biao)記的抗體(ti)。蓋(gai)上膜板，輕輕(qing)振蕩混勻，37℃溫育45分鐘(zhong)。

4、甩(shuai)去孔內(nei)液(ye)體(ti)，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩30秒，甩去洗滌(di)液(ye)，用吸水(shui)紙(zhi)拍幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作(zuo)4次。如果(guo)用洗板(ban)機(ji)洗滌(di)，洗(xi)滌(di)次數增(zeng)加(jia)壹次。

5、每孔加(jia)入(ru)100ul的(de)親和(he)鏈(lian)酶(mei)素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘(zhong)。

6、甩(shuai)去孔內(nei)液(ye)體(ti)，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，振蕩30秒，甩去洗滌(di)液(ye)，用吸水(shui)紙(zhi)拍幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作(zuo)4次。如果(guo)用洗板(ban)機(ji)洗滌(di)，洗(xi)滌(di)次數增(zeng)加(jia)壹次。

7、每孔加(jia)入(ru)底物(wu)A、B各(ge)50ul，輕(qing)輕(qing)振蕩混勻，37℃溫育5分鐘(zhong)。避免(mian)光照。

8、取出(chu)酶(mei)標(biao)板，迅(xun)速加(jia)入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液(ye)，加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液(ye)後應(ying)立(li)即(ji)測定結果(guo)。

9、在450nm波長(chang)處(chu)測定各(ge)孔(kong)的(de)OD值(zhi)。

操(cao)作(zuo)註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1、試(shi)劑(ji)應按(an)標(biao)簽說明書(shu)儲存(cun)，使(shi)用前恢(hui)復到室溫。稀稀過(guo)後的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)應丟(diu)棄(qi)，不可保存(cun)

2、實驗中不用的板(ban)條(tiao)應立(li)即(ji)放回包裝(zhuang)袋(dai)中，密封(feng)保存(cun)，以(yi)免(mian)變質(zhi)。

3、不用的其(qi)它(ta)試(shi)劑(ji)應包裝(zhuang)好或(huo)蓋(gai)好。不同(tong)批號的試(shi)劑(ji)不要(yao)混(hun)用。保質(zhi)前使(shi)用。

4、使(shi)用壹次性(xing)的吸(xi)頭(tou)以(yi)免(mian)交叉汙染，吸取終止液(ye)和(he)底物(wu)A、B液(ye)時(shi)，避(bi)免(mian)使(shi)用帶(dai)金(jin)屬(shu)部(bu)分的加(jia)樣器。

5、使(shi)用幹凈(jing)的(de)塑料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置(zhi)洗(xi)滌液(ye)。使(shi)用前充(chong)分混勻試(shi)劑(ji)盒(he)裏(li)的各(ge)種(zhong)成份(fen)及(ji)樣品。

6、底物(wu)A應(ying)揮(hui)發(fa)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)打開蓋(gai)子。底物(wu)B對光敏(min)感(gan)，避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)暴露(lu)於光下。避免(mian)用手接觸(chu)，有(you)毒。實驗完成(cheng)後應(ying)立(li)即(ji)讀取OD值(zhi)。

7、加(jia)入(ru)試(shi)劑(ji)的順序應壹致，以(yi)保證所有(you)反(fan)應板(ban)孔(kong)溫育的(de)時(shi)間(jian)壹樣。按(an)照說明書(shu)中標(biao)明的時(shi)間(jian)、加(jia)液(ye)的(de)量及順序(xu)進行(xing)溫育操(cao)作(zuo)。

壹般來講，96T能檢測90個樣本，48T能檢測42個樣本，這(zhe)裏(li)面需要(yao)用標(biao)樣來做(zuo)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，所(suo)以(yi)各(ge)位(wei)需要(yao)做實驗的老(lao)師(shi)們，請在購買(mai)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的時(shi)候註意，需要(yao)做多少(shao)個樣本，在決(jue)定買(mai)多(duo)大(da)規格(ge)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)，以(yi)免(mian)做實驗時(shi)出(chu)現試(shi)劑(ji)盒(he)不夠(gou)用或者(zhe)浪費(fei)！

原(yuan)理(li)：將特異(yi)性(xing)抗體(ti)包(bao)被於固相(xiang)載體(ti)表(biao)面，經(jing)洗滌後分成兩組(zu)：壹組加(jia)酶(mei)標(biao)記抗原和被(bei)測抗原的混(hun)合液(ye)，另(ling)壹組只加(jia)酶(mei)標(biao)記抗原，經(jing)孵育洗(xi)滌後加(jia)底物(wu)顯色，這兩組底物(wu)降(jiang)解量之差，即(ji)為所要(yao)測定的未知抗原(yuan)的(de)量。

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