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          大鼠阿(e)立新(xin)A(Orexin A)elisa試(shi)劑盒

          大鼠阿(e)立新(xin)A(Orexin A)elisa試(shi)劑盒
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          大鼠阿(e)立新(xin)A(Orexin A)elisa試(shi)劑盒

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          ELISA法是(shi)免疫診(zhen)斷中的(de)壹(yi)項新技(ji)術(shu),現(xian)已(yi)成(cheng)功(gong)地(di)應用(yong)於多(duo)種(zhong)病(bing)原微(wei)生物所引(yin)起(qi)的(de)傳(chuan)染病(bing)、寄(ji)生蟲(chong)病(bing)及(ji)非傳染病(bing)等(deng)方面(mian)的(de)免疫診(zhen)斷。也已(yi)應用(yong)於大分(fen)子(zi)抗原和(he)小分(fen)子(zi)抗原的(de)定(ding)量測定(ding),根據已(yi)經(jing)使(shi)用(yong)的(de)結果(guo),認(ren)為(wei)ELISA法具(ju)有(you)靈敏、特異、簡(jian)單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定及(ji)易(yi)於(yu)自動化操(cao)作(zuo)等(deng)特點。不僅適(shi)用(yong)於臨床標本(ben)的(de)檢查(zha),而且由(you)於(yu)壹(yi)天之(zhi)內(nei)可以(yi)檢查(zha)幾百(bai)甚至上(shang)千份(fen)標本(ben),因(yin)此,也(ye)適(shi)合於(yu)血清(qing)流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)調查(zha)。本法不僅可以(yi)用(yong)來測定ti,而且也可用(yong)於測定體液中的(de)循(xun)環抗原,所以(yi)也(ye)是(shi)壹(yi)種(zhong)早(zao)期(qi)診(zhen)斷的(de)良(liang)好方法。因(yin)此ELISA法在(zai)生物醫學(xue)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應用(yong)範(fan)圍日益(yi)擴大,

          組成(cheng)結構

          1、血清(qing):操(cao)作(zuo)過程中避(bi)免任何細(xi)胞刺(ci)激。使(shi)用(yong)不含(han)熱原和(he)內(nei)du素的(de)試(shi)管。收(shou)集血液後(hou),1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將血紅細(xi)胞(bao)迅速小心地(di)分(fen)離(li)。

          2、2、血漿(jiang):EDTA、檸(ning)檬suan鹽(yan)、肝(gan)素血漿(jiang)可用(yong)於檢測(ce)。1000×g離(li)心30分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒。

          3、細胞(bao)上清(qing)液:1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆粒和聚合物。

          4、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):將組織(zhi)加(jia)入適(shi)量生理(li)鹽(yan)水搗碎(sui)。1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong),取上清(qing)液。

          5、保(bao)存:如果樣品不立即(ji)使(shi)用(yong),應將其(qi)分(fen)成(cheng)小(xiao)部(bu)分(fen)-70℃保(bao)存,避(bi)免反復冷凍。盡(jin)可能(neng)的(de)不要(yao)使(shi)用(yong)溶血。如果血清(qing)中(zhong)大量顆粒,檢測(ce)前先(xian)離(li)心或過(guo)濾。不要(yao)在(zai)37℃或更(geng)高的(de)溫(wen)度加熱解(jie)凍(dong)。應在(zai)室(shi)溫(wen)下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣品均(jun)勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。

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          大鼠阿(e)立新(xin)A(Orexin A)elisa試(shi)劑盒

          操(cao)作步驟(zhou):

          1、使(shi)用(yong)前,將所有(you)試(shi)劑充分(fen)混(hun)勻(yun)。不要(yao)使(shi)液體產(chan)生大量的(de)泡(pao)沫,以免加樣時加入(ru)大量的(de)氣(qi)泡(pao),產(chan)生加(jia)樣上的(de)誤(wu)差(cha)。

          2、根據待(dai)測樣品數(shu)量加上(shang)標準(zhun)品(pin)的(de)數(shu)量決(jue)定所需(xu)的(de)板(ban)條數。每個標準(zhun)品(pin)和(he)空白(bai)孔建(jian)議(yi)做復孔。每個樣品根據自己的(de)數(shu)量來定(ding),能使(shi)用(yong)復孔的(de)盡(jin)量做復孔。

          3、加(jia)入稀(xi)釋(shi)好後(hou)的(de)標準(zhun)品(pin)50ul於(yu)反應孔、加(jia)入(ru)待(dai)測樣品50ul於(yu)反(fan)應孔內(nei)。立即加(jia)入(ru)50ul標記(ji)的(de)抗體。蓋上(shang)膜板,輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育45分(fen)鐘(zhong)。

          4、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體,每孔加(jia)滿(man)洗滌(di)液,振蕩(dang)30秒,甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液,用(yong)吸水紙拍幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作4次(ci)。如果用(yong)洗板機洗(xi)滌,洗(xi)滌(di)次數(shu)增加(jia)壹(yi)次(ci)。

          5、每孔加(jia)入(ru)100ul的(de)親(qin)和鏈酶素-HRP,輕(qing)輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。

          6、甩(shuai)去(qu)孔內(nei)液體,每孔加(jia)滿(man)洗滌(di)液,振蕩(dang)30秒,甩(shuai)去(qu)洗(xi)滌液,用(yong)吸水紙拍幹(gan)。重(zhong)復此操(cao)作4次(ci)。如果用(yong)洗板機洗(xi)滌,洗(xi)滌(di)次數(shu)增加(jia)壹(yi)次(ci)。

          7、每孔加(jia)入(ru)底物A、B各50ul,輕輕振蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃溫(wen)育5分(fen)鐘(zhong)。避(bi)免光(guang)照。

          8、取出酶標板(ban),迅速加入(ru)50ul終(zhong)止(zhi)液,加入(ru)終(zhong)止(zhi)液後(hou)應立(li)即(ji)測(ce)定結果(guo)。

          9、在(zai)450nm波(bo)長處測定(ding)各孔的(de)OD值(zhi)。

          操(cao)作註意(yi)事項:

          1、試(shi)劑應按標簽(qian)說明(ming)書(shu)儲(chu)存,使(shi)用(yong)前恢(hui)復到(dao)室(shi)溫(wen)。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的(de)標準(zhun)品(pin)應丟棄(qi),不可保(bao)存

          2、實(shi)驗中(zhong)不用(yong)的(de)板(ban)條應立(li)即(ji)放回(hui)包裝袋中(zhong),密封保(bao)存,以(yi)免變質。

          3、不用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試(shi)劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或蓋好(hao)。不同批(pi)號(hao)的(de)試(shi)劑不要(yao)混(hun)用(yong)。保(bao)質(zhi)前使(shi)用(yong)。

          4、使(shi)用(yong)壹次性的(de)吸頭(tou)以免交(jiao)叉汙染,吸取終(zhong)止(zhi)液和底(di)物A、B液時,避(bi)免使用(yong)帶(dai)金(jin)屬(shu)部(bu)分(fen)的(de)加(jia)樣器。

          5、使(shi)用(yong)幹凈的(de)塑(su)料(liao)容器配(pei)置洗滌(di)液。使用(yong)前充分(fen)混(hun)勻(yun)試(shi)劑盒裏(li)的(de)各(ge)種(zhong)成(cheng)份(fen)及樣品。

          6、底(di)物A應揮(hui)發(fa),避(bi)免長時間打開蓋子(zi)。底(di)物B對光(guang)敏感,避(bi)免長時間暴露(lu)於(yu)光(guang)下。避(bi)免用(yong)手(shou)接觸(chu),有(you)毒(du)。實(shi)驗完(wan)成(cheng)後(hou)應立(li)即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。

          7、加(jia)入試(shi)劑的(de)順(shun)序(xu)應壹(yi)致(zhi),以保(bao)證(zheng)所有(you)反(fan)應板(ban)孔溫(wen)育(yu)的(de)時間壹樣。按照說明(ming)書(shu)中(zhong)標明(ming)的(de)時間、加液的(de)量及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育(yu)操(cao)作(zuo)。

          壹(yi)般來講(jiang),96T能(neng)檢測(ce)90個樣本,48T能(neng)檢測(ce)42個樣本,這(zhe)裏(li)面需(xu)要(yao)用(yong)標樣來做標準(zhun)曲(qu)線(xian),所以(yi)各(ge)位需(xu)要(yao)做實(shi)驗的(de)老師們,請(qing)在購(gou)買(mai)ELISA試(shi)劑盒的(de)時候註意(yi),需要(yao)做多(duo)少個樣本,在(zai)決(jue)定買(mai)多(duo)大規格的(de)試(shi)劑盒,以(yi)免做實(shi)驗時出現(xian)試(shi)劑盒不夠用(yong)或者(zhe)浪費!

          原理(li):將特異性抗體包(bao)被(bei)於固(gu)相(xiang)載(zai)體表(biao)面(mian),經洗滌(di)後(hou)分(fen)成(cheng)兩(liang)組:壹(yi)組加(jia)酶標記(ji)抗原和(he)被測抗原的(de)混(hun)合液,另壹組只(zhi)加酶標記(ji)抗原,經(jing)孵(fu)育(yu)洗滌後(hou)加(jia)底(di)物顯(xian)色,這兩(liang)組底(di)物降解量之差(cha),即為(wei)所要(yao)測(ce)定的(de)未(wei)知抗原的(de)量。

          人(ren)葡萄糖(tang)激酶(GCK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)周(zhou)期(qi)素依(yi)賴(lai)性激酶5(CDK5)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)整合素連(lian)接激(ji)酶1(ILK-1)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)白(bai)細(xi)胞介素受體相(xiang)關(guan)激(ji)酶(IRAK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)磷酸烯(xi)醇(chun)式(shi)丙(bing)酮(tong)酸羧(suo)激(ji)酶(PCK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)磷酸化(hua)蛋白(bai)激(ji)酶C(P-PKC)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)磷酸化(hua)細(xi)胞(bao)外信號(hao)調節激酶(pERK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)鏈激酶(SK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)丙(bing)酮(tong)酸激(ji)酶(PK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)肌酸(suan)激(ji)酶(CK)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)蛋白(bai)激(ji)酶C(PKC)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)葡萄(tao)糖(tang)激酶調節蛋白(bai)(GKRP)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)雕(diao)亡(wang)信(xin)號(hao)調節激酶I(ASK-1)ELISA試(shi)劑盒


          人(ren)細胞(bao)外信號(hao)調節激酶(ERK)ELISA試(shi)劑盒


          牡蠣糞卟啉(lin)原氧(yang)化酶(CPOX)elisa檢測(ce)試(shi)劑盒




































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