人(ren)骨(gu)特異性堿(jian)性磷(lin)酸(suan)酶(mei)(BAP)ELISA試劑(ji)盒(he)

人(ren)骨(gu)特異性堿(jian)性磷(lin)酸(suan)酶(mei)(BAP)ELISA試劑(ji)盒(he)

ELISA法(fa)是免疫診斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項新(xin)技(ji)術，現(xian)已(yi)成功地(di)應用於多種(zhong)病原(yuan)微(wei)生(sheng)物(wu)所引起(qi)的(de)傳(chuan)染病(bing)、寄(ji)生蟲病(bing)及(ji)非傳(chuan)染病(bing)等方(fang)面的免疫(yi)診斷。也已(yi)應用於大分(fen)子抗(kang)原和小分(fen)子(zi)抗(kang)原的定量(liang)測(ce)定，根(gen)據已(yi)經(jing)使(shi)用的結果，認為(wei)ELISA法(fa)具(ju)有(you)靈敏、特異、簡單、快速、穩(wen)定及(ji)易於自動化(hua)操(cao)作(zuo)等特點。不僅適用於臨床(chuang)標(biao)本(ben)的檢查(zha)，而且由(you)於壹天(tian)之內可(ke)以檢查(zha)幾(ji)百(bai)甚至(zhi)上(shang)千份(fen)標(biao)本(ben),因此(ci)，也適合於血清(qing)流行病學(xue)調查(zha)。本(ben)法(fa)不(bu)僅可以用來測(ce)定抗(kang)ti，而且也(ye)可(ke)用於測(ce)定體液中的(de)循環抗(kang)原，所以也(ye)是壹種早(zao)期診(zhen)斷(duan)的(de)良好方(fang)法(fa)。因(yin)此ELISA法(fa)在(zai)生物(wu)醫(yi)學(xue)各(ge)領(ling)域的(de)應用範(fan)圍日(ri)益擴(kuo)大(da)，

免責(ze)聲(sheng)明

1. 試劑(ji)盒(he)僅(jin)供(gong)研(yan)究使用，不得用於臨床(chuang)實(shi)驗(yan)或(huo)人(ren)體實驗(yan)，否則(ze)所(suo)產(chan)生(sheng)的壹切(qie)後果，由(you)實驗(yan)者(zhe)承擔(dan)，本(ben)公司概(gai)不負責(ze)。

2. 嚴格按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，實驗(yan)者(zhe)違反說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，後果由(you)實驗(yan)者(zhe)承擔(dan)。

3. 產(chan)品特點

壹、高(gao)效(xiao)、靈敏、特異的(de)抗(kang)ti；

二、穩(wen)定的(de)重(zhong)復(fu)性和可靠(kao)性；

三(san)、吸(xi)附(fu)性能好(hao)，空白(bai)值(zhi)低(di)，孔(kong)底透明度高(gao)的(de)固(gu)相載體；

四(si)、適用血清(qing)、血漿、組織(zhi)勻漿液、細胞培養(yang)上清(qing)液、尿液等等多種(zhong)標(biao)本(ben)類型；

五、節省實(shi)驗(yan)經(jing)費。

elisa試(shi)劑(ji)盒(he)回收(shou)率是反應待測(ce)物(wu)在樣(yang)品分析(xi)過(guo)程中(zhong)的(de)損失(shi)的程度，損失(shi)越少，回收(shou)率越高(gao)，如(ru)果作(zuo)標(biao)液1PPM，就是1毫克(ke)/升，而作出(chu)標(biao)準(zhun)數(shu)據為(wei)0.99毫克(ke)/升，就是說(shuo)妳(ni)的(de)回收(shou)率是99%，這個與真實成分有(you)密切的關系，說(shuo)明(ming)方(fang)法(fa)的(de)準確度。比如水(shui)中(zhong)總無(wu)機(ji)氯含(han)量(liang)測(ce)定，樣(yang)品水中(zhong)含(han)有(you)無(wu)機(ji)氯20mg/L，取100mL被(bei)測(ce)水(shui)樣(yang)品，加入(ru)0.1mL濃(nong)度為(wei)10mg/mL的(de)含(han)無(wu)機(ji)氯標(biao)準(zhun)樣(yang)品，測(ce)定時(shi)忽略(lve)體積變化，如果測(ce)定出(chu)樣(yang)品中無(wu)機(ji)氯為(wei)29.8mg/L，則(ze)認為(wei)回收(shou)率為(wei)99%。

人(ren)骨(gu)特異性堿(jian)性磷(lin)酸(suan)酶(mei)(BAP)ELISA試劑(ji)盒(he)

組成結構(gou)

1、血清(qing)：操(cao)作過(guo)程中(zhong)避免(mian)任(ren)何(he)細胞刺激。使(shi)用不含(han)熱(re)原和內du素(su)的(de)試(shi)管(guan)。收(shou)集血液後，1000×g離(li)心10分鐘將(jiang)血紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小(xiao)心地(di)分(fen)離(li)。

2、血漿：EDTA、檸(ning)檬suan鹽、肝(gan)素(su)血漿可(ke)用於檢測(ce)。1000×g離(li)心30分鐘去除顆(ke)粒(li)。

3、細胞上清(qing)液：1000×g離心10分鐘去除顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物(wu)。

4、組織(zhi)勻漿：將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適量生理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎。1000×g離心10分鐘，取上(shang)清(qing)液。

5、保存(cun)：如果樣(yang)品不立即(ji)使用，應將(jiang)其分(fen)成小部(bu)分-70℃保(bao)存(cun)，避免(mian)反復(fu)冷凍。盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)不(bu)要使用溶血或(huo)高(gao)血脂(zhi)血。如(ru)果血清(qing)中(zhong)大量顆(ke)粒(li)，檢測(ce)前先離(li)心或(huo)過(guo)濾(lv)。不要在(zai)37℃或(huo)更(geng)高(gao)的(de)溫度加熱(re)解凍。應在室溫下(xia)解凍並(bing)確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地(di)充分(fen)解(jie)凍。

試劑(ji)盒(he)成分

1 預(yu)包(bao)被(bei)板: 抗(kang)小鼠白介(jie)素(su)-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合純化 96T

2 酶(mei)標(biao)記(ji)抗(kang)ti: (30倍濃(nong)縮)HRP標(biao)記(ji)抗(kang)小鼠白介(jie)素(su)-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合純化 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品: 重(zhong)組小(xiao)鼠白介(jie)素(su)-6 0.5mL x 2

4 EIA緩沖(chong)液: 含(han)1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記(ji)抗(kang)ti稀釋液: 含(han)1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色(se)劑(ji): TMB底物(wu)液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫(liu)suan 12mL x 1

8 濃(nong)縮洗滌(di)液: (40倍濃(nong)縮) 含(han)1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 50mL x 1 操(cao)作說(shuo)明(ming) 1實(shi)驗(yan)所(suo)需器(qi)材(但(dan)試(shi)劑(ji)盒(he)沒(mei)有(you)提供(gong)) 酶(mei)標(biao)儀(yi)(450nm) 微(wei)移(yi)液管及(ji)其吸(xi)嘴(zui) 量(liang)筒及燒杯(bei) 去離子水 冰(bing)箱(xiang)(4°C) 坐標(biao)紙(log/log) 吸水紙 試管(用於標(biao)準(zhun)品稀釋(shi)) 溫育(yu)箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗瓶(ping) (用於洗板) 壹次(ci)性試劑(ji)管(guan)(用於濃(nong)縮酶(mei)標(biao)記(ji)抗(kang)ti和顯(xian)色(se)劑(ji))

常用方(fang)法(fa)及(ji)原理如下(xia)：

1. 夾心法(fa)：

夾心法(fa)常用於檢測(ce)大分(fen)子抗(kang)原，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為(wei):

a. 將(jiang)具有(you)專壹性的抗(kang)ti固(gu)著（coating）於塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗去多余抗(kang)ti

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體，檢體中若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測(ce)的(de)抗(kang)原，則(ze)其會(hui)與(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗(kang)ti進行專壹性鍵(jian)結

c. 洗去多余待測(ce)檢體，加入(ru)另壹(yi)種(zhong)對抗(kang)原專壹的(de)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，與待(dai)測(ce)抗(kang)原進行鍵(jian)結

d. 洗去多余未鍵(jian)結壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，加入(ru)帶有(you)酶(mei)的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與壹(yi)次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結

e. 洗去多余未鍵(jian)結二(er)次(ci)抗(kang)ti，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使酵(jiao)素(su)呈(cheng)色(se)，以肉(rou)眼(yan)或(huo)儀(yi)器(qi)讀(du)取呈(cheng)色(se)結果

原理(li)：針對(dui)抗(kang)原分子(zi)上2個不(bu)同抗(kang)原決定簇(cu)的(de)單克(ke)隆(long)抗(kang)ti分別(bie)作為(wei)固(gu)相抗(kang)ti和酶(mei)標(biao)抗(kang)ti，將(jiang)大分(fen)子(zi)抗(kang)原分別(bie)制備固(gu)相抗(kang)原和酶(mei)標(biao)抗(kang)原結合物(wu)。

2. 間接法(fa)

間接法(fa)常用於檢測(ce)抗(kang)ti，壹般(ban)的操(cao)作步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的(de)抗(kang)原固(gu)著於塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗去多余的抗(kang)原。

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體，檢體中若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，則(ze)其會(hui)與(yu)塑膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗(kang)原進行專壹性鍵(jian)結。

c. 洗去多余待測(ce)檢體，加入(ru)帶有(you)酶(mei)的二(er)次(ci)抗(kang)ti，與待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結。

d. 洗去多余未鍵(jian)結二(er)次(ci)抗(kang)ti，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使酶(mei)呈色(se)，藉儀(yi)器(qi)（ELISA reader）測(ce)定塑(su)膠(jiao)盤(pan)中的(de)吸光(guang)值(zhi)（OD值），以評估有(you)色(se)終產(chan)物(wu)的含(han)量(liang)即(ji)可測(ce)量(liang)待(dai)測(ce)抗(kang)ti的含(han)量(liang)。

原理(li)：利(li)用酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)抗(kang)ti以檢測(ce)已(yi)與(yu)固(gu)相結合的受檢抗(kang)ti。

3. 競爭法(fa)

競爭法(fa)是壹種較少用到的(de)ELISA檢測(ce)機(ji)制(zhi)，壹(yi)般(ban)用於檢測(ce)小(xiao)分(fen)子(zi)抗(kang)原，其操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)為(wei)：

a. 將(jiang)具有(you)專壹性的抗(kang)ti固(gu)著於塑膠(jiao)孔盤(pan)上，完(wan)成後洗去多余抗(kang)ti

b. 加入(ru)待(dai)測(ce)檢體，使檢體中的(de)待測(ce)抗(kang)原與塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗(kang)ti進行專壹性鍵(jian)結

c. 加入(ru)帶有(you)酶(mei)的抗(kang)原，此抗(kang)原也可(ke)與塑膠(jiao)孔盤(pan)上的(de)抗(kang)ti進行專壹性鍵(jian)結，由(you)於塑膠(jiao)孔盤(pan)上固(gu)著的抗(kang)ti數量(liang)有(you)限，因(yin)此(ci)當檢體中抗(kang)原的量(liang)越多，則(ze)帶有(you)酶(mei)的抗(kang)原可鍵(jian)結的(de)固(gu)著抗(kang)ti就越(yue)少，亦(yi)即(ji)，兩種(zhong)抗(kang)原皆(jie)競(jing)相與塑(su)膠(jiao)孔盤(pan)上抗(kang)ti鍵(jian)結，即(ji)所謂(wei)競(jing)爭法(fa)之由來。

d. 洗去檢體與帶有(you)酶(mei)的抗(kang)原，加入(ru)酶(mei)底物(wu)使酶(mei)呈色(se)，當檢體中抗(kang)原量越(yue)多，代表塑膠(jiao)孔盤(pan)內留(liu)下之帶有(you)酶(mei)的抗(kang)原越少，顯(xian)色(se)也就(jiu)越(yue)淺(qian)。

e. 當需要(yao)偵(zhen)測(ce)無(wu)法(fa)獲(huo)得兩(liang)種以上(shang)單壹性抗(kang)ti的抗(kang)原，或(huo)是不易得到足(zu)夠的純化(hua)抗(kang)ti以固(gu)著於孔盤(pan)上時(shi)，壹般(ban)會(hui)考(kao)慮使用競爭法(fa)ELISA。

常見(jian)問(wen)題(ti)解(jie)析：

1、試劑(ji)的(de)選(xuan)擇(ze)：選擇(ze)優良試劑(ji)大(da)家(jia)都(dou)是知道的，但(dan)是在檢測(ce)之前還應該提前半個(ge)小(xiao)時(shi)將(jiang)試劑(ji)拿(na)到常溫下(xia)進行解凍。

2、加樣(yang)中可(ke)能遇到的(de)問(wen)題(ti)。

3、洗板時(shi)容易造(zao)成誤差(cha)。

4、顯(xian)色(se)問題(ti)：使(shi)用了過(guo)期(qi)的顯(xian)色(se)劑(ji)或(huo)者(zhe)是顯(xian)色(se)劑(ji)用過(guo)後放置(zhi)時(shi)間太(tai)長，都有(you)可(ke)能(neng)造(zao)成顯(xian)色(se)劑(ji)不(bu)顯(xian)色(se)。

5、終止反應：在加終止劑(ji)的(de)時(shi)候由(you)於傾倒速度快，產(chan)生(sheng)氣泡(pao)，造(zao)成假陽(yang)性結果，所(suo)以在(zai)倒終止劑(ji)的(de)時(shi)候要(yao)緩(huan)慢(man)倒。

6、讀(du)板：讀(du)板的時(shi)候首(shou)先應該保證板的清(qing)潔(jie)幹(gan)凈(jing)。

訂購(gou)說(shuo)明(ming):

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