人腫(zhong)瘤(liu)血(xue)管(guan)生(sheng)長因(yin)子(TAF)ELISA試劑盒(he)

人腫(zhong)瘤(liu)血(xue)管(guan)生(sheng)長因(yin)子(TAF)ELISA試劑盒(he)

ELISA法是免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)中(zhong)的(de)壹(yi)項(xiang)新技術，現已(yi)成(cheng)功地(di)應(ying)用(yong)於(yu)多(duo)種病原(yuan)微生物(wu)所(suo)引起(qi)的(de)傳染病、寄(ji)生(sheng)蟲(chong)病及非(fei)傳染病等(deng)方面的(de)免(mian)疫(yi)診(zhen)斷(duan)。也已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大(da)分子抗(kang)原(yuan)和(he)小(xiao)分子抗(kang)原(yuan)的(de)定量測(ce)定，根(gen)據(ju)已(yi)經使(shi)用(yong)的(de)結(jie)果(guo)，認為(wei)ELISA法具(ju)有(you)靈敏(min)、特(te)異(yi)、簡單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定及易於(yu)自(zi)動化操作(zuo)等特點(dian)。不(bu)僅(jin)適用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)標(biao)本的(de)檢查，而(er)且(qie)由於(yu)壹(yi)天之內(nei)可(ke)以檢查幾百甚至上(shang)千(qian)份(fen)標(biao)本,因(yin)此(ci)，也適合於(yu)血(xue)清(qing)流行病學(xue)調查。本法不(bu)僅(jin)可以用(yong)來(lai)測(ce)定抗(kang)ti，而(er)且(qie)也可用(yong)於(yu)測(ce)定體(ti)液(ye)中(zhong)的(de)循環(huan)抗(kang)原(yuan)，所以也是壹(yi)種早(zao)期診(zhen)斷(duan)的(de)良好方(fang)法。因此(ci)ELISA法在生物(wu)醫(yi)學(xue)各(ge)領域的(de)應(ying)用(yong)範圍(wei)日益擴(kuo)大，

免(mian)責(ze)聲明(ming)

1. 試劑盒(he)僅(jin)供研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)實(shi)驗或(huo)人體(ti)實驗，否(fou)則所產(chan)生的(de)壹(yi)切(qie)後果(guo)，由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔，本公司(si)概(gai)不(bu)負(fu)責(ze)。

2. 嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說明書(shu)操作(zuo)，實驗者(zhe)違(wei)反(fan)說明(ming)書操作(zuo)，後果(guo)由實(shi)驗者(zhe)承(cheng)擔。

3. 產(chan)品特點(dian)

壹(yi)、高(gao)效、靈(ling)敏(min)、特(te)異(yi)的(de)抗ti；

二(er)、穩(wen)定的(de)重復性(xing)和(he)可(ke)靠性(xing)；

三(san)、吸(xi)附(fu)性(xing)能好(hao)，空白值(zhi)低(di)，孔底透(tou)明(ming)度(du)高(gao)的(de)固相(xiang)載體(ti)；

四(si)、適(shi)用(yong)血(xue)清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)液(ye)、細胞(bao)培養上清(qing)液(ye)、尿液(ye)等等(deng)多(duo)種標(biao)本類型(xing)；

五(wu)、節省(sheng)實驗經(jing)費。

elisa試劑盒(he)回(hui)收率是(shi)反(fan)應(ying)待測(ce)物(wu)在樣品分析過(guo)程中(zhong)的(de)損失的(de)程度(du)，損失越少(shao)，回收率越高(gao)，如果(guo)作標(biao)液(ye)1PPM，就是1毫(hao)克/升(sheng)，而(er)作(zuo)出標準(zhun)數據(ju)為(wei)0.99毫(hao)克/升(sheng)，就是說(shuo)妳的(de)回收率是(shi)99%，這個與真實成(cheng)分有(you)密切(qie)的(de)關系，說(shuo)明(ming)方法的(de)準(zhun)確度(du)。比如水(shui)中(zhong)總(zong)無機氯(lv)含量(liang)測(ce)定，樣(yang)品水(shui)中(zhong)含有(you)無機氯(lv)20mg/L，取100mL被測(ce)水(shui)樣(yang)品，加入(ru)0.1mL濃(nong)度(du)為(wei)10mg/mL的(de)含無機氯(lv)標準(zhun)樣品，測(ce)定時(shi)忽(hu)略(lve)體(ti)積(ji)變(bian)化(hua)，如果(guo)測(ce)定出(chu)樣品中(zhong)無機氯(lv)為(wei)29.8mg/L，則認為(wei)回(hui)收(shou)率為(wei)99%。

人(ren)腫(zhong)瘤(liu)血(xue)管(guan)生(sheng)長因(yin)子(TAF)ELISA試劑盒(he)

組(zu)成(cheng)結(jie)構(gou)

1、血(xue)清(qing)：操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細胞(bao)刺激(ji)。使(shi)用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)du素的(de)試管。收集(ji)血液(ye)後，1000×g離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將血紅(hong)細胞(bao)迅速小(xiao)心地(di)分(fen)離。

2、血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)suan鹽(yan)、肝(gan)素(su)血(xue)漿(jiang)可用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。1000×g離心(xin)30分鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒。

3、細胞(bao)上清(qing)液(ye)：1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。

4、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。1000×g離心(xin)10分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)液(ye)。

5、保存：如果(guo)樣品不(bu)立(li)即使(shi)用(yong)，應(ying)將其分(fen)成(cheng)小(xiao)部分(fen)-70℃保存，避免(mian)反(fan)復冷(leng)凍。盡可能(neng)的(de)不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶(rong)血或(huo)高(gao)血(xue)脂血。如果(guo)血清(qing)中(zhong)大(da)量(liang)顆粒，檢(jian)測(ce)前(qian)先(xian)離(li)心(xin)或(huo)過(guo)濾。不(bu)要(yao)在37℃或(huo)更高(gao)的(de)溫度(du)加熱(re)解(jie)凍。應(ying)在室(shi)溫下解(jie)凍並確保樣(yang)品均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍。

試劑盒(he)成(cheng)分

1 預包(bao)被板: 抗(kang)小(xiao)鼠白介素(su)-6兔(tu)子IgG,親(qin)合純化(hua) 96T

2 酶(mei)標(biao)記抗ti: (30倍(bei)濃(nong)縮(suo))HRP標(biao)記抗小(xiao)鼠白介素(su)-6兔(tu)子IgG,親(qin)合純化(hua) 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品: 重組(zu)小(xiao)鼠白介素(su)-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記抗ti稀(xi)釋(shi)液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 12mL x 1

6 顯(xian)色(se)劑: TMB底(di)物(wu)液(ye) 15mL x 1

7 終(zhong)止(zhi)液(ye): 1N硫suan 12mL x 1

8 濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye): (40倍(bei)濃(nong)縮(suo)) 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫20 BPS 50mL x 1 操作(zuo)說明 1實(shi)驗所(suo)需器材(但試劑盒(he)沒(mei)有(you)提供) 酶(mei)標儀(450nm) 微移(yi)液(ye)管及其吸(xi)嘴 量(liang)筒(tong)及燒杯(bei) 去(qu)離子水(shui) 冰箱(4°C) 坐(zuo)標紙(zhi)(log/log) 吸(xi)水(shui)紙(zhi) 試管(用(yong)於(yu)標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋(shi)) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗(xi)瓶(ping) (用(yong)於(yu)洗(xi)板(ban)) 壹(yi)次性(xing)試劑管(guan)(用(yong)於(yu)濃(nong)縮(suo)酶(mei)標記抗ti和(he)顯(xian)色(se)劑)

常(chang)用(yong)方(fang)法及原(yuan)理如下(xia)：

1. 夾(jia)心法：

夾(jia)心法常(chang)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)大(da)分(fen)子抗(kang)原(yuan)，壹(yi)般的(de)操作(zuo)步驟為(wei):

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的(de)抗(kang)ti固(gu)著(zhu)（coating）於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多(duo)余抗(kang)ti

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢體(ti)，檢體(ti)中(zhong)若(ruo)含有(you)待測(ce)的(de)抗原(yuan)，則其會與塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結(jie)

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余待測(ce)檢體(ti)，加入(ru)另壹(yi)種對(dui)抗原(yuan)專(zhuan)壹(yi)的(de)壹(yi)次抗(kang)ti，與待(dai)測(ce)抗原(yuan)進行鍵(jian)結(jie)

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)壹(yi)次抗(kang)ti，加(jia)入(ru)帶(dai)有(you)酶的(de)二(er)次抗(kang)ti，與壹(yi)次抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)

e. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)二(er)次抗(kang)ti，加(jia)入(ru)酶底物(wu)使(shi)酵(jiao)素呈(cheng)色(se)，以肉(rou)眼或(huo)儀器讀取呈色(se)結(jie)果(guo)

原(yuan)理：針對(dui)抗(kang)原(yuan)分子上(shang)2個(ge)不(bu)同(tong)抗原(yuan)決定簇(cu)的(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)ti分(fen)別(bie)作為(wei)固(gu)相(xiang)抗(kang)ti和(he)酶(mei)標抗(kang)ti，將大分(fen)子抗(kang)原(yuan)分別(bie)制備(bei)固(gu)相(xiang)抗原(yuan)和(he)酶(mei)標抗原(yuan)結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間(jian)接(jie)法

間(jian)接(jie)法常(chang)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)抗(kang)ti，壹(yi)般的(de)操作(zuo)步驟為(wei)：

a. 將已(yi)知(zhi)的(de)抗原(yuan)固著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多(duo)余的(de)抗原(yuan)。

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢體(ti)，檢體(ti)中(zhong)若(ruo)含有(you)待測(ce)的(de)壹(yi)次抗(kang)ti，則其會與塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗原(yuan)進行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結(jie)。

c. 洗(xi)去(qu)多(duo)余待測(ce)檢體(ti)，加入(ru)帶(dai)有(you)酶的(de)二(er)次抗(kang)ti，與待(dai)測(ce)的(de)壹(yi)次抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)。

d. 洗(xi)去(qu)多(duo)余未鍵(jian)結(jie)二(er)次抗(kang)ti，加(jia)入(ru)酶底物(wu)使(shi)酶呈色(se)，藉(ji)儀器（ELISA reader）測(ce)定塑(su)膠(jiao)盤中(zhong)的(de)吸光值（OD值(zhi)），以評估(gu)有(you)色(se)終(zhong)產(chan)物(wu)的(de)含量(liang)即可(ke)測(ce)量待(dai)測(ce)抗(kang)ti的(de)含量(liang)。

原(yuan)理：利(li)用(yong)酶(mei)標記的(de)抗抗(kang)ti以檢測(ce)已(yi)與固(gu)相(xiang)結(jie)合(he)的(de)受(shou)檢抗(kang)ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法

競(jing)爭(zheng)法是壹(yi)種較(jiao)少(shao)用(yong)到(dao)的(de)ELISA檢(jian)測(ce)機制(zhi)，壹(yi)般用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)小(xiao)分子抗(kang)原(yuan)，其操作(zuo)步驟為(wei)：

a. 將具(ju)有(you)專(zhuan)壹(yi)性(xing)的(de)抗(kang)ti固(gu)著(zhu)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上，完成(cheng)後洗(xi)去(qu)多(duo)余抗(kang)ti

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢體(ti)，使(shi)檢體中(zhong)的(de)待測(ce)抗原(yuan)與塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結(jie)

c. 加(jia)入(ru)帶(dai)有(you)酶的(de)抗原(yuan)，此(ci)抗原(yuan)也可與塑(su)膠(jiao)孔盤上的(de)抗(kang)ti進(jin)行專(zhuan)壹(yi)性(xing)鍵(jian)結(jie)，由(you)於(yu)塑(su)膠(jiao)孔盤上固著(zhu)的(de)抗(kang)ti數(shu)量(liang)有(you)限，因(yin)此(ci)當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗(kang)原(yuan)的(de)量越多(duo)，則帶(dai)有(you)酶的(de)抗原(yuan)可鍵(jian)結(jie)的(de)固著(zhu)抗(kang)ti就越少(shao)，亦即，兩(liang)種抗(kang)原(yuan)皆競(jing)相(xiang)與塑(su)膠(jiao)孔盤上抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)，即(ji)所(suo)謂競(jing)爭(zheng)法之由(you)來(lai)。

d. 洗(xi)去(qu)檢體與帶(dai)有(you)酶的(de)抗原(yuan)，加入酶底物(wu)使(shi)酶呈色(se)，當檢(jian)體(ti)中(zhong)抗(kang)原(yuan)量越多(duo)，代(dai)表塑膠(jiao)孔盤內留下之帶(dai)有(you)酶的(de)抗原(yuan)越少(shao)，顯色(se)也就越淺。

e. 當需(xu)要(yao)偵(zhen)測(ce)無法獲得(de)兩(liang)種以上單(dan)壹(yi)性(xing)抗(kang)ti的(de)抗原(yuan)，或(huo)是不(bu)易(yi)得(de)到(dao)足夠的(de)純化抗(kang)ti以固著(zhu)於(yu)孔盤上時(shi)，壹(yi)般會考慮(lv)使(shi)用(yong)競(jing)爭(zheng)法ELISA。

常(chang)見(jian)問(wen)題解(jie)析：

1、試劑的(de)選擇(ze)：選擇(ze)優(you)良試劑大(da)家都(dou)是知(zhi)道的(de)，但是在檢測(ce)之前(qian)還(hai)應(ying)該(gai)提前(qian)半(ban)個(ge)小(xiao)時(shi)將試劑拿(na)到(dao)常(chang)溫下進(jin)行解(jie)凍。

2、加(jia)樣(yang)中(zhong)可(ke)能(neng)遇(yu)到(dao)的(de)問(wen)題。

3、洗(xi)板(ban)時(shi)容易造成(cheng)誤差(cha)。

4、顯(xian)色(se)問(wen)題：使(shi)用(yong)了(le)過(guo)期的(de)顯色(se)劑或(huo)者(zhe)是(shi)顯(xian)色(se)劑用(yong)過(guo)後放(fang)置(zhi)時(shi)間(jian)太(tai)長，都(dou)有(you)可能(neng)造(zao)成(cheng)顯色(se)劑不(bu)顯(xian)色(se)。

5、終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)：在加終(zhong)止劑的(de)時(shi)候(hou)由於(yu)傾倒速度(du)快，產(chan)生氣(qi)泡(pao)，造成(cheng)假(jia)陽性(xing)結(jie)果(guo)，所以在倒終止(zhi)劑的(de)時(shi)候(hou)要緩(huan)慢倒。

6、讀板：讀板的(de)時(shi)候(hou)首先應(ying)該(gai)保證(zheng)板(ban)的(de)清(qing)潔幹(gan)凈(jing)。

訂(ding)購(gou)說(shuo)明(ming):

※關(guan)於(yu)產(chan)品售(shou)價(jia),由於(yu)市(shi)場的(de)不(bu)穩(wen)定性(xing),價(jia)格變(bian)動是必然的(de),但是我(wo)們(men)可以提供當下(xia)公(gong)允的(de)市(shi)場價(jia)格,批(pi)量訂購(gou)還(hai)可(ke)享受(shou)相(xiang)應(ying)的(de)優(you)惠活動;

※關(guan)於(yu)產(chan)品的(de)具(ju)體(ti)信(xin)息,本頁面展示的(de)內容僅(jin)供參考(kao),而(er)詳(xiang)細的(de)產(chan)品信息,可以咨詢(xun)我們(men);

※關(guan)於(yu)運(yun)費問(wen)題,批量訂(ding)購(gou)可(ke)免(mian)郵(you),本品采用(yong)低(di)溫箱冷(leng)凍保存;

※關(guan)於(yu)服務(wu),我們(men)提供完整的(de)售(shou)前(qian)售(shou)後服務(wu),並貫(guan)穿(chuan)妳的(de)整個實驗過(guo)程,如遇(yu)技術問(wen)題,可隨時(shi)聯(lian)系我(wo)們,我們真誠(cheng)地(di)為(wei)您(nin)答疑解(jie)惑。

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