人(ren)可溶性血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(sEPCR)ELISA試(shi)劑盒

人(ren)可(ke)溶(rong)性血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(sEPCR)ELISA試(shi)劑盒

ELISA法(fa)是免疫(yi)診(zhen)斷中的壹(yi)項(xiang)新技術，現已(yi)成(cheng)功(gong)地(di)應用於多(duo)種病(bing)原微(wei)生(sheng)物(wu)所引(yin)起的傳染病(bing)、寄(ji)生(sheng)蟲病(bing)及(ji)非傳染病(bing)等方(fang)面(mian)的(de)免(mian)疫(yi)診(zhen)斷。也(ye)已(yi)應用於大(da)分(fen)子(zi)抗原和(he)小(xiao)分(fen)子(zi)抗原的(de)定量(liang)測定，根據(ju)已(yi)經使(shi)用(yong)的結(jie)果(guo)，認(ren)為ELISA法(fa)具有靈敏、特異(yi)、簡(jian)單、快速(su)、穩(wen)定及(ji)易於自(zi)動化(hua)操(cao)作(zuo)等特點。不僅(jin)適用於臨(lin)床(chuang)標(biao)本(ben)的(de)檢(jian)查(zha)，而且(qie)由(you)於壹(yi)天(tian)之(zhi)內可(ke)以(yi)檢(jian)查(zha)幾百(bai)甚(shen)至(zhi)上(shang)千(qian)份(fen)標(biao)本(ben),因(yin)此(ci)，也適合於血(xue)清流(liu)行(xing)病(bing)學調查(zha)。本(ben)法(fa)不僅可以(yi)用(yong)來(lai)測定抗ti，而(er)且(qie)也可(ke)用於測定體液(ye)中的循環抗原，所(suo)以(yi)也(ye)是壹種(zhong)早(zao)期(qi)診(zhen)斷的(de)良(liang)好(hao)方(fang)法。因此(ci)ELISA法(fa)在(zai)生(sheng)物(wu)醫學(xue)各領(ling)域(yu)的應用範圍日(ri)益擴大(da)，

免(mian)責(ze)聲明(ming)

1. 試(shi)劑盒僅供研究(jiu)使(shi)用(yong)，不得(de)用於臨(lin)床(chuang)實(shi)驗(yan)或(huo)人(ren)體實(shi)驗(yan)，否則(ze)所(suo)產(chan)生(sheng)的(de)壹切(qie)後果(guo)，由(you)實驗者承擔，本(ben)公(gong)司(si)概(gai)不負責。

2. 嚴(yan)格按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，實驗(yan)者違(wei)反(fan)說(shuo)明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)，後果(guo)由(you)實驗者承擔。

3. 產(chan)品(pin)特點

壹(yi)、高(gao)效(xiao)、靈敏、特異(yi)的(de)抗ti；

二(er)、穩(wen)定的(de)重復(fu)性和可(ke)靠性；

三(san)、吸(xi)附性能好(hao)，空(kong)白(bai)值(zhi)低(di)，孔(kong)底(di)透(tou)明(ming)度(du)高的固相載體；

四(si)、適用血(xue)清、血(xue)漿、組織勻(yun)漿(jiang)液(ye)、細胞(bao)培養上(shang)清液(ye)、尿液(ye)等等多種(zhong)標(biao)本(ben)類(lei)型(xing)；

五(wu)、節(jie)省實驗經費(fei)。

elisa試(shi)劑盒回收(shou)率(lv)是反(fan)應待測物在(zai)樣品(pin)分(fen)析過(guo)程中的損失的程度(du)，損失越少，回收(shou)率(lv)越高，如果(guo)作(zuo)標(biao)液(ye)1PPM，就是1毫克/升(sheng)，而(er)作(zuo)出標(biao)準數據(ju)為0.99毫克/升(sheng)，就是說(shuo)妳的回收(shou)率(lv)是99%，這個與真(zhen)實成(cheng)分(fen)有密(mi)切的(de)關系(xi)，說(shuo)明(ming)方(fang)法的準(zhun)確度(du)。比如水(shui)中總(zong)無機(ji)氯含(han)量(liang)測定，樣品(pin)水中含有(you)無機(ji)氯20mg/L，取(qu)100mL被(bei)測水樣品(pin)，加入(ru)0.1mL濃度(du)為10mg/mL的含(han)無機(ji)氯標(biao)準樣(yang)品(pin)，測定時(shi)忽略(lve)體積(ji)變化(hua)，如果(guo)測定出樣(yang)品(pin)中無機(ji)氯為29.8mg/L，則(ze)認(ren)為回收(shou)率(lv)為99%。

人可(ke)溶(rong)性血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(sEPCR)ELISA試(shi)劑盒

組成(cheng)結構(gou)

1、血(xue)清：操(cao)作(zuo)過程中避(bi)免(mian)任何細胞刺激。使(shi)用(yong)不含(han)熱原和內(nei)du素的試(shi)管(guan)。收(shou)集(ji)血(xue)液(ye)後，1000×g離心10分(fen)鐘將(jiang)血(xue)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離。

2、血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)suan鹽、肝(gan)素血(xue)漿可(ke)用於檢(jian)測。1000×g離心30分(fen)鐘去(qu)除顆(ke)粒(li)。

3、細(xi)胞上(shang)清液(ye)：1000×g離心10分(fen)鐘去(qu)除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物。

4、組織勻(yun)漿(jiang)：將組織加入(ru)適量生(sheng)理鹽水(shui)搗碎(sui)。1000×g離心10分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清液(ye)。

5、保存(cun)：如果(guo)樣(yang)品(pin)不立即使(shi)用(yong)，應將其(qi)分(fen)成(cheng)小(xiao)部(bu)分(fen)-70℃保存(cun)，避(bi)免(mian)反(fan)復冷凍(dong)。盡可能的不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶血(xue)或高(gao)血(xue)脂(zhi)血(xue)。如果(guo)血(xue)清中大(da)量顆(ke)粒(li)，檢(jian)測前先(xian)離心或過濾。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或更(geng)高的溫(wen)度(du)加熱(re)解(jie)凍(dong)。應在(zai)室溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品(pin)均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。

試(shi)劑盒成(cheng)分(fen)

1 預包(bao)被(bei)板(ban): 抗小(xiao)鼠(shu)白(bai)介(jie)素-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合純化 96T

2 酶標(biao)記(ji)抗ti: (30倍(bei)濃(nong)縮(suo))HRP標(biao)記(ji)抗小(xiao)鼠(shu)白(bai)介(jie)素-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合純化 0.4mL x 1

3 標(biao)準品(pin): 重組小(xiao)鼠(shu)白(bai)介(jie)素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩沖(chong)液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫(wen)20 BPS 30mL x 1

5 標(biao)記(ji)抗ti稀釋(shi)液(ye): 含1% BSA, 0.05%吐(tu)溫(wen)20 BPS 12mL x 1

6 顯色(se)劑: TMB底(di)物(wu)液(ye) 15mL x 1

7 終(zhong)止液(ye): 1N硫suan 12mL x 1

8 濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye): (40倍(bei)濃(nong)縮(suo)) 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫(wen)20 BPS 50mL x 1 操(cao)作(zuo)說(shuo)明(ming) 1實驗(yan)所(suo)需器材(cai)(但(dan)試(shi)劑盒沒有提供) 酶標(biao)儀(450nm) 微(wei)移(yi)液(ye)管(guan)及(ji)其(qi)吸(xi)嘴(zui) 量筒(tong)及(ji)燒杯 去(qu)離子(zi)水(shui) 冰箱(xiang)(4°C) 坐(zuo)標(biao)紙(zhi)(log/log) 吸水(shui)紙(zhi) 試管(guan)(用(yong)於標(biao)準品(pin)稀釋(shi)) 溫(wen)育箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗(xi)瓶(ping) (用於洗(xi)板) 壹(yi)次性試劑管(guan)(用(yong)於濃(nong)縮(suo)酶標(biao)記(ji)抗ti和顯色(se)劑)

常用(yong)方(fang)法及(ji)原理如下(xia)：

1. 夾(jia)心法：

夾(jia)心法常用(yong)於檢(jian)測大(da)分(fen)子(zi)抗原，壹(yi)般的(de)操(cao)作(zuo)步驟為:

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹(yi)性的抗ti固(gu)著(zhu)（coating）於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待測檢(jian)體，檢(jian)體中若含(han)有待(dai)測的抗原，則(ze)其(qi)會與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵結

c. 洗(xi)去多(duo)余(yu)待測檢(jian)體，加入(ru)另(ling)壹種(zhong)對抗原專(zhuan)壹的(de)壹(yi)次抗ti，與待(dai)測抗原進行(xing)鍵結

d. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結壹次抗ti，加入(ru)帶(dai)有酶的二(er)次抗ti，與壹(yi)次抗ti鍵結

e. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結二次抗ti，加入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酵(jiao)素呈色(se)，以(yi)肉(rou)眼或(huo)儀(yi)器讀(du)取(qu)呈(cheng)色(se)結(jie)果(guo)

原(yuan)理：針對抗原分(fen)子(zi)上(shang)2個不同抗原決定簇(cu)的(de)單(dan)克隆抗ti分(fen)別作(zuo)為固相(xiang)抗ti和(he)酶標(biao)抗ti，將(jiang)大(da)分(fen)子(zi)抗原分(fen)別制備(bei)固(gu)相(xiang)抗原和(he)酶標(biao)抗原結(jie)合物。

2. 間(jian)接法(fa)

間(jian)接法(fa)常用(yong)於檢(jian)測抗ti，壹(yi)般的(de)操(cao)作(zuo)步驟為：

a. 將(jiang)已(yi)知的抗原固(gu)著(zhu)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)的抗原。

b. 加入(ru)待測檢(jian)體，檢(jian)體中若含(han)有待(dai)測的壹次抗ti，則(ze)其(qi)會與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗原進行(xing)專(zhuan)壹性鍵結。

c. 洗(xi)去多(duo)余(yu)待測檢(jian)體，加入(ru)帶(dai)有酶的二(er)次抗ti，與待(dai)測的壹次抗ti鍵結。

d. 洗(xi)去多(duo)余(yu)未鍵結二次抗ti，加入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酶呈色(se)，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測定塑膠(jiao)盤中的吸(xi)光值(zhi)（OD值(zhi)），以(yi)評(ping)估有(you)色(se)終(zhong)產(chan)物(wu)的(de)含(han)量即可(ke)測量待測抗ti的(de)含(han)量。

原(yuan)理：利用酶標(biao)記(ji)的抗抗ti以(yi)檢(jian)測已(yi)與固(gu)相結(jie)合的受檢(jian)抗ti。

3. 競爭法

競爭法是壹種(zhong)較少用到(dao)的ELISA檢(jian)測機制，壹(yi)般用(yong)於檢(jian)測小(xiao)分(fen)子(zi)抗原，其(qi)操(cao)作(zuo)步驟為：

a. 將(jiang)具有專(zhuan)壹(yi)性的抗ti固(gu)著(zhu)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)，完(wan)成(cheng)後洗(xi)去多(duo)余(yu)抗ti

b. 加入(ru)待測檢(jian)體，使(shi)檢(jian)體中的待(dai)測抗原與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵結

c. 加入(ru)帶(dai)有酶的抗原，此(ci)抗原也(ye)可與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)的(de)抗ti進行(xing)專(zhuan)壹性鍵結，由(you)於塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)固(gu)著(zhu)的(de)抗ti數量(liang)有限，因此(ci)當檢(jian)體中抗原的(de)量越多，則(ze)帶(dai)有酶的抗原可(ke)鍵結的固(gu)著(zhu)抗ti就越少，亦(yi)即，兩(liang)種(zhong)抗原皆(jie)競相與塑(su)膠孔(kong)盤上(shang)抗ti鍵結，即所(suo)謂(wei)競爭法之由(you)來(lai)。

d. 洗(xi)去檢(jian)體與帶(dai)有酶的抗原，加入(ru)酶底(di)物(wu)使(shi)酶呈色(se)，當(dang)檢(jian)體中抗原量(liang)越多，代表(biao)塑膠(jiao)孔盤內留下(xia)之(zhi)帶(dai)有酶的抗原越少，顯色(se)也(ye)就越淺。

e. 當(dang)需要偵測無法(fa)獲得(de)兩(liang)種以(yi)上(shang)單(dan)壹(yi)性抗ti的(de)抗原，或(huo)是不易得到(dao)足(zu)夠(gou)的(de)純化抗ti以(yi)固(gu)著(zhu)於孔(kong)盤上(shang)時(shi)，壹般會考(kao)慮使(shi)用(yong)競爭法ELISA。

[說(shuo) 明(ming)]

1.由(you)於現有(you)條件(jian)及(ji)科學(xue)技(ji)術水(shui)平(ping)尚不能(neng)對所(suo)有(you)供貨(huo)商(shang)提供的所(suo)有(you)原料(liao)進行(xing)全(quan)面(mian)的(de)鑒(jian)定(ding)與分(fen)析，本(ben)產(chan)品(pin)可能(neng)存在(zai)壹定(ding)的質(zhi)量 技術風險。

2.最(zui)終(zhong)的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)與試(shi)劑的有效(xiao)性、實驗(yan)者的相關(guan)操(cao)作(zuo)以(yi)及(ji) 當時(shi)的實(shi)驗環境密(mi)切相(xiang)關，請(qing)務必(bi)準備(bei)充足(zu)的(de)標(biao)本(ben)備(bei)份。

3.不(bu)同批(pi)次的同壹產(chan)品(pin)可能(neng)會有(you)少許差(cha)別，如:檢(jian)測限、靈敏度(du)以(yi)及(ji)顯色(se)時(shi)間(jian)等，請(qing)依據(ju)試(shi)劑盒內說(shuo)明(ming)書(shu)進行(xing)實(shi)驗操(cao)作(zuo)，網(wang)站(zhan)電(dian)子(zi)版(ban)說(shuo)明(ming)書(shu)僅作(zuo)參考(kao)。

4.只(zhi)有(you)全(quan)部使(shi)用(yong)本(ben)試(shi)劑盒配套(tao)試劑才(cai)能(neng)保證(zheng)檢(jian)測效(xiao)果(guo)，不(bu)能混用其(qi)他制造(zao)商(shang)的(de)產(chan)品(pin)。只有(you)嚴格遵守本(ben)試(shi)劑盒的實(shi)驗說(shuo)明(ming)才(cai)會得(de)到(dao)最(zui)jia的(de)檢(jian)測結果(guo)。

5.本(ben)公(gong)司(si)只對試(shi)劑盒本(ben)身(shen)負責，不(bu)對因(yin)使(shi)用(yong)該試(shi)劑盒所造(zao)成(cheng)的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗(hao)負責，請(qing)使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前充分(fen)考慮到(dao)樣本(ben)的(de)可能使(shi)用(yong)量，預(yu)留充足(zu)的(de)樣(yang)本(ben)。

6.使(shi)用(yong)化學(xue)裂解(jie)液(ye)制備(bei)的組織勻(yun)漿(jiang)或細胞提取(qu)液(ye)可能(neng)會由(you)於某(mou)些化(hua)學物質(zhi)的(de)引(yin)入導(dao)致ELISA實(shi)驗(yan)結果(guo)偏差(cha)。

7.若(ruo)樣(yang)本(ben)為細胞(bao)培養上(shang)清，因(yin)該類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾因素較多，如(ru):細(xi)胞(bao)狀態(tai)、細胞(bao)數量(liang)、采樣(yang)時(shi)間(jian)等，所以(yi)可(ke)能存在(zai)檢(jian)測不出的(de)情況(kuang)。

8.某(mou)些天(tian)然(ran)蛋白(bai)或重組蛋(dan)白，包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真核(he)重組蛋(dan)白，可(ke)能因(yin)為與本(ben)產(chan)品(pin)所使(shi)用(yong)的檢(jian)測抗ti及(ji)捕獲抗ti不(bu)匹配(pei)，而(er)不(bu)被檢(jian)測出。

 深(shen)圳(zhen)瑞清生(sheng)物(wu)信息(xi)科技(ji)有限公司(si)的產(chan)品(pin)在(zai)相當(dang)寬的(de)領(ling)域(yu)得到(dao)廣(guang)泛的(de)應用，長(chang)期(qi)和各(ge)大(da)高校(xiao)、研(yan)究(jiu)機構(gou)、工(gong)廠(chang)、企業(ye)等建(jian)立了深(shen)厚(hou)的合作(zuo)關系(xi)，我們(men)的企(qi)業(ye)文(wen)化是為樹立行(xing)業(ye)的地(di)位而(er)不懈努力，為科研(yan)事業(ye)貢獻綿薄(bo)之力！公(gong)司(si)的核(he)心價值(zhi)是誠(cheng)信(xin)為本(ben)，為客戶(hu)提供高品(pin)質的(de)產品(pin)、為員工(gong)提供發展(zhan)平(ping)臺(tai)、為社會創(chuang)造(zao)更(geng)多價值(zhi)。

深(shen)圳(zhen)瑞清生(sheng)物(wu)信息(xi)科技(ji)有限公司(si)具有良(liang)好(hao)的(de)市(shi)場信(xin)譽(yu)，我(wo)們(men)有壹(yi)支(zhi)由(you)生(sheng)物(wu)技術、化(hua)學(xue)、精(jing)細化工(gong)等專業(ye)畢業(ye)的大(da)學生(sheng)組成(cheng)的專(zhuan)業(ye)的銷售和(he)技(ji)術服(fu)務團(tuan)隊(dui)，過(guo)硬的產(chan)品(pin)、合理的價格、優(you)質的(de)服(fu)務為不同類(lei)型(xing)的客(ke)戶(hu)提供專業(ye)的實驗室配(pei)備(bei)解(jie)決方(fang)案(an)。

公(gong)司(si)其(qi)他產品(pin)：

小(xiao)鼠(shu)受磷(lin)蛋白(bai)(PLN)elisa試(shi)劑盒

果(guo)膠(jiao)含量(liang)測試盒

抗壞血(xue)酸（AsA）含(han)量測試盒