植(zhi)物葉(ye)綠(lv)素酶(mei)(chlorophyllase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

植(zhi)物葉(ye)綠(lv)素酶(mei)(chlorophyllase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

ELISA法(fa)是(shi)免疫(yi)診斷中(zhong)的壹(yi)項新(xin)技(ji)術(shu)，現已(yi)成功地(di)應(ying)用(yong)於(yu)多種(zhong)病(bing)原(yuan)微生物所(suo)引(yin)起(qi)的傳(chuan)染病、寄(ji)生(sheng)蟲(chong)病(bing)及(ji)非傳(chuan)染病等方面的免疫(yi)診斷。也(ye)已(yi)應(ying)用(yong)於(yu)大分子(zi)抗(kang)原(yuan)和(he)小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)的定量(liang)測(ce)定，根據(ju)已(yi)經(jing)使用(yong)的結(jie)果(guo)，認(ren)為(wei)ELISA法(fa)具(ju)有(you)靈敏、特(te)異、簡(jian)單(dan)、快(kuai)速、穩(wen)定及易(yi)於(yu)自動化操(cao)作(zuo)等特(te)點。不(bu)僅(jin)適用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)標本的檢(jian)查(zha)，而且由於壹(yi)天之(zhi)內可以檢(jian)查(zha)幾(ji)百(bai)甚(shen)至上(shang)千份標本,因(yin)此，也(ye)適合於血(xue)清(qing)流(liu)行(xing)病學(xue)調(tiao)查(zha)。本法(fa)不(bu)僅(jin)可(ke)以用(yong)來測(ce)定抗(kang)ti，而且也(ye)可(ke)用(yong)於(yu)測(ce)定體液中的循環(huan)抗(kang)原，所以(yi)也(ye)是(shi)壹(yi)種(zhong)早期(qi)診斷的良好(hao)方(fang)法。因此ELISA法(fa)在(zai)生物(wu)醫學(xue)各領(ling)域(yu)的應用(yong)範圍(wei)日(ri)益擴(kuo)大，

免責聲(sheng)明

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)僅(jin)供(gong)研(yan)究使用(yong)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)實驗或(huo)人(ren)體實(shi)驗(yan)，否(fou)則所(suo)產生的壹(yi)切後(hou)果(guo)，由實驗(yan)者承(cheng)擔，本(ben)公(gong)司(si)概不(bu)負(fu)責。

2. 嚴(yan)格按照(zhao)說(shuo)明書(shu)操作，實(shi)驗者違(wei)反(fan)說(shuo)明(ming)書(shu)操作，後(hou)果由實驗(yan)者承(cheng)擔。

3. 產(chan)品特(te)點

壹(yi)、高(gao)效(xiao)、靈敏、特(te)異的抗ti；

二(er)、穩(wen)定的重復性和可(ke)靠(kao)性；

三、吸(xi)附(fu)性能(neng)好(hao)，空(kong)白(bai)值(zhi)低(di)，孔底透明度(du)高(gao)的固相(xiang)載體；

四(si)、適用(yong)血(xue)清、血漿、組(zu)織勻漿液、細胞培養(yang)上清(qing)液、尿液等等多種(zhong)標(biao)本(ben)類型；

五、節(jie)省(sheng)實(shi)驗(yan)經(jing)費。

elisa試(shi)劑(ji)盒(he)回(hui)收率(lv)是(shi)反應待測(ce)物在(zai)樣(yang)品分(fen)析(xi)過(guo)程中的損(sun)失(shi)的程度(du)，損(sun)失(shi)越少，回(hui)收率(lv)越高(gao)，如果(guo)作標液1PPM，就是1毫(hao)克/升，而作出標(biao)準(zhun)數據(ju)為(wei)0.99毫(hao)克/升，就是說妳(ni)的回(hui)收率(lv)是(shi)99%，這個(ge)與(yu)真實(shi)成分(fen)有(you)密切(qie)的關系(xi)，說明(ming)方(fang)法的準確(que)度。比(bi)如(ru)水(shui)中(zhong)總無(wu)機(ji)氯含量(liang)測(ce)定，樣(yang)品水(shui)中(zhong)含有(you)無(wu)機(ji)氯20mg/L，取100mL被測(ce)水(shui)樣(yang)品，加(jia)入(ru)0.1mL濃度(du)為(wei)10mg/mL的含無(wu)機(ji)氯標準樣(yang)品，測(ce)定時忽(hu)略體積變(bian)化，如(ru)果(guo)測(ce)定出樣(yang)品中(zhong)無(wu)機(ji)氯為(wei)29.8mg/L，則認(ren)為(wei)回(hui)收率(lv)為(wei)99%。

植(zhi)物葉(ye)綠(lv)素酶(mei)(chlorophyllase)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

組(zu)成結(jie)構(gou)

1、血(xue)清(qing)：操作過(guo)程中避免任何(he)細胞刺激(ji)。使用(yong)不(bu)含(han)熱原和(he)內du素的試(shi)管。收(shou)集(ji)血液後，1000×g離心10分(fen)鐘(zhong)將血(xue)紅細(xi)胞迅速小(xiao)心(xin)地分(fen)離。

2、血漿(jiang)：EDTA、檸檬suan鹽(yan)、肝素血(xue)漿可用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。1000×g離心(xin)30分鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒。

3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘(zhong)去除(chu)顆(ke)粒和聚(ju)合(he)物(wu)。

4、組(zu)織勻漿：將組(zu)織加(jia)入(ru)適量(liang)生理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。1000×g離心(xin)10分鐘(zhong)，取上清(qing)液。

5、保存：如果(guo)樣(yang)品不(bu)立(li)即(ji)使(shi)用(yong)，應(ying)將其分(fen)成小(xiao)部(bu)分-70℃保(bao)存，避免反(fan)復冷凍(dong)。盡可能(neng)的不(bu)要(yao)使(shi)用(yong)溶(rong)血或(huo)高(gao)血脂(zhi)血。如果血清中(zhong)大量(liang)顆粒(li)，檢(jian)測(ce)前先離心(xin)或(huo)過(guo)濾(lv)。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或(huo)更(geng)高(gao)的溫度加(jia)熱解(jie)凍(dong)。應在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍(dong)並確(que)保樣(yang)品均勻地充分解(jie)凍(dong)。

試(shi)劑(ji)盒(he)成分(fen)

1 預(yu)包被(bei)板(ban): 抗(kang)小鼠(shu)白介(jie)素-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合(he)純(chun)化 96T

2 酶(mei)標(biao)記(ji)抗ti: (30倍(bei)濃縮(suo))HRP標(biao)記(ji)抗小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素-6兔(tu)子(zi)IgG,親(qin)合(he)純(chun)化 0.4mL x 1

3 標(biao)準(zhun)品: 重(zhong)組(zu)小鼠(shu)白介(jie)素-6 0.5mL x 2

4 EIA緩(huan)沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標記(ji)抗ti稀(xi)釋(shi)液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑(ji): TMB底物液 15mL x 1

7 終(zhong)止(zhi)液: 1N硫suan 12mL x 1

8 濃縮(suo)洗(xi)滌液: (40倍(bei)濃縮(suo)) 含(han)1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明(ming) 1實(shi)驗(yan)所(suo)需器材(cai)(但試(shi)劑(ji)盒(he)沒有(you)提(ti)供(gong)) 酶(mei)標儀(yi)(450nm) 微移液管及(ji)其吸(xi)嘴(zui) 量(liang)筒(tong)及燒(shao)杯(bei) 去離子(zi)水(shui) 冰(bing)箱(xiang)(4°C) 坐標紙(log/log) 吸(xi)水(shui)紙(zhi) 試(shi)管(用(yong)於(yu)標準品稀(xi)釋(shi)) 溫育(yu)箱(xiang)(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用(yong)於(yu)洗板(ban)) 壹(yi)次(ci)性試(shi)劑(ji)管(用(yong)於(yu)濃縮(suo)酶(mei)標記(ji)抗ti和(he)顯(xian)色(se)劑(ji))

常用(yong)方(fang)法及原理(li)如(ru)下：

1. 夾(jia)心(xin)法(fa)：

夾(jia)心(xin)法(fa)常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)，壹(yi)般的操作(zuo)步(bu)驟為(wei):

a. 將(jiang)具(ju)有(you)專壹(yi)性的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)（coating）於(yu)塑膠孔(kong)盤上，完(wan)成後(hou)洗(xi)去多余(yu)抗(kang)ti

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢(jian)體，檢(jian)體中(zhong)若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測(ce)的抗原(yuan)，則其會(hui)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗(kang)ti進(jin)行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)

c. 洗(xi)去多余(yu)待測(ce)檢(jian)體，加(jia)入(ru)另壹(yi)種(zhong)對(dui)抗(kang)原(yuan)專壹(yi)的壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待測(ce)抗原(yuan)進行(xing)鍵(jian)結(jie)

d. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入(ru)帶有酶的二次(ci)抗(kang)ti，與(yu)壹(yi)次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)

e. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入(ru)酶底物使酵(jiao)素呈色，以(yi)肉眼或(huo)儀(yi)器讀(du)取呈色結(jie)果(guo)

原(yuan)理(li)：針對(dui)抗(kang)原(yuan)分(fen)子(zi)上(shang)2個(ge)不(bu)同(tong)抗(kang)原(yuan)決定簇的單(dan)克隆(long)抗(kang)ti分(fen)別作(zuo)為(wei)固(gu)相(xiang)抗(kang)ti和(he)酶(mei)標(biao)抗(kang)ti，將(jiang)大(da)分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)分(fen)別制(zhi)備固(gu)相(xiang)抗原(yuan)和(he)酶(mei)標(biao)抗原(yuan)結(jie)合(he)物(wu)。

2. 間接(jie)法

間接(jie)法常用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)抗(kang)ti，壹(yi)般的操作(zuo)步(bu)驟為(wei)：

a. 將(jiang)已(yi)知(zhi)的抗原(yuan)固(gu)著於塑膠孔(kong)盤上，完(wan)成後(hou)洗(xi)去多余(yu)的抗原(yuan)。

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢(jian)體，檢(jian)體中(zhong)若(ruo)含(han)有(you)待(dai)測(ce)的壹(yi)次(ci)抗(kang)ti，則其會(hui)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗原(yuan)進(jin)行專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)。

c. 洗(xi)去多余(yu)待測(ce)檢(jian)體，加(jia)入(ru)帶有酶的二次(ci)抗(kang)ti，與(yu)待測(ce)的壹(yi)次(ci)抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)。

d. 洗(xi)去多余(yu)未(wei)鍵(jian)結(jie)二(er)次(ci)抗(kang)ti，加(jia)入(ru)酶底物使酶(mei)呈色，藉(ji)儀(yi)器（ELISA reader）測(ce)定塑膠盤中的吸(xi)光(guang)值(zhi)（OD值(zhi)），以(yi)評估有(you)色(se)終(zhong)產物(wu)的含量(liang)即可(ke)測(ce)量(liang)待測(ce)抗(kang)ti的含量(liang)。

原(yuan)理(li)：利(li)用(yong)酶(mei)標記(ji)的抗抗(kang)ti以(yi)檢(jian)測(ce)已與(yu)固相(xiang)結(jie)合(he)的受檢(jian)抗(kang)ti。

3. 競(jing)爭(zheng)法(fa)

競(jing)爭(zheng)法(fa)是壹(yi)種(zhong)較少用(yong)到(dao)的ELISA檢(jian)測(ce)機(ji)制，壹(yi)般用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)小分(fen)子(zi)抗(kang)原(yuan)，其操(cao)作步驟為(wei)：

a. 將(jiang)具(ju)有(you)專壹(yi)性的抗(kang)ti固(gu)著(zhu)於(yu)塑膠孔(kong)盤上，完(wan)成後(hou)洗(xi)去多余(yu)抗(kang)ti

b. 加(jia)入(ru)待測(ce)檢(jian)體，使(shi)檢(jian)體中(zhong)的待測(ce)抗原(yuan)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗(kang)ti進(jin)行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)

c. 加(jia)入(ru)帶有酶的抗原(yuan)，此抗原也(ye)可(ke)與(yu)塑膠孔(kong)盤上的抗(kang)ti進(jin)行(xing)專壹(yi)性鍵(jian)結(jie)，由於塑膠孔(kong)盤上固著的抗(kang)ti數量(liang)有限，因(yin)此當檢(jian)體中(zhong)抗(kang)原(yuan)的量(liang)越多，則帶(dai)有酶的抗原(yuan)可(ke)鍵(jian)結(jie)的固著(zhu)抗(kang)ti就越少，亦(yi)即，兩(liang)種(zhong)抗(kang)原(yuan)皆(jie)競(jing)相(xiang)與(yu)塑膠孔(kong)盤上抗(kang)ti鍵(jian)結(jie)，即(ji)所(suo)謂(wei)競(jing)爭(zheng)法(fa)之(zhi)由來。

d. 洗(xi)去檢(jian)體與(yu)帶有(you)酶的抗原(yuan)，加(jia)入(ru)酶底物使酶(mei)呈色，當檢(jian)體中(zhong)抗(kang)原(yuan)量(liang)越多，代表(biao)塑膠孔(kong)盤內留下之(zhi)帶(dai)有(you)酶(mei)的抗原(yuan)越少，顯色(se)也(ye)就越淺。

e. 當需要(yao)偵測(ce)無法(fa)獲得(de)兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)單(dan)壹(yi)性抗(kang)ti的抗原(yuan)，或(huo)是(shi)不(bu)易(yi)得(de)到(dao)足(zu)夠的純(chun)化抗(kang)ti以(yi)固(gu)著(zhu)於孔(kong)盤上時，壹(yi)般會(hui)考慮(lv)使用(yong)競(jing)爭法ELISA。

常見(jian)問題(ti)解(jie)析：

1、試(shi)劑(ji)的選擇：選擇優(you)良試(shi)劑(ji)大(da)家都(dou)是知(zhi)道的，但是(shi)在(zai)檢(jian)測(ce)之(zhi)前還應(ying)該(gai)提(ti)前半個(ge)小時(shi)將試(shi)劑(ji)拿(na)到常溫下進行解(jie)凍(dong)。

2、加(jia)樣(yang)中可(ke)能(neng)遇到的問題(ti)。

3、洗(xi)板(ban)時(shi)容易造(zao)成誤(wu)差(cha)。

4、顯(xian)色(se)問(wen)題：使(shi)用(yong)了(le)過(guo)期(qi)的顯色(se)劑(ji)或(huo)者是顯(xian)色劑(ji)用(yong)過(guo)後放置時間太(tai)長(chang)，都(dou)有可(ke)能(neng)造(zao)成顯(xian)色(se)劑(ji)不(bu)顯(xian)色(se)。

5、終(zhong)止(zhi)反(fan)應：在(zai)加(jia)終(zhong)止(zhi)劑(ji)的時候(hou)由於傾(qing)倒(dao)速(su)度快(kuai)，產生(sheng)氣(qi)泡，造(zao)成假(jia)陽(yang)性結(jie)果(guo)，所(suo)以(yi)在(zai)倒終(zhong)止(zhi)劑(ji)的時候(hou)要(yao)緩(huan)慢(man)倒(dao)。

6、讀(du)板(ban)：讀(du)板(ban)的時候(hou)首(shou)先應該(gai)保證板(ban)的清潔(jie)幹(gan)凈(jing)。

訂購說(shuo)明(ming):

※關(guan)於(yu)產(chan)品售(shou)價,由於市(shi)場的不(bu)穩(wen)定性,價格變(bian)動(dong)是(shi)必然(ran)的,但是(shi)我們(men)可以(yi)提(ti)供(gong)當下(xia)公(gong)允的市(shi)場價格,批量(liang)訂購還(hai)可(ke)享(xiang)受相(xiang)應的優(you)惠活(huo)動(dong);

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